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Lumina荧光分光光度计测量生物发光共振能量转移

上传人: 上海科学仪器有限公司 |大小:1.02MB|浏览:832次|时间:2018-09-12
Lumina荧光分光光度计测量生物发光共振能量转移
文档简介

使用ThermoFisherLumina荧光分光光度计测量生物发光共振能量转移分子之间的能量转移大多是由辐射导致的。然而当不同荧光物质非常靠近时(<10nm),会发生共振能量转移(RET)。荧光共振能量转移(FRET)是一种典型的RET现象。在FRET中,使用强光照射以激发供体能量,处于激发态的供体将一部分或全部能量转移给受体,受体被激发。如果受体荧光量子产率为零,则发生能量转移荧光熄灭;如果受体也是一种荧光发射体则呈现出受体的荧光。光照下很多荧光物质会逐渐失去其荧光特性,这种现象被称为光漂白。为了提高灵敏度,近期生物发光共振能量转移(BRET)得到了广泛应用1。BRET使用生物发光物质代替了荧光供体。由于BRET不在需要直射光线以激发供体,不存在放射性的能量转移,所以避免了对样品的害。荧光素酶是一种萤火虫体内的生物发光酶,被广泛用于BRET研究2。本实验中,选择Luc8(海肾荧光素酶)作为供体,该物质由海肾(Renillareinformis)基因突变而来。Luc8的生物荧光峰值接近480nm。
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