上海富衡 | 细胞知多少，永生化人肥大细胞系LUVA

LUVA细胞具有异染色质颗粒，对类胰蛋白酶、组织蛋白酶G和羧肽酶A3有免疫反应。它们表达编码FcεRI、c-kit、糜酶、类胰蛋白酶、组氨酸脱羧酶、羧肽酶A3和半胱氨酸白三烯1型受体的转录本。流式细胞术证实FcεRI、c-kit和FcγRII表达均匀。FcεRI交联诱导β-己糖胺酶、前列腺素D（2）、血栓素A（2）和巨噬细胞炎性蛋白1β的释放。永生化与供体中已知的c-kit基因突变或细胞内c-kit的体细胞突变无关，也与c-kit自身磷酸化无关。LUVA细胞是一种永生化的人MC细胞系，在无干细胞因子的情况下可以维持，并显示出高水平的正常信号c-kit和FcεRI。这些细胞将被证明对功能性人类MC研究有价值。

细胞信息

细胞名称：永生化人肥大细胞系

货 号：FH1301

英文名称：LUVA

别 称：Laboratory of University of VirginiA

组织来源：血液

形态特性：多形型

生长特性：贴壁悬浮混合生长

传代方法：1:2传代

培养条件：SFM ( 500ml ) , L-glutamine ( 2MM final ) , 5ml Pen Strep ( 10 , 000 U / ml )

细胞特点

1、肥大细胞驱动的过敏反应。主要是抗原诱导肥大细胞表面FceRI受体分子的聚集，引发肥大细胞释放炎症介质的结果。肥大细胞均含有特定的胞质颗粒，其中贮存有炎症介质。

2、肥大细胞具有较长的生存期，在适当的刺激条件下，可以再次进入细胞周期并增殖

复苏细胞到货处理

• 观察

1、收到细胞后，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液等异常情况

• 处理

1、用75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部，将细胞放入37 度培养箱中静置 3-4 小时后再做处理。

2、显微镜观察细胞生长情况若完全贴壁，可以根据细胞密度来进行传代或者换液继续培养（传代建议1:2）。

3. 在显微镜下观察细胞，若没有完全贴壁，漂浮较多，进行以下操作：

1）将瓶中培养基转入离心管中进行离心（1000rpm，5min），离心完，弃掉上清。

2）沉淀消化2-3分钟后，加入完全培养基进行离心收集沉淀。

3）加入新鲜完全培养基5-8ml，吹匀细胞沉淀后转入新培养瓶内，放入培养箱中培养。

冻存细胞到货处理

1、收到细胞后，检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等 问题，请即时联系。

2、将细胞取出转移至液氮或－80 度冰箱保存，建议尽早复苏。

3、复苏管如有活性状态问题及时与我们联系，会有技术人员与您沟通指导后再复苏第 二管。

特别说明：未与我方联系擅自复苏第二管出现问题不予售后。

细胞复苏

1、 从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻， 直至冻存管中无结晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3、弃上清，沉淀用 5ml 完全培养基重悬，接种 T25 培养瓶，于 37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养；

4、第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。