层析填料寿命验证

将工业生产级的层析缩小，建立实验室级的层析模型所遵循的基本原则与生产放大类似，维持恒定的柱高和线性流速，保持上样的载量不变。缩小和需要关注的其他参数如下表：

工业级层析柱和实验室缩小模型层析柱柱效和对称性应满足装柱要求。层析图谱的峰型和数值应可比，产品收率和纯度相关数据应用统计学检验方法进行比较，分析相关数据差异性是否显著来评判模型是否适用。将缩小模型中的检测项与质量标准或工业级生产步骤中监测的中间品质量参数进行对比，缩小模型的标准应不低于生产步骤中中间品质量。

缩小模型与商业化生产规模的对比，采用t检验、等效检验或其他方法，验证缩小模型可以完全反应商业化生产规模的性能（P值＞0.05，说明两组数据在统计学上没有显著性差异）。

缩小模型经验证后，可用于填料寿命验证。此外缩小模型在生物制药的生命周期内还可应用于后期临床工艺开发、工艺表征、工艺验证，甚至上市后的商业化生产过程中都可能使用到缩小模型。

缩小模型的工艺步骤需与工业生产保持一致

新填料装填完成后，需检测柱效和对称性，柱效和对称性的标准与生产规模保持一致。每隔5个循环需检测一次柱效，以保证柱效满足要求，避免因柱效原因导致样品杂质超标。前面10个批次运行可每次取样检测产品中相关杂质，作为缩小模型的验证批次，以后每隔5个批次取样一次，检测样品中是否有超出标准范围，如有可继续实验2-3次，排除偶然因素影响，作为终止填料寿命验证的依据。如填料寿命次数超出预期，可以考虑填料的有效期和每年实际生产批次来确定填料的寿命。

在填料寿命验证过程中，需考虑层析填料使用次数对病毒去除能力的影响，在实验初期可以考虑装填2根层析柱，实验次数做到中期保留1根，如最终的填料做除病毒验证时未能通过，可启用备用的层析柱。

在空白运行过程中随着填料使用次数的增加，比较洗脱步骤和CIP步骤的紫外吸收值是否变大，可以参考允许残留蛋白浓度=生产最小批量*安全系数/（操作单元数*操作单元循环数*柱体积*洗脱柱体积数)。安全系数：0.001；来确认洗脱和CIP过程是否充分。填料寿命验证的过程可以参考下图：

根据各自产品质量标准或各步骤层析检测数据的积累，制定各层析步骤的可接受标准。

(1) 层析柱压力曲线

(2) 最大压力曲线

随着应用次数增加，层析柱压力逐渐升高，但压力范围仍然在可接受标准范围内。

(3) 洗脱体积

洗脱体积无明显变化，100次后洗脱体积降低可能与层析柱重新装填有关。

(4) 洗脱浓度

洗脱浓度变化与上样量、样品浓度和洗脱体积等变化相关。

(5) 收率

样品收率基本保持不变，随着应用次数的增加略有降低，在可接受范围内。

(6) 峰型图谱

层析的峰型保持一致，重复性良好。

(7) 产品质量数据