人促血红细胞生成素 (Erythropoietin, EPO) 是zui早用于ZL贫血症的商业化糖蛋白之一。与其它生物ZL蛋白一样,聚集体监测是评价 EPO 的关键质量属性之一。在欧洲药典 (European Pharmacopoeia, EP) 10.0版 中,详细规定了使用体积排阻色谱 (Size Exclusion Chromatography, SEC) 结合峰面积归一化法分析 EPO 样品中的二聚体及其它大于主成分分子量的有关蛋白比例的方法。
相比之前的 EP 版本,10.0 版对 EPO 的体积排阻色谱方法所作的主要修订在于使用粒径较小且柱长较短的色谱柱。这样在保证分离度的前提下,大幅度缩短了分析所用的时间。Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱采用新一代填料修饰工艺,能够更有效yi制 SEC 分析中可能存在的非特异性相互作用。其填料粒径为 2.7 μm,工作压力适中,同时可提供更高的塔板数与分离度。
本研究使用 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱并结合 EP 方法流动相和色谱条件,对 EPO 样品进行体积排阻分析。结果完全满足欧洲药典 EP 10.0 版中有关系统适应性的要求,表明该方法适用于 EPO 的生产过程质量控制以及其它相关的研究工作。
HPLC方法的典型运行时间大约为20 min,并且有些方法还需要使用氯化溶剂利用UPC2技术,可在3 min
与其它现有的HILIC方法相比,CORTECSUPLC HILIC色谱柱能针对百草枯和敌草快提供更好的保留时
分析时间缩短约四倍,从而提高了常规样品分析的通量溶剂使用量与进样量降低约两倍可在HPLC仪器压力限值内(小于
CORTECS 2.7 m色谱柱由实心核颗粒以Zyou方式装填,设计用于GX高扩展性及高耐受性这其中也包括在
CORTECS C18 + 色谱柱利用低pH低离子强度的pH改性剂(比如甲酸),为碱性化合物分析提供优异的峰
在本次研究中,利用混合模式固相萃取(SPE)和表面带有少量正电荷的GX实心核颗粒色谱柱,在消除干扰的同时提高
作为高纯硅胶高品质的经典色谱柱代表,Symmetry®与SymmetryShieldTM色谱柱已经成
有相当多以前难分离的化合物如水溶性维生素丙烯酰胺糖类核苷磷酸盐等,用ACQUITY UPLC BEH Ami
本实验采用配有PDA和QDa质谱检测器的Alliance HPLC系统,利用CORTECS C18+, 2.