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- 汉共操耗侄障说 2017-04-10 00:00:00
- 大家帮忙看看DNA扩增后电泳为什么是这样子 缩短暴光时间本来就使带变暗，如果再进一步缩短暴光时间，可能其他的带也不清楚了。还是考虑电泳体系的问题： 1.首先考虑是你的电压可能有点高，降低电压后适当延长时间可以改善。 2.胶灌的如何，MARKER好象有点变形 3.加样问题 建议用本次的样品重新跑个看看，排除一下电泳体系的问题。 相关热词：电泳结果图 扩增产物 目的基因 RT-PCR 基因 云雾状 电泳图 .......... 相关文章 1.请帮分析RT-PCR电泳结果图(RT-PCR，电泳结果图，扩增产物，目的基因) 2.请大家帮忙看张PCR电泳结果图，谢谢！(电泳结果图|内参) 3.诱变引物是什么啊(引物，诱变，基因，反应体系) 4.扩增产物大小不对的问题(扩增产物，细胞株，条带) 5.三段PCR扩增产物酶切后直接连接，可行吗(酶切，扩增产物，载体) 6.荧光定量PCR的扩增产物长度为何不能太长(扩增产物，荧光定量) 7.求RealTime PCR 内参引物序列GAPDH或Actin(内参引物序列，扩增曲线，溶解曲线，引物序列) 8.RT-QPCR大家都用什么做标准曲线(标准曲线，扩增效率，标准品，反转录) 9.pcr-sscp法(pcr-sscp，凝胶，单链，玻璃) 10.【心得】Primer3中几个参数设置问题(参数设置，引物，互补性，设计引物)
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- DNA电泳常见问题分析
一、DNA带模糊
原因：
1.DNA降解；
2.电泳缓冲液陈旧；
3.所用电泳条件不合适；
4.DNA上样量过多；
5.DNA样含盐过高；
6.有蛋白污染；
7.DNA变性。
解决办法：
1.避免核酸酶污染；
2.电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液；
3.电泳时电压不应超过20V/cm，温度<30℃;巨大DNA链电泳，温度应<15℃;核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力；
4.减少凝胶中DNA上样量；
5.电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐；
6.电泳前酚抽提去除蛋白；
7.电泳前勿加热，用20mM NaCI缓冲液稀释DNA。
二、带弱或无DNA带
原因：
1.DNA的上样量不够；
2.DNA降解；
3.DNA走出凝胶；
4.对于EB染色的DNA，所用光源不合适。
解决办法：
1.增加DNA的上样量；聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高，上样量可适当降低；
2.避免DNA的核酸酶污染；
3.缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度；
4.应用短波长（254nm）的紫外光源。
三、DNA带缺失
原因：
1.小DNA带走出凝胶；
2.分子大小相近的DNA带不易分辨；
3.DNA 变性；
4.DNA链巨大，常规凝胶电泳不合适。
解决办法：
1.缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度；
2.增加电泳时间，核准正确的凝胶浓度；
3.电泳前请勿高温加热DNA链，以20mM NaCl Buffer稀释DNA；
4.在脉冲凝胶电泳上分析。
2020-09-02 16:49:09
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