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耗材专区 | EZsep AFB&G免疫亲和柱用于玉米中黄曲霉毒素B族的检测
发布:北京莱伯泰科仪器股份有限公司浏览次数:3前言
黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,简写为AFB1)是已知的化学物质中致癌性最强的一种,对人和动物具有强烈的毒性,其毒性作用主要是对肝脏的损害。
黄曲霉毒素B1存在于土壤,动植物各种坚果,特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般以热带和亚热带等南方高温、高湿地区受污染最为严重,食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。黄曲霉毒素耐热,280℃才可裂解,故一般烹调加工温度下难以被破坏。国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。
本文参考《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定 第三法为高效液相色谱-柱后衍生法》,利用EZsep? AFB&G免疫亲和柱(3mL,20/pk,货号:PZ24102)净化样品,再通过高效液相色谱仪进行检测,建立了一种玉米中黄曲霉毒素B族的分析方法。
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实验过程
1.1 仪器与试剂 SPE1000全自动固相萃取系统,北京仪器股份有限公司;
LC600二元高压梯度高效液相色谱(北京仪器股份有限公司)配光化学衍生器;
E.T.氮吹浓缩仪(货号:C020017),北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
冷冻离心机,GL-20G-Ⅱ,上海安亭科学仪器厂;
EZsepTM AFB&G免疫亲和柱(3mL,20/pk,货号:PZ24102),北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
甲醇(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;
乙腈(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;
超纯水;
0.1%吐温-水:1mL的吐温-20,加水定容至1L。
1.2 工作液配制 乙腈中4种黄曲霉毒素混标储备液:1.0μg/mL,坛墨质检 。
黄曲霉毒素混标中间液:移取黄曲霉毒素混标储备液1mL,用甲醇稀释至10mL容量瓶中,配制成浓度为100ng/mL的中间液。
黄曲霉毒素混标工作液:移取黄曲霉毒素混标中间液1mL,用甲醇稀释至10mL容量瓶中,配制成浓度为10ng/mL的工作液。
分别移取100ng/mL的黄曲霉毒素混标中间液10μL、50μL、200μL、500μL、1 000μL至10 mL容量瓶中,用初始流动相定容至刻度,得到浓度依次为0.1 ng/mL、0.5 ng/ml、2.0 ng/ml、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL的标准工作溶液。
1.3 实验部分 1.3.1 样品制备 称取5g玉米试样(精确至0.01g)于50mL离心管中,加入20.0mL甲醇-水溶液(70+30),涡旋混匀,用均质器10000r/min上下震荡均质3 min,在6000r/min下离心20min。准确移取4mL上清液,加入46mL0.1%吐温-水,混匀,待净化。
1.3.2净化与浓缩 将低温保存的EZsepTM AFB&G免疫亲和柱(3mL,20/pk,北京莱伯帕兹检测科技有限公司,货号:PZ24102)恢复至室温,待免疫亲和柱内原有液体流尽后,移取上述待净化液上样,上样结束后用20mL水分2次淋洗萃取柱,之后在真空状态下干燥1min,最后用2mL甲醇洗脱。洗脱液在40℃下氮吹浓缩至近干,再用流动相定容至1 mL,涡旋混匀,0.22μm滤膜过滤,待检测。
1.3.3 高效液相色谱检测条件 波长:激发波长360nm,发射波长440nm;
流速:1.0mL/min;
柱温:40℃;
进样量:20μL;
流动相:超纯水:甲醇+乙腈(50+50)=68:32。
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实验结果
表1 加标回收率 图1 标准样品色谱图 图2 加标样品色谱图 图3空白样品色谱图 3
实验结论
本实验使用EZsep? AFB&G免疫亲和柱(3mL,20/pk,北京莱伯帕兹检测科技有限公司,货号:PZ24102)对玉米中黄曲霉毒素B族进行净化后通过高效液相色谱仪进行检测,该方法的加标回收率在81.1%~93.2%之间,RSD在2.2%~2.7%之间。回收率和稳定性满足标准要求,说明EZsep? AFB&G免疫亲和柱能很好的完成方法中的净化工作,并且结果稳定、可靠。
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参考文献
[1] GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定 第三法高效液相色谱-柱后衍生法 关于
北京仪器股份有限公司成立于2002年,是一家专业从事实验分析仪器的研发、生产和销售的科技型公司。 自成立之初便致力于为环境检测、食品安全、疾病控制、半导体检测、生命科学、能源化工、核环保、公安司法、地质与地矿、材料研究等众多行业客户提供实用可靠的实验室分析仪器、智能自动化前处理设备、实验室工程和耗材在内的实验室整体解决方案,是全球范围内能将多种类、多功能的样品前处理技术与全自动实验分析检测平台组合成全自动实验分析仪器系统的主要实验分析仪器供应商之一。 拥有LabTech、CDS、Empore等品牌,在中国和美国设有研发和生产基地,并在中国内地主要城市、中国香港、美国马萨诸塞州和宾夕法尼亚州等地设有产品营销和服务中心。目前,公司产品已销往全球90多个国家,累计服务客户3万余家。 未来,将继续秉承自主创新的发展思路,以安全可靠的智能自动化实验室设备和解决方案服务于各行各业,让分析检测更准确、更快速、更智能! 如需了解的更多详情,请访问http://www.labtechgroup.com/。 2024-06-25相关仪器 -
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