全部
2021-05-12 15:50发布了技术文章
2021-03-05 10:21发布了技术文章
2021-02-24 10:25发布了技术文章
2021-02-24 10:00发布了技术文章
2021-01-06 13:58发布了技术文章
2020-09-09 13:32发布了技术文章
2020-09-02 16:49发布了问答
一、DNA带模糊
原因：
1.DNA降解；
2.电泳缓冲液陈旧；
3.所用电泳条件不合适；
4.DNA上样量过多；
5.DNA样含盐过高；
6.有蛋白污染；
7.DNA变性。
解决办法：
1.避免核酸酶污染；
2.电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液；
3.电泳时电压不应超过20V/cm，温度<30℃;巨大DNA链电泳，温度应<15℃;核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力；
4.减少凝胶中DNA上样量；
5.电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐；
6.电泳前酚抽提去除蛋白；
7.电泳前勿加热，用20mM NaCI缓冲液稀释DNA。
二、带弱或无DNA带
原因：
1.DNA的上样量不够；
2.DNA降解；
3.DNA走出凝胶；
4.对于EB染色的DNA，所用光源不合适。
解决办法：
1.增加DNA的上样量；聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高，上样量可适当降低；
2.避免DNA的核酸酶污染；
3.缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度；
4.应用短波长（254nm）的紫外光源。
三、DNA带缺失
原因：
1.小DNA带走出凝胶；
2.分子大小相近的DNA带不易分辨；
3.DNA 变性；
4.DNA链巨大，常规凝胶电泳不合适。
解决办法：
1.缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度；
2.增加电泳时间，核准正确的凝胶浓度；
3.电泳前请勿高温加热DNA链，以20mM NaCl Buffer稀释DNA；
4.在脉冲凝胶电泳上分析。
2020-09-02 16:49发布了技术文章
关注微信公众号
yiqi手机版
沪公网安备 31011502008050号