奶粉中双酚 A 的 HPLC 测定

【概述】

本次实验选取了婴幼儿二段奶粉和高钙低脂高蛋白学生营养奶粉为实验材料，这两种奶粉均为配方食品，组成成分多，尤其是蛋白含量高，易造成基质干扰。逗点生物以HLB柱为净化材料开发出适合该类基质样品中双酚A的检测方法，该法操作简便，样品净化干净，干扰少，且回收率高。以0.500 mg/kg、2.00 mg/kg和5.00 mg/kg低中高三个浓度进行加标实验，回收率均在90%以上，RSD 均小于5 %。

【实验/设备条件】

仪器：UltiMate 3000（Thermofisher Scientific），配 DAD 检测器 

色谱柱：Copure® C18 (4.6 mm×250 mm，5 µm) 

流动相：甲醇 / 水 =75/25（V/V） 流速：1 mL/min 柱温：30℃ 进样量：10 µL 检测波长：224 nm

【样品提取】

确称取奶粉样品 2.0 g( 精确至 0.01g)

【实验/操作方法】

一、样品提取 

准确称取奶粉样品 2.0 g( 精确至 0.01g) 于 50 mL 玻璃试 管中，加入 10 mL 乙腈（HPLC 级），涡旋 3 min，50℃超 声提取 15 min，12000 r/min 离心 5 min，取上清液于一 干净的玻璃试管中，残留部分按上述操作重复提取一遍， 合并乙腈相，混匀后取 10 mL 于 50℃氮吹近干，以 10% 甲醇 - 水溶液（V/V）复溶，待净化。

 二、样品净化 

净化小柱：HLB，200mg，6 mL（玻璃柱）。 先以 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化固相萃取小柱，上待净化液， 待样液流出后以 6 mL 10% 甲醇 - 水溶液（V/V）分两次淋 洗小柱，待淋洗液全部流出后抽干小柱，用 5 mL 10% 乙酸 乙酯 - 甲醇溶液（V/V）洗脱，收集全部洗脱液，50℃氮吹 近干，以 1 mL 75% 甲醇 - 水溶液（V/V）复溶，离心取上 清液，待上机。

【实验结果/结论】

【仪器/耗材清单】