上海富衡 | 如何鉴定NK细胞

鉴定 NK 细胞的方法有多种，以下为您介绍一些常见的方法：

一、形态学鉴定

1. 光镜观察：通过光学显微镜观察细胞的形态、大小、细胞核的形态等特征。NK 细胞通常具有较大的胞浆和不规则的细胞核。

2. 电镜观察：电子显微镜下可更详细地观察细胞的超微结构，如细胞器的分布、细胞表面的突起等。

二、表面标志物鉴定

1. CD56 和 CD16 表达检测：NK 细胞表面表达 CD56 和 CD16 分子。可以使用流式细胞术，通过荧光标记的抗 CD56 和抗 CD16 抗体与细胞表面的相应抗原结合，然后在流式细胞仪上检测荧光信号，从而确定 CD56 和 CD16 阳性细胞的比例，以此来鉴定 NK 细胞。

2. 其他标志物：NK 细胞还表达一些其他的表面标志物，如 NKG2D、NKp30、NKp44 和 NKp46 等。也可以通过相应的抗体标记和流式细胞术来检测这些标志物的表达情况，辅助鉴定 NK 细胞。

三、功能鉴定

1. 细胞毒活性检测：NK 细胞具有天然的细胞毒活性，可以杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞等靶细胞。常用的检测方法有 ⁵¹Cr 释放法、乳酸脱氢酶（LDH）释放法、荧光染料释放法（如 Calcein-AM 释放法）等。

2. 细胞因子分泌检测：NK 细胞活化后可以分泌多种细胞因子，如 IFN-γ、TNF-α 等。可以通过酶联免疫吸附试验（ELISA）、流式细胞术胞内细胞因子染色等方法检测细胞培养上清或细胞内细胞因子的分泌情况，间接反映 NK 细胞的功能和活性。