全部评论(1条)
-
- bbly916 2009-09-23 00:00:00
- 正离子模式,跟据离子优势选择. GX液相色谱的流动相通常是各种低沸点溶剂和水溶液。它是影响分离的一个非常重要因素。在实际工作中,流动相的选择和优化是确定色谱分析的主要工作。 一、 流动相溶剂的选择 1. 所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。 2. 溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。 3. 在制备分离中, 溶剂应当易于除去, 不干扰对分离组分的回收。 4. 溶剂的粘度要小,保证合适的柱压降。 5. 从实用角度考虑,溶剂应当价格低廉,容易购得,使用安全,纯度要高。 二、流动相溶剂使用的注意事项 1. 流动相溶剂应选择HPLC的溶剂或依此为标准的溶剂。流动相使用前用0.45μm滤膜过滤、脱气,清除微粒和灰尘。 在送液泵内,为了防止杂物(固体)进入流路,装有吸滤器,但网孔径为10μm,比此更小的颗粒仍然可通过,这会导致流路和柱子堵塞和污染。为此,建议常用0.45μm滤膜过滤。流动相溶剂须经脱气,如不脱气,在溶剂混合时,或压力温度变化时容易产生大量气泡,会导致泵误动作和输液不畅,检测器产生噪声信号等。 2. 流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。 3. 做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去离子水、针剂水、纯净水(炊用)并不合适、尤其是做梯度洗脱时,水中的不纯物会成为鬼峰,从而干扰分析结果。 4. 流动相的pH值过高或过低,流动相使用纯水,使用高浓度磷酸盐缓冲溶液,使用离子对试剂等,均可能造成色谱柱填料被化学破坏,这种对色谱柱固定相及键合相的破坏通常是不可修复的 5. 用缓冲盐做流动相时,在使用前和使用后都要用水清洗流路,禁止将缓冲溶液留在流路中静置过夜或更长时间。 6. 若需要使用含盐的流动相,使用前请务必过滤。并且使用该含盐流动相前,色谱柱需先用低比例有机相(有机相含量应不低于10%)的溶液冲洗,以免缓冲盐析出。流动相若为蒸馏水或含盐的缓冲液,建议现用现配,以免流动相因滋生微生物而造成柱填料的污染。 7. 进行梯度实验时要注意梯度变化过程中流动相的互溶性,避免因流动相不互溶而导致的缓冲盐析出问题。反相系统更换正相系统或正相系统更换反相系统时,用异丙醇置换系统内的储存流动相后在接柱子。 8. 在更换两种互不相溶的流动相时,中间要用异丙醇溶液清洗过渡。例如:先用甲醇水做流动相,然后在用正己烷做流动相时,一定要先用异丙醇溶液冲洗甲醇水,然后用正己烷冲洗异丙醇,反之也是一样。在更换流动相时还要考虑色谱柱是否更换。 9. 仪器在短期(两三天)不用时,流路中可以是甲醇或水。仪器在长期不用时,流路中应用甲醇。 10. 对于UV等检测器用于高灵敏度检测时,要使用UV吸收性小的HPLC的溶剂作为流动相溶剂,如甲醇、乙腈等。 11. 当流动相溶剂为乙腈时,流速为1ml/min泵的正常压力5~7Mpa之间,如果压力逐渐降低,基线也出现异常。这是由于乙氰的粘性大,导致泵的流速降低。可适当提高流速使泵的压力恢复正常即可。 12. 流动相含有浓硫酸、浓硝酸、二、二氯甲烷、氯仿、丙酮、四氯呋南、二甲化砜等溶剂,会对流路中的PEEK树脂管路强度变成差、PEEK树脂管容易破裂使溶剂外溅。流动相含有卤素离子的溶剂,如KCI、NaCI、NH4CI等。对流路中的不锈钢材料有腐蚀作用,以上的溶剂须尽量避免使用。非用不可时,分析完了后,应立刻用蒸馏水把全流路清洗干净。 13. 用于检定梯度等性能时,短时间使用在0.5%以下的低浓度丙酮水溶液是没有问题的。
-
赞(7)
回复(0)
热门问答
- 用液相色谱质谱仪检测葡萄糖是用正离子模式还是负离子模式?
- 这个选择有什么讲究?对流动相有什么要求?谢谢
2009-09-22 05:45:20
439
1
- 胆酸类在正离子模式还是在负离子模式下检测好
2017-10-26 12:15:47
466
2
- 质谱 正离子模式 负离子模式 流动相里面加什么?
- 质谱负离子模式是减氢峰,正离子模式是加氢峰吗? 正离子流动相加甲酸,负离子模式一般加什么?加甲酸可以吗?有什么影响
2017-05-21 09:47:31
1582
1
- 分析新手求助,从正离子模式换到负离子需要注意什么
2018-07-21 10:54:25
439
1
- 苯酚在质谱下适合测正离子模式,什么适合负离子
2017-08-26 17:05:56
404
1
- 电感有哪些故障模式?发生故障时,是开路模式还是短路模式?
Q. 电感有哪些故障模式?发生故障时,是开路模式还是短路模式? A. 可以考虑下列故障模式: (1) 超过规格范围的过电流,导致线圈断线,变成开路模式 (2) 超过规格范围的过电流,无法保持线圈之间的绝缘,导致电感值下降 (3) (2)之后,更大的过电流通过,达到(1)的开路模式
2020-12-10 15:40:10
399
0
- 高分辨率质谱仪可以进行mrm模式么
2016-06-19 14:21:14
409
1
- 触摸屏和PLC485通讯是用的什么模式(ASCII.RTU.还是TCP)
2015-09-03 17:39:27
342
3
- 全站仪咋用无棱镜模式测高度
2014-01-13 17:23:45
1289
3
- 电位滴定仪 酸度测量模式 是ph 测量模式么
2017-07-02 23:14:30
252
1
- 超声波传感器 开关点模式 窗口模式是指什么意思
- 主要是不了解窗口模式具体代表什么意思?
2015-06-08 14:47:28
430
1
- 什么是rtu模式
2014-03-18 13:09:03
465
1
- 液质联用中ESI离子源正离子模式背景离子183.0865总是存在,为什么
2017-05-14 04:24:50
409
1
- pdf模式文件用投影仪能放么
2012-03-11 14:51:29
418
2
- 怎样用电子负载测试恒流输出型LED驱动电源?是CV模式还是CC模式?
2018-01-31 12:31:47
820
1
- 激光模式
- 激光模式是什么? 不同激光模式的激光照射在固定相位差的半透半反镜上,得到不同的条纹吗?
2018-12-05 07:33:42
263
0
- 光纤模式
- 什么叫光纤的不同模式,是不是不同的入射角,在光纤中的传输路径不同,这两种路径就叫不同的模式
2010-07-06 05:55:28
242
1
- 伺服电机的INC模式和ABS模式
2013-02-15 18:18:25
707
2
- 网关模式与网桥模式的区别
- 高分,求好答案... 高分,求好答案 展开
2016-06-19 11:14:42
317
1
9月突出贡献榜
- 单位预算忏悔
- 饿啊地方
- 空中有牛
- 依然相信你会
- 本生(天津)健康科技有限公司
- 猫合宝
- 广东皓天检测仪器有限公司
- 武汉安德信检测设备有限公司
- 上海一科仪器有限公司
- 牛牛麻麻2
- 东莞市皓天试验设备有限公司
- futu888
推荐主页
最新话题
参与评论
登录后参与评论