人白介素-12(IL-12)ELISA试剂盒说明书
- 上传人: 上海科学仪器有限公司 |大小:40KB|浏览:320次|时间:2018-09-13
- 文档简介
- 您可能感兴趣的资料
-
上海博取高温PH计130度PHG-2081在线PH计说明书使用说明书
-
上海博取CLG-3086氯离子计使用说明书操作说明书
-
人甲型流感H5N1血凝素蛋白(HA )试剂盒(ELISA) 使用说明书
-
ELISA检测试剂盒细胞中文名称人神经母细胞瘤细胞细胞英文名称SH-SY5Y物种人细胞形态特征上皮样细胞生长
-
小鼠ELISA试剂盒操作较繁杂,操作不当将引起较大的误差。猪白介素8酶免试剂盒,(IL-8/CXCL8)EL
-
小鼠ELISA试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。实验原理:本试剂盒应
-
小鼠ELISA试剂盒生化试剂1-苯基-3-吡唑烷酮按生物体组织中所含有的或是在代谢过程中所产生的物质可分为氨
-
大鼠ELISA试剂盒大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒HumanAspartateaminotra
-
世界ding级实验材料供应商athensresearch正式授权上海起发为其ZG代理,athensresea
-
人8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α试剂盒)酶联免疫分析使用说明书实验原理本试剂盒应用双抗体夹心
人白介素-12(IL-12)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人IL-12单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的IL-12与单抗结合,加入生物素化的抗人IL-12,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,IL-12浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中IL-12浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):4ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成4000pg/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应IL-12含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的IL-12检测浓度小于18pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人IL-12。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10.3%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!
标签: