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动植物DNA提取

我ME爱 2018-05-06 09:57:15 581  浏览
  • 有没有什么试剂盒或方法,能提取动植物混合物(动物和植物的组织在一起)的DNA?... 有没有什么试剂盒或方法,能提取动植物混合物(动物和植物的组织在一起)的DNA? 展开

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  • zky914 2018-05-07 00:00:00
    DNA提取的几种方法 (1).浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来. 也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白. 两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些. 以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离.在提取过程中为YZ组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA. (2).阴离子去污剂法: 用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA. (3).苯酚抽提法: 苯酚作为蛋白变性剂,同时YZ了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶.蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相.离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA .此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出.此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 . ( 4).水抽提法: 利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,Z后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

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  动植物组织的研磨是我们经常会在实验中会遇到的,而对其应用的组织研磨仪通常都会选择广州研磨者,只因其不但能够对硬、软、弹性等样品进行快速粉碎和均相处理,还符合物理化学分析实验室的研磨需求,还可配置不同规格的磨罐,对其生物样品进行干磨、湿磨和冷冻研磨,还可对其进行细胞粉碎和DNA/RNA的提取,得到广泛的应用。


  在对植物藻类组织的研磨中,由其内含有叶绿素、叶黄素和胡萝卜素等色素,而在所有浮游藻类中,叶绿素a是估计藻类生物量的一个很好指标。脱镁叶绿素a可干扰叶绿素a的测定,其可在同一光谱范围内吸收光和荧光,从而造成叶绿素a值检测的误差,而两者的比值能够很好地反映出浮游植物的生理状况。而动植物组织研磨仪在作为样品的研究分析工作中发挥了重要的作用,可以为实验的研究提供有效的帮助。
  
  应用动植物研磨仪对样品的制备所获取的标准溶液来标准,在标准溶液与蒸馏水相混合后摇动,可在平衡几分钟后再次进样。2次用标准溶液漂洗注射器,在吸入标准溶液作进样,使其浮游体与标准溶液作为空白液,可建立标准的色素浓度与荧光峰面积的标准曲线。从而可获得叶绿素与类胡萝卜素的分离,也可对其叶绿素的分解产物进行分离;另在对三倍进样的浮游植物群落和植物的提取物确定测定时,可使用适合的内标物来提高度。
  
  该研磨仪具有一对对称的摇臂,可高速大振幅的摇摆,样品在离心管内通过磨球和钢珠的不规则冲击和摩擦,可在数秒到数分钟内完成实现对样品的研磨、粉碎、混合和细胞破壁,实现对试样的细小研磨粉碎。
  
  对于动植物组织研磨仪的应用,在很多高校和实验室内都有应用,而其对样品的前处理也都成为了有利的助手,快速的完成了对样品的前处理研磨分析。

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