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- 幻雪夜57 2011-04-15 00:00:00
- 碱基互补配对、半保留复制
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- 小啦啦gg 2017-12-16 12:06:54
- DNA的固相合成。 即DNA3'端固定于基质上,然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于应用DNA聚合酶的DNA合成。 合成过程 diyi个碱基的3‘末端固定在树脂上,下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护,碱基上的氨基用苯甲酸保护,然后对3‘-OH用氨基磷酸化合物进行活化。 1。1个碱基的5’-OH和下个碱基的3‘-OH形成亚磷酸三酯, 2。然后用碘氧化成磷酸三酯 3。加入二除去第二个碱基5’-OH上的保护剂DMT 循环进行加入下一个碱基 合成完毕后 1。用苯硫酚除去5’-OH上的保护剂DMT 2。用浓氢氧化铵将片段与固体树脂断开,洗脱 3。用浓氢氧化铵在加热的条件下除去碱基上的保护剂 4。除去氢氧化铵,真空抽干 5。液相色谱或者PAGE,回收片段Z长的。
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