-
解决方案
-
用STS-UV微型光谱仪检测DNA的吸光度
发布:海洋光学浏览次数:1563我们通常用紫外吸收光谱来检测生物分子,获得其有关浓度和样品纯度的重要信息。 STS-UV微型光谱仪的波长范围在190-650 nm之间,光学分辨率约为1.5 nm,是此类检测的理想之选。 STS-UV微型光谱仪的体积小巧、功能强大、性能出色,在宽泛的样品浓度范围内能提供优质的紫外吸收数据。 在此应用说明中,我们通过测定浓度在0.15至150 μg/ml之间的DNA样品的吸光度,证实该光谱仪的jue佳性能。
前言
DNA检测通常需要测试浓度极高或极低的样品,对于高浓度DNA溶液可进行稀释,而低浓度样品的检测难度更大。 没有可调节光程的光谱仪或小容量采样器更具比尔-伯朗定律,可将比色皿的光程调节为适合大小,从而符合测定多种浓度。 STS-UV的动态范围大,信噪比高,能检测浓度范围较大的DNA样品,而无需改变光程来适应0.005至1.5吸光度单位(AU)范围内的吸光度水平。
实验详细资料
用去离子水制备不同浓度的鲑鱼 DNA(Sigma D-1626)。 使用1 cm光程比色皿和DH-2000-BAL平衡型氘-卤钨组合式光源中的氘灯检测DNA的吸光度。
实验结果资料
图1.用STS-UV测量低浓度(0.15-2.5 μg/ml)DNA溶液的吸光度。
图2.OD260处对应DNA浓度(0.15至2.5 μg/ml DNA水溶液)
图1和2中显示了用STS-UV检测低浓度DNA(0.15-2.5 μg/ml DNA)的吸收光谱和在260 nm(OD260)下的吸光度值。 对这些浓度进行的重复测量显示差异率不到0.0004AU(误差条在数据标记内)。 用Z小二乘法把观测数据拟合成直线,相关系数为0.9999,证实了低浓度数据的线性。 如图1所示,即使当吸光度数值低至0.005 AU时,STS-UV也能提供重复性高的优质DNA吸收数据。
图3.OD260与DNA浓度(0.15至110 μg/ml DNA水溶液)
图3进一步证实用STS-UV检测0.15-110 μg/mlDNA具有较好的线性和较宽的动态范围。 R2(线性拟合度)值为0.9996,说明了在这一宽泛的浓度和吸光度范围内数据具有线性关系。 当浓度为110 μg/ml时,吸光度曲线略微平坦化或衰减说明在100至110 μg/ml之间吸光度具有线性,约为1.6 AU。
图4.OD260与DNA浓度(0.15至150 μg/ml DNA水溶液)
图4显示了用STS-UV检测的ZD吸光度。 检测出吸光度数值高达2.1 AU。 正如红色的数据所示,在100和110 μg/ml之间DNA的OD260表现出较高的线性,约为1.6 AU。 当浓度超过100 μg/ml,光谱图平坦化或衰减说明了这些测量结果接近杂散光限值。
结论
STS-UV的动态范围为4600:1,信噪比超过1500:1,它将出色的性能融入体积小巧、功能强大的微型光谱仪中。 STS-UV是DNA、RNA和蛋白质检测的理想之选,覆盖了190至650 nm的整个范围,光学分辨率约为1.5 nm。 正如浓度在0.15至150 μg/ml之间的DNA样品所示,STS-UV能对宽泛的吸光度范围(0.005至2.1 AU)进行检测。 STS-UV能在宽泛的浓度和吸光度范围能进行检测,无需配备可调节的采样配件,从而简化了紫外吸收光谱的检测过程。
2021-05-28相关仪器 -
免责声明
①本网刊载上述内容,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任
②若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi