HPLC法分析抑肽酶

抑肽酶（Apotinin）是一种广谱蛋白酶YZ剂，分子量为6511，由16种氨基酸的58个残基组成的碱性多肽。在临床上多用于通过注射给药以减少复杂手术（例如心脏手术和肝脏手术）中的出血。

在2015版《ZG药典》二部中，使用了分子排阻色谱法对注射用抑肽酶中高分子蛋白进行检测，采用3根串联凝胶色谱柱TSKgel G4000SWXL（7.8 mm×30cm, 8 μm），柱温35℃，流速1.0 mL/min，将高分子蛋白和抑肽酶分离。要求二聚体相对抑肽酶的保留时间为0.9；其分离度大于1.0；抑酞酶主峰的拖尾因子不大于2.5。

分析条件

色谱柱：TSKgel G4000SWXL（7.8 mm I.D.×30 cm×3，8 μm）

流动相：3 mol/L 醋酸溶液

流速：1.0 mL/min

柱温：35 ℃

检测器参数：UV @280 nm

进样体积：100 μL

分析结果

抑肽酶供试品分离谱图

结果讨论

保留时间小于抑肽酶主峰的均为高分子蛋白峰，在上述分离条件下二聚体与抑肽酶间的分离度为1.4，抑肽酶主峰的拖尾因子为0.91，均满足药典要求。