还在为RNA提取头疼的苦主们，看完这篇你就悟了！

提取出来的 RNA 通常配合反转录试剂盒和 PCR 仪进行反转录，从而获取更为稳定的 cDNA。一定要注意试剂盒中不同试剂的配比，反应体系的准确配置，以及 PCR 程序的准确设定，以确保反转录精准顺利进行。

以上实验每一环节的操作都需谨慎细致，以最大程度保证 RNA 的完整性与活性。在此，小 E 和大家分享下在离心、样品保存和 PCR 反转录过程中的关键技术点。

操作时务必关注离心温度与时间，确保在不影响RNA稳定性的前提下有效分离样本组分。离心温度应保持 4℃ 低温，使用无酶的 ep 管，以防 RNA 降解，同时避免过久离心导致RNA受损。

推荐使用小 E 家的 5425 R 高速冷冻离心机，该设备拥有优异的温度控制系统和精确的时间管理功能，能在最高转速下（15,060 rpm）稳定维持 4℃，有效保护 RNA 不受温度影响。离心结束后会自动开启计时功能，帮助掌握样品处理时间，更好避免样品损失。

RNA 会与 ep 管的管壁产生黏附，这会降低离心效果及结果准确性。建议使用无核酸酶的低吸附材质离心管，如小 E 家的  LoBind 低 DNA 吸附离心管，可以减少提取和储存过程中 RNA 的损失，且无酶、无 RNA、无其他析出物干扰后续实验。

此外，储存环境的温度波动也会引起 RNA  的降解。使用带管理权限的超低温冰箱，如 Eppendorf F740hi，电子门锁仅允许特定授权人员打开冰箱，可以防止随意频繁开关门造成的温度波动。复温速度快也可减少温度波动对样品的不良影响。

尤其要关注变性、退火和延伸阶段的温控精准性，这对反转录反应的成功至关重要。Mastercycler X40 梯度 PCR  仪的模块温控精准度高达 ±0.15℃，可确保在设定的温度下精准、高效转录，同时有效避免非特异性产物。在反转录时还要防止样品蒸发，SafeLid 热盖可以根据不同规格耗材施加理想的压力，避免样品蒸发的产生，提高后续实验操作的有效性。