普瑞液相色谱分析仪分析水产品中呋喃唑酮残留量的测定液相色谱法

LC-901型液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC）及液-固色谱(LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。

原理

  样品中呋喃唑酮用二氯甲烷提取，蒸发浓缩提取液，无水硫酸钠去除水分，用正己烷液-液萃取除去脂肪及其他杂质，离心，取下层清液经膜过滤器后用高效液相色谱仪分离，紫外检测器检测，外标法定量。

试剂和材料

乙腈：色谱纯。

二氯甲烷：色谱纯。

正己烷：分析纯，用乙腈饱和。

 85%磷酸：分析纯。

乙腈水溶液：乙腈+水（体积分数为80+20）。

无水硫酸钠：分析纯，经640℃灼烧4.0h后，贮于密闭容器中备用。

无水硫酸钠柱：200 mm×24 mm（id），内装50 mm~100 mm高的无水硫酸钠。

呋喃唑酮标准品：纯度≥99.5%。

呋喃唑酮标准贮备液：称取10.0 mg呋喃唑酌，用乙腈水溶液溶解并稀释定容至50 mL棕色容量瓶中，在冰箱中冷藏保存，保存期1个月。该液1 mL相当于200μg呋喃唑酮。

试验用水：符合GB/T 6682一级水标准。

仪器和设备

高效液相色谱仪（LC-901型，北京普瑞分析仪器有限公司）， 配有紫外检测器。

高速组织捣碎机。

旋转蒸发仪。

离心机。

振荡器。

蒸发烧瓶，具塞。

刻度离心管。

膜孔滤器：0.45μm。

色谱条件

色谱柱：C18柱， 250 mm×4.6mm（id），粒度5μm。

流动相：乙腈+水+磷酸（体积分数为40+60+0.1）。

流速： 0.8 mL/min。

检测波长：365 nm。

柱温：室温。

进样量：20 μL。

样品测定

试样制备

  取鱼、虾、蟹、鳖等水产品可食部分，切成不大于5 mm×5 mm×5 mm的小块后混匀，经高速组织搞碎机捣碎即可，充分混匀。

提取

  称取捣碎样品约10g （粘确至0.01 g），加25 mL二氯甲烷搅拌分散后浸泡15min， 在振荡器上振荡5 min，提取液经无水硫酸钠柱滤入蒸发烧瓶中，残渣分别用25 mL和15 mL二氯甲烷按上述方法各重复提取一次，再用15 mL二氯甲烷冲洗无水硫酸钠柱，并用洗耳球吹出柱中液体，滤液均滤入同一蒸发烧瓶中，滤液于旋转蒸发仪上在45℃左右水浴下减压蒸发去除溶剂，蒸发速度控制在每秒一滴。

净化

  用1.0mL流动相和1.0mL正己烷溶解残渣并充分洗涤蒸发烧瓶，将液体移入离心管中，在

4 000 r/min离心5min，用尖嘴吸管移去上层正己烷层，再向离心管中加入1.0mL正己烷。混匀2min，商心，用尖嘴吸管移去上层正己烷层，下层清液经0.45μm膜孔滤器过滤后进HPLC分析。

 测定

呋喃唑酮标准工作液配制

  临用前，取呋喃唑酮标准贮备液，用流动相稀释成浓度为0.01μg/mL~1.00μg/mL的标准工作液。

液相色谱测定

  根据样品液中呋喃唑酮残留量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样品液中呋哺唑酮响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样品液等体积参插进样进行测定。在上述色谱条件下，呋喃唑酮保留时间约为5.8 min。

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