猪肉中 β- 受体激动剂检测的固相萃取方法（Copure® MCX）

一、样品提取 

称取均质猪肉试样 10.00 ｇ试样 ( 精确至 0.01 g)，加入 15 mL pH=5.2 的乙酸 - 乙酸铵缓冲溶液，1000 r/min 匀浆 1 min，再加入 β- 葡萄糖醛酸苷肽酶 / 芳香磺酸酯酶溶液 100µL，于 37℃ ±1℃振荡酶解过夜。取出冷却后，10℃ 9500 r/min 离心 10 min。取全部上清液。待净化。

二、SPE 柱净化（Copure® MCX，200 mg/6 mL）

活化：加入 6 mL 甲醇、6 mL 水、6 mL 0.1 mmol/L 高氯酸 (pH=4.0) 溶液活化。 

上样和洗脱：当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上 述待净化溶液，过柱，弃去滤液，用 2 mL 甲醇、2 mL 2% 甲醇水溶液淋洗，Z后用 7 mL 5% 氨化甲醇洗脱。 

重新溶解：洗脱液缓慢氮气流条件下吹至近干，用甲醇 -0.1% 甲酸水溶液溶解定容至 1.0 mL，涡旋混匀 1 min，用于 LC-MS/ MS 测定。 

三、仪器条件 

质谱仪：API 4000 色谱柱：Venusil ASB C18 (2.1 mm×150 mm, 5 µm) 流动相：A：0.1% 甲酸水溶液 B：甲醇 洗脱方式：梯度洗脱，见表 1 

表 1 流动相梯度洗脱程序