实验干货+文末互动有礼 | 瑞沃德病理切片机在大鼠宫腔粘连模型中的应用
前言
宫腔粘连(intrauterine adhesions,IUA)又称阿谢曼综合征(Asherman syndrome),是指由创伤、感染等原因引起子宫内膜特别是基底层内膜损伤,进而导致子宫腔及宫颈部分或全部粘连甚至闭锁,属于宫腔操作后的远期并发症,主要临床表现包括周期性痉挛性下腹痛、月经量过少或闭经、继发不孕等。一般来说,宫腔粘连的一个常见原因是手术过程中子宫腔的人工创伤,例如刮宫术、剖宫产和子宫肌切除术,这可能会损伤子宫内膜基底层。肺结核和其他感染可能导致子宫内膜的慢性炎症,这也是粘连的诱因。此外,先天性苗勒管畸形(如子宫败中隔)会增加宫腔粘连的发病率。创伤、感染和遗传易感性导致子宫内膜自发恢复和血管生成丧失,引发子宫内膜粘连。由于三分之二的宫腔粘连女性接受过流产/流产后刮宫术,因此有必要采取措施防止侵入性子宫腔手术后粘连。
材料
1
// 实验动物
7-8周龄雌性SD大鼠。
2
// 造模工具及试剂
子宫刮勺、6-10mg/L脂多糖溶液、75-95%酒精溶液
造模方法
大鼠使用瑞沃德小动物麻醉机进行麻醉。暴露腹部,用剃毛器和脱毛膏小心脱去手术部位及附近被毛。
大鼠腹中部下线剪开一切口,小心将子宫暴露出来。从左右子宫连接处剪开一小口,将刮宫勺插入左右子宫之间的连接处,小心翼翼地来回刮擦两个区域,直到子宫肉眼充血。
随后,从开口处注入脂多糖溶液或酒精溶液,使溶液在子宫中停留15min,制造感染条件。操作结束后,子宫归位,腹腔闭合,等待大鼠复苏。术后大鼠进行单笼饲养,防止大鼠互相撕咬创口。
模型评估
手术后8天采集子宫标本。将标本固定在4%多聚甲醛中,脱水,在二甲苯中清除,最后包埋在石蜡中。苏木精和伊红(H&E)染色用于评估子宫的形态结构。Masson染色用图片分析软件(如 ImageJ)评估被染成淡蓝色的纤维化区域。统计子宫内膜腺体数量和纤维化面积(%)。
图1. 子宫形态特征及变化
(子宫外观形态、HE染色、Masson染色)[1]
参考文献:
[1]Zhao, Yun-Xia et al. “Repair abilities of mouse autologous adipose-derived stem cells and ShakeGel?3D complex local injection with intrauterine adhesion by BMP7-Smad5 signaling pathway activation.” Stem cell research & therapy vol. 12,1 191. 18 Mar. 2021, doi:10.1186/s13287-021-02258-0
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