1、 用途:
免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素,DON),从而对脱氧雪腐镰刀菌烯醇样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的检测。
亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。
2、 概述:
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol)又称呕吐毒素(Vomitoxin)属于霉菌的单端孢菌素族,由某些镰刀霉真菌属产生。呕吐毒素多分布于小麦、大麦、玉米等谷物籽实中,含量通常是mg/kg级的,由于他们高的细胞毒素及免疫YZ性质,对人类及动物构成了健康威胁。
3、 原理:
测定的基础是抗原抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过提取、过滤后,缓慢的通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和层析柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱脱氧雪腐镰刀菌烯醇,然后注入到分析仪器中用于检测。
4、 包装组成:
每一个盒中包括25支/15支脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和层析柱及1份说明书。
5、 需要的材料但盒中不提供:
5.1设备
----HPLC
----泵流操作架
----空气泵
----天平
----100ml/10mL量筒
----50ml 漏斗
----定量滤纸
----微纤维滤纸
----玻璃针筒
----样品瓶
----100ml/1L容量瓶
----匀质器
----1ml移液器或移液管
5.2 试剂
----磷酸二氢钾
----氯化钾
----磷酸氢二钠
----氯化钠
----聚乙二醇8000
----甲醇
----蒸馏或去离子水
6、 注意事项:
----脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人体有害,应戴手套操作。
----不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
----2~8℃储存,不得冻存。
----使用前,免疫亲和层析柱需回至室温(22~25℃)。
7、 样品处理:
7.1 缓冲液的配制
7.2样品处理:
8、 操作程序:
----取出免疫亲和层析柱,将上方塞子取出斜剪断,再插回亲和柱上;
----将柱子与泵流操作架上的玻璃针筒连接固定,处理后的溶液上样;
----去掉亲和柱下方堵头,调节开关,使液体以1d/s的速度流出;
----待液体排干后,更换新玻璃针筒,用10mLPBS溶液洗涤2次,流速2~3d/s;
----待液体排干后,更换新玻璃针筒,上样4mL甲醇,用样品瓶接洗脱液,流速1d/s;
----洗脱后液体可用于检测。
* 每次上样前都要将上次液体完全排干。
* 也适用于GB 23503-2009。
9、 结果判读:
脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量=检测浓度×16
10、 贮藏条件及保存期
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。
保存期:该产品有效期为12个月。
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仪企号
北京华安麦科生物技术有限公司
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