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- 小小玲玲玲玲9 2017-10-15 04:11:57
- 原理简介 BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction),一价铜离子和独特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。 产品特点 1.步骤简单,45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。 2.灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,Z小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl 。 3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。 4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。 5. 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。 BCA蛋白质定量检测试剂 在蛋白质的表达纯化,结构和功能的研究工作中,蛋白质的定量随处可见。但是,什么是理想的蛋白质定量方法?如何准确、快速的对蛋白质进行定量,对于不同的样本,如何选取相应的蛋白质定量试剂和方案?如何避免实验中引入的其它物质对蛋白质定量的干扰,PIERCE为这一切提供了可以信赖的解决方案。 PIERCE的BCA(bicinchoninic acid)蛋白质检测试剂是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠且对不同种类蛋白质变异系数甚小而深受专业人士的青睐。其中MicroBCA产品可检测到0.5μg/ml的微量蛋白,是目前已知的Z灵敏的蛋白质检测试剂之一。 主要特点: · 准确灵敏:BCA试剂的蛋白质测定范围是20-2000μg/ml,采用加强方法可检测到 5μg/ml;MicroBCA试剂测定范围是0.5-20μg/ml。 · 快速:45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。 · 经济实用:除试管外,测定可在微孔板中进行,大大节约样品和试剂用量。 · 不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。 · 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考玛斯亮蓝。 基本原理: 碱性条件下,蛋白将Cu++还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。 BCA分子式: 原理图: 用PIERCE的BCA试剂盒所得的标准曲线: MicroBCA蛋白标准曲线 BCA蛋白标准曲线 BCA蛋白质检测流程: 图片点击: http://www.perbio.com.cn/PIERCE/Protein%20Chemistry/bca.htm
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