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肝炎病毒的分类

群319439000烂o 2018-11-13 14:39:09 267  浏览
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热门问答

肝炎病毒的分类
 
2018-11-13 14:39:09 267 0
肝炎病毒的发现历程
 
2018-12-04 18:49:06 362 0
会不会就这样爱上你 会不会得肝炎 这样的检查结果会不会是肝炎
这样的检查结果会不会是肝炎 >>>,骨性关节炎常识 骨性关节炎病根在肝肾 所患疾病:会不会得肝炎 所就诊医院科室:人民医院 体检ZX检查及化验:总胆汁酸18.8;高密度脂蛋白胆固醇0.93.其他指标都在正常范围内。ZL情况:diyi次做全面的身体检查,报告还没出... 这样的检查结果会不会是肝炎 >>>,骨性关节炎常识 骨性关节炎病根在肝肾 所患疾病:会不会得肝炎 所就诊医院科室:人民医院 体检ZX检查及化验:总胆汁酸18.8;高密度脂蛋白胆固醇0.93.其他指标都在正常范围内。ZL情况:diyi次做全面的身体检查,报告还没出来就出差了,到目前为止都还没有经过ZL。病史:有时候会觉得胸口疼,容易累,晚上睡觉磨牙非常严重,尿频。上个月做了体检后,>>>,梅毒传播途径 小心!这些性病会传给后代总胆汁酸18.8,高密度脂蛋白胆固醇0.93。想得到怎样的帮助:家里有成员是有慢性肝炎的。这样的结果会不会有得肝炎的可能 展开
2014-09-13 17:35:08 516 1
生物分类表(动物、植物、病毒、真菌、细菌)
有谁可以帮我制作一张生物分类表,要动物、植物、病毒、真菌、细菌五种的分类,而分类下也要有分类,如:动物——脊椎动物、无脊椎动物||鸟、两栖…原生动物、软体动物…Z好有分类理... 有谁可以帮我制作一张生物分类表,要动物、植物、病毒、真菌、细菌五种的分类,而分类下也要有分类,如:动物——脊椎动物、无脊椎动物 | | 鸟、两栖… 原生动物、软体动物… Z好有分类理由。 真诚感谢大侠们!!! 展开
2010-10-15 05:26:54 619 3
肝炎是什么病,能治好吗?
 
2014-04-17 07:46:08 316 4
病毒为什么没有纳入国际分类中,为什么不属于六界?
病毒没有细胞结构,组成生命体的Z基本结构单位就是细胞,而病毒没有细胞结构,所以不属于国际六界分类系统。... 病毒没有细胞结构,组成生命体的Z基本结构单位就是细胞,而病毒没有细胞结构,所以不属于国际六界分类系统。 展开
2011-09-04 00:03:36 471 1
肝炎病人该吃什么?日常怎么保养?
 
2014-04-29 20:16:12 234 1
肝炎,现在已经是肝癌了,会传染吗?
我女朋友的爷爷得了肝癌,晚期的,现在她要回家陪她爷爷。好像她爷爷是由发展肝炎到肝癌,请问会传染吗?我要做点什么。
2007-12-26 21:30:09 335 6
DNA病毒可以用提RNA病毒的试剂盒吗
 
2017-01-24 10:44:02 459 1
病毒性感冒的检查
 
2017-07-21 04:24:57 536 2
慢病毒的操作手册
 
2018-12-11 22:43:16 251 0
为什么没有真菌病毒,只分了植物病毒,动物病毒和细菌
 
2017-12-24 08:50:01 877 1
病毒保存液快速找到隐藏的新冠病毒

当疫情再一次伺机而动时,要想快速的控制病毒的传播,做核酸检测就成了必经之路,同时也备受各界关注。但影响核酸检测结果的因素是多种多样的,包括样本采集部位、采集方式、储运过程、核酸提取操作等等。其中,样本的稳定性是一个关键环节。如何能使病毒快速失活,又能保护病毒核酸不被降解,维持检测稳定性的病毒样本保存液就成了重中之重。

第yi步:打破外壳,消灭“战斗力”

和其他RNA病毒一样,新冠病毒的结果简单来说,是由蛋白质外壳包裹着单链核酸——RNA构成的。我们可以简单地将病毒的RNA视为发号施令的“大脑”,蛋白质则是执行命令的“四肢”。新冠病毒感染人体并发生繁殖活动,引发病症,这个过程都主要由病毒外部具有生物活性的蛋白结构完成。

灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒;它是一种强有力的蛋白质变性剂,能迅速溶解蛋白质,导致病毒结构破碎。当带有新冠病毒的临床样本与保存液混合,样本中的病毒受裂解液作用,蛋白质外壳被迅速破坏,并且这种破坏是不可复原的。这时候,病毒就失去了作恶的“爪牙”,不再拥有对人的感染能力,从而保障了样本运输、处理过程中接触者的安全。

第二步:抑zhi酶活,押送“身份证”

外壳裂解后,新冠病毒的RNA游离在保存液当中。作为单链大分子,RNA的稳定性不像双链的DNA那样岿然不动,在自然环境中随处存在的RNA酶便是使RNA水解断裂的罪魁祸首。因此,通常认为失去外壳保护的病毒RNA是脆弱、不稳定的,需要低温储存才能保证它的完整性。

第三步:配合提取,确认“真凶”

病毒RNA妥善地储存在病毒样本保存液中,在进行检测前,还需要zui后一个步骤:将保存液中的RNA捕捉、浓缩,作为zui终样本加入实时荧光PCR体系中,上机进行检测。

德晟生产的病毒保存液除了灭活型病毒保存液外,还有非灭活型病毒保存液。它是同时保留病毒的蛋白质外壳和病毒核酸DNA或者是RNA,这样病毒在体外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,当然操作失误时也有一定的感染性风险。采样后长时间保存需要保持严格低温。不管是哪种病毒保存液,我们在使用时都需要按照要求严格操作、存放或运输。


2021-08-12 11:13:08 447 0
组织培养可以将有病毒的植株培育成无病毒的吗
 
2015-05-28 01:39:21 230 1
拉萨病毒和汗塔病毒是什么样
拉萨病毒和汗塔病毒是什么样的,有何特征,为什么是极度危险病毒啊... 拉萨病毒和汗塔病毒是什么样的,有何特征,为什么是极度危险病毒啊 展开
2018-11-29 11:18:08 343 0
Copan病毒采样、运输和保存病毒的通用运输介质

CopanUTM®:用于收集、运输和保存病毒分子诊断测试的临床标本的通用运输介质

 

UTM®是一种FDA批准的收集和运输系统,适用于收集、运输、保存和长期冷冻保存含有病毒分子诊断检测的临床标本,包括COVID-19、衣原体、支原体或脲原体有机体。

运输介质装在一个塑料螺旋盖管中,在室温或冷藏温度下可维持生物活力48小时。


·室温,可靠

室温稳定的系统保持生物的生存能力长达48小时,不需要冷藏前收集

UTM®已经过测试和验证,完全符合CLSI M40-A2:微生物运输系统质量控制标准

*独特的培养基配方包括抗生素,以制细菌和真菌的生长,而不影响病毒,衣原体,支原体或脲原体

酚红pH指示剂提供了在整个存储和产品寿命中介质完整性的目视测量

 

方便的系统与多种配置

·可在单个运输管散装或作为患者收集包与棉签配对。取样棒轴上的模制断点,安全可靠地将取样棒断裂到运输管中

·裙边,平底管与独特的内部锥形形状,使样品容易离心,并允许管直立在实验室工作台。


2021-11-16 17:29:19 186 0
的分类
 
2018-11-20 03:48:14 239 0
常用病毒载体的表征

病毒可自然感染细胞,它可将基因送入细胞核,是高效率的基因传送系统。目前正在进行的2600多项基因治 疗临床试验中都离不开病毒载体,它发挥着将外源基因片段递送到人体细胞中的重要功能。


目前已有十几种病毒基因治 疗产品被批准用于治 疗癌症、传染病和单基因疾病基因药物的开发。常用于基因治 疗的病毒载体包括慢病毒(LV)、腺相关病毒(AAV)、腺病毒(AdV)和转录病毒(RV)等,根据整合及感染情况的不同,适用于不同的疗法和适应症。


目前对于病毒载体产品质量的监管指南和行业标准仍然比较缺乏,我国的法规及指导原则主要有:

《人基因治 疗研究和制剂质量控制技术指导原则》

2020版《中国药典》“人用基因治 疗制品总论”

《体内(外)基因治 疗产品药学研究与评价技术指导原则(试行)》

《溶瘤病毒产品药学研究与评价技术指导原则(征求意见稿)》


尽管有相关指导原则的建议,但病毒载体结构复杂,种类繁多且生产工艺还各不相同,因此对其的质控充满挑战,在病毒载体开发过程中,还需要进行全面表征,以期获得关键质量属性。


根据相关指导原则,病毒载体需要进行质量研究的项目包括以下几个方面:



将外源基因包装到病毒颗粒中是病毒载体生产的核心技术,通过测序能够准确鉴定转入基因组的正确性,常用测序技术主要有Sanger、NGS和三代测序,需要根据检测基因组的长度和样本数量选择不同的测序方法。丹纳赫生命科学拥有自动化高通量的NGS方案,贝克曼库尔特的自动化工作站结合Echo声波移液处理工作站以及IDT的NGS文库构建试剂盒,可以快速、准确地完成NGS的样本前处理,帮助进行序列鉴定。



丹纳赫生命科学NGS解决方案


病毒载体的衣壳蛋白除赋予病毒固有的形状外,还具有病毒特异的抗原性和辅助感染的作用,影响药物效能和效价强度,需要进行深入表征。


腺相关病毒AAV的衣壳主要由VP1、VP2和VP3三种病毒蛋白组成,已有文献证明HEK 293细胞和SF9昆虫细胞两种表达系统会导致AAV衣壳蛋白产生不同的翻译后修饰,这些翻译后修饰的差异可能对rAAV受体结合、转运、表达动力学、表达耐久性、载体免疫原性等产生影响。因此,强烈建议对组成AAV的蛋白质进行完整表征,包括序列和翻译后修饰,以确保AAV产品的质量和一致性。


丹纳赫生命科学旗下SCIEX拥有完整的AAV衣壳蛋白表征方案。高分辨质谱对两种不同表达体系的AAV衣壳蛋白分子量检测,可以发现其蛋白形式的差异性。自测的样品中发现SF9中VP1和VP2的磷酸化水平升高,HEK293中VP3的乙酰化更加完全。




SCIEX X500B对两种表达系统中

AAV衣壳蛋白的分子量进行检测


再将样品酶解后通过对肽图的分析,可以进一步确认翻译后修饰以及所发生的位点。SCIEX 高分辨质谱ZenoTOFTM 7600系统独有的EAD碎裂模式,可以对在CID碎裂中容易发生中性丢失的修饰进行位点确认,提高肽图序列覆盖度。



SCIEX 高分辨质谱ZenoTOF™ 7600
肽图分析实验流程



翻译后修饰分析结果


另外,采用毛细管电泳CE-SDS的方法可以方便、快速地对AAV三种结构蛋白进行纯度分析。SCIEX的毛细管电泳PA 800 Plus制药分析系统配置激光诱导荧光检测器,可以对低浓度的不同血清型AAV衣壳蛋白进行三种结构蛋白的分离检测。



CE-SDS-LIF分析不同血清型的AAV衣壳蛋白

(Dr. ZICHUAN ZHANG,  et al)



SCIEX PA 800 Plus制药分析系统


慢病毒的核心蛋白主要有核衣壳蛋白(p7) 、内膜蛋白 (p17) ,衣壳蛋白(p24) 、两种薄膜糖蛋白以及其他非结构蛋白组成,其中p24 是构成慢病毒衣壳的主要结构蛋白,是常用于进行病毒滴度检测的指标。SCIEX的毛细管电泳系统还可以对慢病毒的核心蛋白进行谱图分析,用以进行慢病毒蛋白的纯度评估。通过在慢病毒样本中添加p24标准品,进行p24蛋白的鉴定以及滴度检测。




SCIEX Biophase 8800对慢病毒的蛋白谱检测


在病毒载体的工艺生产中,为了确保病毒载体在临床转化研究和试验上的功效和安全性,对空衣壳病毒颗粒和完整病毒颗粒的比率进行快速和准确的分析是十分重要的。贝克曼库尔特的分析型超速离心机Optima AUC已广泛应用于病毒载体颗粒的空壳率检测和生产过程中的定量。它能精确表征样本中各个组分的异质性、聚集体、空壳颗粒、包装部分基因组的颗粒和包装完整基因组的实心颗粒,测定它们之间的相对含量,大大提高了分辨率。



不同血清型AAV的空壳率检测
Shelley A. Nass. et al.  Molecular Therapy: 

Methods & Clinical Development(2018).



腺病毒的空壳率检测
Steven A. Berkowitz et al.  

Analytical Biochemistry (2008).



贝克曼库尔特分析型超速离心机Optima AUC


基因组分析是制造过程中病毒载体样本的另一个重要质量属性,毛细管电泳仪亦是进行核酸分析的重要工具,SCIEX的毛细管电泳系统可进行病毒载体基因组完整性和宿主残留DNA的片段分布检测。




毛细管电泳病毒载体基因组检测结果
AAV(左),LV(右)


对于微生物、热源、不溶性微粒等工艺过程相关杂质,丹纳赫生命科学则拥有多功能酶标仪、不溶性微粒检测仪、洁净室空气颗粒计数仪等来满足日常质控检测的需要。



美谷分子仪器的SpectraMax i3x多功能酶标仪(左)
贝克曼库尔特的HIAC 9703+注射液不溶性微粒检测仪(中)

贝克曼库尔特的Metone 3400+洁净室空气颗粒计数仪(右)


面对复杂、多样、技术相对较新的病毒载体,丹纳赫生命科学凭借其先进的科技、稳定的产品和不断开发且日益成熟的应用方案,帮助用户进行创新基因治 疗产品的开发。 


2022-12-04 19:48:08 145 0
常用病毒载体的表征

病毒可自然感染细胞,它可将基因送入细胞核,是高效率的基因传送系统。目前正在进行的2600多项基因治 疗临床试验中都离不开病毒载体,它发挥着将外源基因片段递送到人体细胞中的重要功能。


目前已有十几种病毒基因治 疗产品被批准用于治 疗癌症、传染病和单基因疾病基因药物的开发。常用于基因治 疗的病毒载体包括慢病毒(LV)、腺相关病毒(AAV)、腺病毒(AdV)和转录病毒(RV)等,根据整合及感染情况的不同,适用于不同的疗法和适应症。


目前对于病毒载体产品质量的监管指南和行业标准仍然比较缺乏,我国的法规及指导原则主要有:

《人基因治 疗研究和制剂质量控制技术指导原则》

2020版《中国药典》“人用基因治 疗制品总论”

《体内(外)基因治 疗产品药学研究与评价技术指导原则(试行)》

《溶瘤病毒产品药学研究与评价技术指导原则(征求意见稿)》


尽管有相关指导原则的建议,但病毒载体结构复杂,种类繁多且生产工艺还各不相同,因此对其的质控充满挑战,在病毒载体开发过程中,还需要进行全面表征,以期获得关键质量属性。


根据相关指导原则,病毒载体需要进行质量研究的项目包括以下几个方面:



将外源基因包装到病毒颗粒中是病毒载体生产的核心技术,通过测序能够准确鉴定转入基因组的正确性,常用测序技术主要有Sanger、NGS和三代测序,需要根据检测基因组的长度和样本数量选择不同的测序方法。丹纳赫生命科学拥有自动化高通量的NGS方案,贝克曼库尔特的自动化工作站结合Echo声波移液处理工作站以及IDT的NGS文库构建试剂盒,可以快速、准确地完成NGS的样本前处理,帮助进行序列鉴定。



丹纳赫生命科学NGS解决方案


病毒载体的衣壳蛋白除赋予病毒固有的形状外,还具有病毒特异的抗原性和辅助感染的作用,影响药物效能和效价强度,需要进行深入表征。


腺相关病毒AAV的衣壳主要由VP1、VP2和VP3三种病毒蛋白组成,已有文献证明HEK 293细胞和SF9昆虫细胞两种表达系统会导致AAV衣壳蛋白产生不同的翻译后修饰,这些翻译后修饰的差异可能对rAAV受体结合、转运、表达动力学、表达耐久性、载体免疫原性等产生影响。因此,强烈建议对组成AAV的蛋白质进行完整表征,包括序列和翻译后修饰,以确保AAV产品的质量和一致性。


丹纳赫生命科学旗下SCIEX拥有完整的AAV衣壳蛋白表征方案。高分辨质谱对两种不同表达体系的AAV衣壳蛋白分子量检测,可以发现其蛋白形式的差异性。自测的样品中发现SF9中VP1和VP2的磷酸化水平升高,HEK293中VP3的乙酰化更加完全。

 


SCIEX X500B对两种表达系统中

AAV衣壳蛋白的分子量进行检测


再将样品酶解后通过对肽图的分析,可以进一步确认翻译后修饰以及所发生的位点。SCIEX 高分辨质谱ZenoTOFTM 7600系统独有的EAD碎裂模式,可以对在CID碎裂中容易发生中性丢失的修饰进行位点确认,提高肽图序列覆盖度。



SCIEX 高分辨质谱ZenoTOFTM 7600
肽图分析实验流程



翻译后修饰分析结果


另外,采用毛细管电泳CE-SDS的方法可以方便、快速地对AAV三种结构蛋白进行纯度分析。SCIEX的毛细管电泳PA 800 Plus制药分析系统配置激光诱导荧光检测器,可以对低浓度的不同血清型AAV衣壳蛋白进行三种结构蛋白的分离检测。



CE-SDS-LIF分析不同血清型的AAV衣壳蛋白

(Dr. ZICHUAN ZHANG,  et al)



SCIEX PA 800 Plus制药分析系统


慢病毒的核心蛋白主要有核衣壳蛋白(p7) 、内膜蛋白 (p17) ,衣壳蛋白(p24) 、两种薄膜糖蛋白以及其他非结构蛋白组成,其中p24 是构成慢病毒衣壳的主要结构蛋白,是常用于进行病毒滴度检测的指标。SCIEX的毛细管电泳系统还可以对慢病毒的核心蛋白进行谱图分析,用以进行慢病毒蛋白的纯度评估。通过在慢病毒样本中添加p24标准品,进行p24蛋白的鉴定以及滴度检测。



SCIEX Biophase 8800对慢病毒的蛋白谱检测


在病毒载体的工艺生产中,为了确保病毒载体在临床转化研究和试验上的功效和安全性,对空衣壳病毒颗粒和完整病毒颗粒的比率进行快速和准确的分析是十分重要的。贝克曼库尔特的分析型超速离心机Optima AUC已广泛应用于病毒载体颗粒的空壳率检测和生产过程中的定量。它能精确表征样本中各个组分的异质性、聚集体、空壳颗粒、包装部分基因组的颗粒和包装完整基因组的实心颗粒,测定它们之间的相对含量,大大提高了分辨率。


不同血清型AAV的空壳率检测
Shelley A. Nass. et al.  Molecular Therapy: 

Methods & Clinical Development(2018).


腺病毒的空壳率检测
Steven A. Berkowitz et al.  

Analytical Biochemistry (2008).



贝克曼库尔特分析型超速离心机Optima AUC


基因组分析是制造过程中病毒载体样本的另一个重要质量属性,毛细管电泳仪亦是进行核酸分析的重要工具,SCIEX的毛细管电泳系统可进行病毒载体基因组完整性和宿主残留DNA的片段分布检测。



毛细管电泳病毒载体基因组检测结果
AAV(左),LV(右)


对于微生物、热源、不溶性微粒等工艺过程相关杂质,丹纳赫生命科学则拥有多功能酶标仪、不溶性微粒检测仪、洁净室空气颗粒计数仪等来满足日常质控检测的需要。



美谷分子仪器的SpectraMax i3x多功能酶标仪(左)
贝克曼库尔特的HIAC 9703+注射液不溶性微粒检测仪(中)

贝克曼库尔特的Metone 3400+洁净室空气颗粒计数仪(右)


面对复杂、多样、技术相对较新的病毒载体,丹纳赫生命科学凭借其先进的科技、稳定的产品和不断开发且日益成熟的应用方案,帮助用户进行创新基因治 疗产品的开发。 


2022-12-01 20:27:31 161 0

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