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冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒产品说明书(中文版)
发布:上海一基实业有限公司浏览次数:964YIJI冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
YIJI冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氯荧光乙
酰乙酸盐,在组织氧化损伤条件下,产生荧光,来定量检测冰冻组织内活性氧族的存在状况的权威而经典
的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适宜于冰冻动物组织的分析。可以被用
于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,定性检测,
性能稳定。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxideradical;O2-)、过氧化氢(hydrogenperoxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基
(hydroxylradical;OH-)、过氧化基(peroxylradical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷
氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitriteanion;ONOO-)
次氯酸(hypochlorousacid;HClO)、半醌自由基(semiquinoneradical)、单线态氧气(singletoxygen)等
细胞内活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡。2',7'-二氯荧光
乙酰乙酸盐(2',7'-dichlorofluoresceindiacetate,DCFH-DA)一种完全自由通过细胞膜的染色剂。一旦被过
氧化氢、过氧化基、过氧亚硝基阴离子等氧化,便产生荧光。据此测定组织细胞内活性氧族的浓度。
产品内容
YIJI清理液(ReagentA)
YIJI染色液(ReagentB)
YIJI稀释液(ReagentC)
产品说明书
毫升
微升
毫升
1份
保存方式
保存YIJI染色液(ReagentB)在-20℃冰箱里,严格避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保
证12月
用户自备
1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器
培养箱:用于染色孵育
荧光显微镜:用于观察荧光组织
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的YIJI染色液(ReagentB)置入冰槽里融化,YIJI稀释液
(ReagentC)置于室温预热。然后移出
微升YIJI染色液(ReagentB)到新的1.5毫升离心管,
1
加入
微升YIJI稀释液(ReagentC),混匀后,标记为YIJI染色工作液,置入暗室里。然后进
行下列操作。
1.准备5片待测的厚为10微米的未经固着处理的冰冻切片
2.置于室温下,小心加上
4.小心加上
微升预冷的YIJI清理液(ReagentA),铺满整个切片表面
3.小心移去切片上的YIJI清理液(ReagentA)
微升室温预热的YIJI染色工作液,铺满整个切片表面
5.在37℃湿润培养箱里,孵育20分钟(注意:避免液体蒸发)
6.小心移去切片上的YIJI染色工作液,避免光照
7.小心加上
微升YIJI清理液(ReagentA),铺满整个切片表面
8.小心移去切片上的YIJI清理液(ReagentA)
9.放上盖玻片或封片
10.即刻在荧光显微镜下观察(定性检测):激发波长490nm,散发波长530nm――荧光增强,表明活性氧
族(ROS)含量高
注意事项
1.本产品为50次操作
2.所有操作均须无菌状态下进行
3.建议使用新鲜组织(手术切除后1小时内)制成的冰冻切片
4.操作时,须戴手套
5.YIJI染色工作液避免光照
6.孵育时,须避免光照
7.建议组织染色完成后,即刻进行荧光定性分析
8.本公司提供阳性对照甲萘醌溶液,观察组织荧光增强现象
9.本公司提供系列活性氧检测试剂产品
质量标准
1.本产品经鉴定性能稳定
2.本产品经鉴定荧光清晰
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2014-08-14 -
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