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- 狂想XXOO的岁月 2017-07-02 00:00:00
- 如何用培养的细胞做PCR 细胞培养物污染往往是细胞培养实验室Z常遇到的问题，有时会带来十分严重的后果.细胞培养污染物主要分为两类，一类是化学污染物，例如：培养基、血清和水中的杂质、内毒素、增塑剂和去污剂，另一类是生物污染物，例如：细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体以及其他细胞系的交叉污染.尽管无法彻底消除污染，但是可以通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术，降低污染发生的频率和严重程度. 细菌是一大类广泛存在的单细胞微生物.细菌直径一般为几个微米，外形多样，例如：球状、杆状和螺旋状.细菌由于分布广泛、生长迅速以及体积大小的特点，与酵母和霉菌一起构成了细胞培养中Z常遇到的生污染物.培养物被细菌污染后，几天内即可通过简单的肉眼观察发现；被感染的培养物通常呈云雾状 (即：浑浊状)，有时表面会覆盖一层薄膜.另外，经常还会发现培养基的 pH 值突然降低.在低倍显微镜下可见，细菌为细胞之间移动的微小颗粒，在高倍显微镜下观察可以分辨出各个细菌的形状. 酵母是真菌界的一种单细胞真核微生物，大小从数微米 (多见) 到 40 微米 (罕见) 不等.与细菌污染类似，培养物被酵母污染后也会变得浑浊，特别是进入污染后期时.培养物被酵母污染后 pH 值变化极小，污染严重时 pH 值才会升高.在显微镜下，酵母呈单个卵圆形或球形颗粒，有些会芽生出较小的颗粒.霉菌是真菌界的一种真核微生物，以被称为菌丝的多细胞丝状体形式生长.这些多细胞丝状体构成的交联网络含有遗传性相同的细胞核，被称为集落或者菌丝体.与酵母污染类似，霉菌污染初期培养物 pH 值会维持稳定，污染加重后 pH 值会迅速升高，导致培养物浑浊.在显微镜下，菌丝体通常呈细束状纤维，有时呈较为密集的孢子团块.许多种霉菌的孢子在休眠期均可耐受极端严峻、不利的环境，当其遇到合适的生长条件时才会被活化.
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