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耗材专区 | 全自动凝胶净化-高效液相色谱法测定食用油中胆固醇含量
发布:北京莱伯泰科仪器股份有限公司浏览次数:3前言
胆固醇是动物源性食品中常见的成分,而人类过多食用胆固醇则会引发动脉粥样硬化、高血压、冠心病等一系列心血管疾病以及风湿性关节炎、癌症、糖尿病和帕金森等疾病。据文献报道,食用植物油中一般不含或含有极少量的胆固醇,而动植物组织中通常都含有甾醇,动物油脂的特征性甾醇是胆固醇。因此,可以通过检测食用植物油中的胆固醇含量来判定植物油中是否含有动物油脂,从而推断植物油中是否混有地沟油。
目前常用的胆固醇样品提取净化方法主要是皂化法。而采用凝胶渗透色谱(GPC)进行样品前处理的报道还很罕见。本实验采用LabTech AutoClean全自动凝胶净化系统对植物油提取液进行净化,根据分子排阻色谱原理可有效去除植物油中大分子基体干扰物质,氮吹浓缩后,采用HPLC进行检测,方法简单、快捷,能够很好地去除干扰物对目标物的影响。
1、实验过程
1.1 仪器与试剂 AutoClean全自动凝胶净化系统,北京仪器股份有限公司;
S-X3不锈钢凝胶净化柱(20*300mm),货号:Y020207015,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
LC600二元高压梯度高效液相色谱系统,北京仪器股份有限公司;
E.T.氮吹浓缩仪,货号:C020017,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
甲醇(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;
乙酸乙酯(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;
环己烷(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司。
1.2 工作液配制 胆固醇标准使用溶液:10mg/mL,溶剂为乙醇,购自坛墨质检标准物质中心;
胆固醇标准工作液:取1.0mL的标准储备液于10mL的容量瓶中,用乙醇定容,得到浓度为1.0mg/mL的标样工作液;
分别移取1.0mg/mL的胆固醇标准工作液0.01、0.02、0.05、0.1、0.2mL各置于1.0mL容量瓶中,用乙醇定容至刻度,得到浓度为10、20、50、100、200μg/mL的标准曲线。
1.3 实验部分 1.3.1 样品制备 称取0.5g食用油于50mL离心管中,加入10mL乙酸乙酯-环己烷(1:1)混合溶液,旋涡震荡后,将溶液转移至AutoClean全自动凝胶净化系统的进样瓶中。
1.3.2 凝胶净化处理 将1.3.1中装有提取液的进样瓶放置在AutoClean全自动凝胶净化系统的平台上,以等体积的乙酸乙酯和环己烷混合溶液为流动相,流速:5mL/min;紫外检测波长254nm;收集8~16min馏分于60mL收集瓶中,开始凝胶净化,净化后将60mL收集瓶移至ET浓缩仪中,40℃氮吹至近干,加入1mL乙醇充分溶解,待检测。
1.3.3 LC分析测定条件 色谱柱:C18,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm;
流动相:甲醇;
流速:1.0mL/min;
紫外检测器:检测波长205nm;
柱温:40℃;
进样量:20μL。
2、实验结果
图1 胆固醇标准混合溶液的色谱图 图2 大豆油加标色谱图 图3 玉米胚芽油加标色谱图 3、结论
本实验使用S-X3不锈钢凝胶净化柱(20*300mm)(北京莱伯帕兹检测科技有限公司,货号:Y020207015)对植物油中胆固醇提取液进行净化,回收率在88.8%~97.9%之间,RSD为1.5%~3.6%,回收率高、重现性良好,说明S-X3不锈钢凝胶净化柱(20*300mm)适用于植物油中胆固醇测定的样品净化处理,并且结果稳定、可靠。
4、参考文献
[1] GB 5009.128-2016 食品安全国家标准食品中胆固醇的测定高效液相色谱法
[2] DB34/T 1765-2012 动物油脂中胆固醇含量的测定液相色谱串联质谱法
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北京仪器股份有限公司成立于2002年,是一家专业从事实验分析仪器的研发、生产和销售的科技型公司。 自成立之初便致力于为环境检测、食品安全、疾病控制、半导体检测、生命科学、能源化工、核环保、公安司法、地质与地矿、材料研究等众多行业客户提供实用可靠的实验室分析仪器、智能自动化前处理设备、实验室工程和耗材在内的实验室整体解决方案,是全球范围内能将多种类、多功能的样品前处理技术与全自动实验分析检测平台组合成全自动实验分析仪器系统的主要实验分析仪器供应商之一。 拥有LabTech、CDS、Empore等品牌,在中国和美国设有研发和生产基地,并在中国内地主要城市、中国香港、美国马萨诸塞州和宾夕法尼亚州等地设有产品营销和服务中心。目前,公司产品已销往全球90多个国家,累计服务客户3万余家。 未来,将继续秉承自主创新的发展思路,以安全可靠的智能自动化实验室设备和解决方案服务于各行各业,让分析检测更准确、更快速、更智能! 如需了解的更多详情,请访问http://www.labtechgroup.com/。 2024-07-10 -
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