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gao效液相色谱法在临床实验室中对不同体液中生物标志物的分离和定量起了重要作用。HPLC与其他常规检测器(例如UV,荧光和电化学检测器)相比,更趋向于质量敏感检测。填充材料技术的进步,例如亚微米表面多孔二氧化硅颗粒已经被引入了超高压液相色谱中,在不遇到高背压的情况下提高了分离效率。
GX液相色谱仪的系统压力较高,色谱柱是产生系统压力的主要部件,高背压会影响很多方面比如反压太高超过流通池的耐受压力,会导致流通池的损坏。恒谱生液相色谱柱均一的粒径保证了流动相稳定的流动,并且确保色谱柱有着较低的柱压。
恒谱生分析保护柱也具有低背压,不漏液,死体积少等优点,能够减少液相色谱系统内的部分压力。
除此之外,其他先进技术的引用与结合,在不同程度上优化了液相色谱分析工作方法,例如GX的自动进样器,减少检测器的细胞体积以及数据收集和分析的改进等等。很多实验室每天需要生成数百个样本的多个参数的报告,这些方法都能节约工作时间与提升工作效率。
临床实验室通常处理数百种生物流体样本,例如血液,尿液和其他体液。需要有效的提取过程与快速分析相结合,才能快速处理如此繁重的工作,但又不影响分析的质量,患者的ZL方法与报告的准确性有很大关系,因此快又准的报告是重中之重。
本文简要讨论了临床实验室中一些常见的HPLC分析应用。
生物样品需要事先处理和加工,以消除来自其他成分的干扰,尤其是在血液等液体的情况下。采用溶剂萃取,超滤和固相萃取等方式可防止对检测产生干扰并且可防止色谱柱内部堵塞。预防色谱柱堵塞还可以借助一些液相分析耗材配件的帮助,比如在色谱柱前添加预柱(保护柱)起到过滤颗粒物,化学物,杂质等作用。这些污染物会污染色谱柱、堵塞色谱柱,恒谱生建议在色谱柱前安装分析保护柱可以起保护色谱柱、防止堵塞、延长色谱柱的寿命等作用。
除了安装保护柱,还可以安装在线过滤器来防止色谱柱堵塞,恒谱生在线过滤器由洁净的高品质不锈钢部件组成,这些过滤器旨在减少色谱柱入口筛板的污染和堵塞问题。
儿茶酚胺
儿茶酚胺是一种含有儿茶酚和胺基的神经类物质。儿茶酚胺充当神经递质和肾上腺激素。去甲肾上腺素,肾上腺素和多巴胺是可用于诊断是否患有帕金森氏病,高血压和肌营养不良。以前依靠使用电化学或荧光检测法检测尿液或血浆样品中的儿茶酚胺含量,而使用HPLC检测是一种便捷的新分析方法。
维他命
维他命在人体生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用。维他命在体内是微量的,在除去存在于体液(例如血液和脑脊髓液)中的干扰化合物后,HPLC提供了灵敏且可靠的维他命估算技术。虽然这样分析技术的成本十分高昂,但是由于具有超高灵敏度和快速处理繁重工作量的优势,一些大型临床实验室还是会采用这种技术。
糖尿病监测
糖尿病是以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损,或两者兼有引起。HPLC能准确定量地评估糖化血红蛋白被证明是有效控制血糖的监测技术。即使在收集样本两周后,也可以通过HPLC分析血红蛋白HbA1c在专用纸上收集并干燥的血斑。该方法为患者长期血糖控制提供了高灵敏度的检测。
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01 新冠肺炎急危重症情况
根据国家卫健委统计报道,截止3月9日,全国重症率仍达到26.93%,对于急危重症患者的快速jing准救治仍是当前刻不容缓的YL境况。
(数据来源:信息来自国家卫生健康委员会官方网站)
ZG疾病预防控制ZX新型冠状病毒肺炎应急响应机制流行病学组发表的新冠肺炎流行病学研究结果表明:
未报告合并症患者的粗病死率约为0.9%,有合并症患者的病死率则明显更高,心血管疾病患者为10.5%,糖尿病患者为7.3%,慢性呼吸道疾病患者为6.3%,高血压患者为6.0%,癌症患者为5.6%。
2月17日,美国心脏病学会(ACC)发布了一份临床公告指出,40%新冠确诊患者存在心血管或脑血管疾病,并建议:医护人员应注意,发生冠状病毒感染的情况下,急性心梗的典型症状和表现可能会被掩盖,导致漏诊。
同时,《新型冠状病毒肺炎相关静脉血栓栓塞症FZ建议(试行)》中指出:在一线临床医师的实践中,发现将近20%的新型冠状病毒肺炎患者会出现凝血功能异常,几乎所有的重型和危重型患者存在凝血功能紊乱。JAMA发表的研究结果中显示,在138例新型冠状肺炎住院患者的分析中显示发现死亡患者D-二聚体水平不断上升,7-9天突破正常值(500ng/l),D-二聚体的升高提示可能存在纤溶亢进。
因此,合并急性心梗、合并急性心衰、合并肺栓塞等新型冠状肺炎患者,更容易发展为重症患者,其导致的呼吸困难等临床表现易被肺炎和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)掩盖,且常与患者的基础心脏病、多器官衰竭混杂,临床救治困难,死亡风险更高,需要更加及时的诊治。
02 新冠肺炎急危重症实验室诊断建议
实验室检查
国家卫健委办公厅发布的第七版《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行)》的实验室检查中明确指出:部分危重者可见肌钙蛋白,严重者D-二聚体升高、外周淋巴细胞进行性减少。重型、危重型患者常有炎症因子升高。因此,在实验室检查时,应采取生物标志物联用的监测手段,来快速鉴别诊断并发症,为快速的选择jing准ZL方案提供诊断依据。
ZG医师协会心脏重症专业委员会发布的《新型冠状病毒肺炎合并心功能不全诊治专家建议》中明确生物标志物联用:
在常规实验室检查的基础上,应进行心肌损伤标志物和心功能生化标志物方面的检测,主要包括以下方面:
1、心肌酶学,如高敏肌钙蛋白I(hs-cTnI)、高敏肌钙蛋白T(TN T-HSST)、CK-MB和肌红蛋白;
2、B型利钠肽(BNP)和(或)N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP);
3、血乳酸含量;
4、D-二聚体、纤维蛋白降解产物(FDP)。
03 生物标志物检测方法学的重要性
在诊疗方案和建议中均提到了,肌钙蛋白、B型利钠肽(BNP)和(或)N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)和D-二聚体,这三项也是我们常说的胸痛三项的生物标志物,同时监测于鉴别诊断和排除急性心梗、急性心衰和肺栓塞这些急危重症疾病。生物标志物联用在临床中扮演着重要的角色,但是正确的方法学和安全的平台才是提供准确结果的有力保障。
高敏肌钙蛋白
hs-cTn较传统肌钙蛋白显著提高症状发生0-4h内的检测阳性率,帮助早期诊断。肌钙蛋白需要在6-8h方能达到较好的检测阳性率。
VIDAS® HSTNI采用的是0-2h算法,阴性预测值达到99.4%,更快速准确地排除和纳入急性心梗。在2000ng/ml的高浓度下仍然不受生物素干扰,远高于到FDA所要求的生物素干扰阈值1500ng/ml。
NT-proBNP与BNP
NT-proBNP较BNP在检验层面上更稳定,且不受到新活素、诺欣妥等药物的干扰。VIDAS® NT-proBNP用的是国际专家共识推荐的统一抗体,可以直接套用国际国内指南推荐的CUT-OFF值,更利于临床应用以及患者转诊。
D-Dimer方法学的选择
VIDAS® D-Dimer方法学是ESC2019年发布的肺栓塞指南中推荐的高敏感法(ELISA或ELISA衍生方法),可用于排除中低度的肺栓塞。VIDAS® D-Dimer Exclusion Ⅱ 灵敏度 > 99%(NPV*>99%),可以安全排除高达50%的疑似VTE患者,减少漏诊。
VIDAS® D-Dimer Exclusion Ⅱ得到了大量文献支持,其中包括7项前瞻性研究( > 8000 例患者),被广泛视作金标准,是唯yi经美国 FDA 批准的VTE排除检测方法。
在D-二聚体的诊断内容中,指南中提到:检测D-二聚体的分析方法众多,临床医生应该关注自己医院实验室所使用的D-二聚体的检测性能。ELISA或者ELISA衍生方法D-二聚体敏感度>95%,可用于排除低度或中度疑似患者。在急诊科室中,D-二聚体阴性结果可以在约30%的患者中排除肺栓塞,而无需做进一步的检查。
因此,VIDAS® 平台的新胸痛三项(HSTNI+NT-proBNP+D-Dimer)可以满足急诊要求的快、稳、准的要求,且可以解决三大胸痛问题:
1. 急性冠脉综合征的诊断
2. 急性肺栓塞的排除
3. 进行危险分层和预后判断 & 同时明确是否合并急性心衰
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