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临床化学实验用水水质的干扰及解决方案,你一定要知道

默克化工技术(上海)有限公司 2019-06-14 13:29:10 543  浏览
  • 在临床实验室中,水是关键因素。水在临床环境中的重要性体现在两个方面:

    ● 需要遵守规范(例如:临床实验室标准协会®-CLSI®标准);

    ● 化学品本身对水质的敏感性要求。

    临床实验室的水质要求

    在讨论具体的临床化学应用之前,应该注意临床实验室的基本用水要求包括:

    ① 除颗粒,这些颗粒会堵塞针头或针管,并干扰光谱检测;

    ② 检查二氧化硅水平,以防止在针头中形成沉积物,这可以改变分配的体积;

    ③ 降低有机物的水平和聚合分子的水平,如腐殖酸和富里酸,它们具有高紫外吸光度和荧光特性。

    普通化学、电解质、脂质

    和蛋白质测定

    普通化学、电解质、脂质和蛋白质测定旨在测量离子(例如Ca2+、K+、Na+、Cl-)和生物有机分子(葡萄糖、氨基酸、脂质等)。


    这些测定中的干扰来源包括:

    ● 进水中的离子

    ● 释放离子和生物有机分子的细菌


    这些测定对水质的要求为:

    ● 低离子含量(高电阻率)

    ● 低细菌数


    酶免疫测定

    这为特别敏感的免疫化学领域提供了关于各种生物标志物和特定疾病指标(心脏病学、甲状腺调节)的关键信息。

    这些测定中的干扰来源包括:

    ① 释放酶的细菌,这些酶的行为类似于在扩增反应中所使用的酶(碱性磷酸酶、氨基酸氧化酶)或检测方法中所使用的酶(碱性磷酸酶);

    ② 离子,其中一些用作酶的辅助因子(如Mg、Zn),而其他是酶YZ剂(如Cd、Pb);

    ③ 高有机浓度,有机物可以干扰结合过程,YZ酶和干扰荧光检测。

    毒理学和ZL药物监测

    (TDM)测定

    可以使用两种主要分析方法来进行毒理学和TDM测定:免疫测定法和色谱法。对于免疫测定法,水质要求与先前描述的标准类似;

    对于液相色谱法和质谱联用技术,主要要求是有机物含量非常低(通常小于5 ppb TOC),有机物会影响实验,主要表现是缩短色谱柱寿命,造成背景干扰,产生鬼峰。

    总结

          水以多种方式影响临床测定,在临床实验室中,一个好的做法是将水视为试剂。对于临床实验室中进行的大多数测定,应将离子和细菌保持在尽可能低的水平。这完全符合CLSI®指引的建议(临床实验室试剂水 — CLRW,电阻率>10 MΩ·cm,细菌 < 10 CFU/mL)。同时将TOC降低至Z低水平。


          因此,应注意在实验室中进行各种测定所需的水质以及用水方式。正确的设计、选择和维护水纯化装置,可以减少临床测定中因水质和仪器停机造成的问题。默克设计了整套水纯化系统,以更大限度地减少临床测定中的水质影响以及设备维护保养需求。



    更多Milli-Q® IQ 7000 超纯水系统,请关注本展台,展台链接:www.yiqi.com/zt484





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热门问答

临床化学实验用水水质的干扰及解决方案,你一定要知道

在临床实验室中,水是关键因素。水在临床环境中的重要性体现在两个方面:

● 需要遵守规范(例如:临床实验室标准协会®-CLSI®标准);

● 化学品本身对水质的敏感性要求。

临床实验室的水质要求

在讨论具体的临床化学应用之前,应该注意临床实验室的基本用水要求包括:

① 除颗粒,这些颗粒会堵塞针头或针管,并干扰光谱检测;

② 检查二氧化硅水平,以防止在针头中形成沉积物,这可以改变分配的体积;

③ 降低有机物的水平和聚合分子的水平,如腐殖酸和富里酸,它们具有高紫外吸光度和荧光特性。

普通化学、电解质、脂质

和蛋白质测定

普通化学、电解质、脂质和蛋白质测定旨在测量离子(例如Ca2+、K+、Na+、Cl-)和生物有机分子(葡萄糖、氨基酸、脂质等)。


这些测定中的干扰来源包括:

● 进水中的离子

● 释放离子和生物有机分子的细菌


这些测定对水质的要求为:

● 低离子含量(高电阻率)

● 低细菌数


酶免疫测定

这为特别敏感的免疫化学领域提供了关于各种生物标志物和特定疾病指标(心脏病学、甲状腺调节)的关键信息。

这些测定中的干扰来源包括:

① 释放酶的细菌,这些酶的行为类似于在扩增反应中所使用的酶(碱性磷酸酶、氨基酸氧化酶)或检测方法中所使用的酶(碱性磷酸酶);

② 离子,其中一些用作酶的辅助因子(如Mg、Zn),而其他是酶YZ剂(如Cd、Pb);

③ 高有机浓度,有机物可以干扰结合过程,YZ酶和干扰荧光检测。

毒理学和ZL药物监测

(TDM)测定

可以使用两种主要分析方法来进行毒理学和TDM测定:免疫测定法和色谱法。对于免疫测定法,水质要求与先前描述的标准类似;

对于液相色谱法和质谱联用技术,主要要求是有机物含量非常低(通常小于5 ppb TOC),有机物会影响实验,主要表现是缩短色谱柱寿命,造成背景干扰,产生鬼峰。

总结

      水以多种方式影响临床测定,在临床实验室中,一个好的做法是将水视为试剂。对于临床实验室中进行的大多数测定,应将离子和细菌保持在尽可能低的水平。这完全符合CLSI®指引的建议(临床实验室试剂水 — CLRW,电阻率>10 MΩ·cm,细菌 < 10 CFU/mL)。同时将TOC降低至Z低水平。


      因此,应注意在实验室中进行各种测定所需的水质以及用水方式。正确的设计、选择和维护水纯化装置,可以减少临床测定中因水质和仪器停机造成的问题。默克设计了整套水纯化系统,以更大限度地减少临床测定中的水质影响以及设备维护保养需求。



更多Milli-Q® IQ 7000 超纯水系统,请关注本展台,展台链接:www.yiqi.com/zt484





2019-06-14 13:29:10 543 0
关于电压击穿试验仪,你一定要知道的

      电压击穿试验仪主要适用于固体绝缘材料如:塑料、薄膜、树脂、云母、陶瓷、玻璃、绝缘漆等介质在工频电压或直流电压下击穿强度和耐电压时间的测试。

  该仪器试验过程又可由单片机实现控制,试验结果显示在液晶屏上,同时也可通过通讯口把数据传给计算机由计算机控制试验过程及处理试验数据.由单片机控制有一个显著的好处,因不用计算机,使设备安装使用简洁,接上一根电源线即可试验。

  电压击穿试验仪的安全保护

  试验在试验箱中进行,试验箱门打开时电源加不到高压变压器输入端,即高压侧无电压。100KV测试设备高压电极距离试验箱壁的近距离大于370mm,50KV测试设备高压电极距离试验箱壁的近距离大于250mm,试验时即使人接触箱壁也不会有危险。

  设备要安装单独的保护地线。接保护地线,主要是减少试样击穿时对周围产生的较强的电磁干扰。也可避免控制计算机失控。

  该试验设备的电路设有多项保护措施,主要有:过流保护、失压保护、漏电保护、短路保护、直流试验放电报警等。

  直流试验放电报警功能:在设备做完直流试验时,当开启试验门时设备会自动报警,直至使用设备上的放电装置放电后报警会自动取消.(注:因为直流试验后不放电会危险到人身安全,不能直接拿取电极,起到提醒使用人员放电以免造成人身伤害)。

  试验放电装置,随主机为一体化,改进了以往单独配备一根放电杆的功能。

  六级高压安全断电控制:①总电源开关②高压断电开关(钥匙开关)③调压器复位开关④试验箱门安全开关⑤高压变压器输入侧限流空开⑥漏电保护开关。


2020-09-22 17:11:21 316 0
关于实验室移液器吸头,你一定要知道的

1.使用合适的吸头:

为确保更好的准确性和精度,建议移液量在吸头的35-100%量程范围内。

 

2.吸头的安装:

对于大多数品牌的移液器,特别是多道移液器,安装吸头并非易事:为追求良好的密封性,需要将移液套柄插入吸头后,左右转动或前后摇动用力上紧。也有人会用移液器反复撞击吸头来上紧,但这样操作会导致吸头变形而影响精度,严重的则会损坏移液器,所以应当避免出现这样的操作。RAININ(瑞宁)的多道移液器没有O型环,配合有前挡点的吸头,只需轻压一下即可达致理想密封,实在是多道移液器使用者的福音。

 

3.吸头浸入角度和深度:

吸头浸入角度控制在倾斜20度之内,保持竖直为佳;吸头浸入深度建议如下所示:

移液器规格         吸头浸入深度

2μL10 μL      1 mm

20μL100 μL    2-3 mm

200μL1000 μL   3-6 mm

5000 μL10 mL      6-10 mm

 

4.吸头润洗:

对常温样品,吸头润洗有助于提高准确性;但是对于高温或低温样品,吸头润洗反而降低操作准确性,请使用者特别注意。

 

5.吸液速度

移液操作应保持平顺、合适的吸液速度;过快的吸液速度容易造成样品进入套柄,带来活塞和密封圈的损伤以及样品的交叉污染。

 


专家建议

 

1、移液时保持正确的姿势;不要时刻紧握移液器,使用带指钩的移液器帮助缓解手部疲劳;有可能的话经常换手操作。

2、定期检查移液器的密封状况,一旦发现密封老化或出现漏液,须及时更换密封圈。

3、每年对移液器进行1-2次校正(视使用频率而定)。

4、绝大多数移液器,在使用前和使用一段时间后,要给活塞涂上一层润滑油以保持密封性;而对于RAININ常规量程的移液器,不涂润滑油也同样拥有理想的密封性。

原文地址:http://www.easylabplus.com/index-news-describe-html-976.html


2019-12-10 09:33:52 532 0
化学实验研究水质
我们化学要做这个调查 我选择了水质的调查 该调查些什么 做些什么实验? 要写800字的文章 能不能帮我找几篇来参考下 实在找不到就告诉我要做些什么实验 如何验证 或者水里含有什么成分什么的(取水方面就是从河涌里面取的水
2010-10-04 03:27:40 501 3
你还在用传代细胞做实验?这几点你要知道!

自1665年,英国科学家Robert Hooke发现细胞并命名为cell,到德国生物学家Matthias Jakob Schleiden和Theodor Schwann提出的细胞学说,人类对这个组成我们生命的相对独立单位——细胞,有了更加清晰的认识。

为了更好地了解生命的本质,揭示细胞基本的生命活动规律,科学家们围绕着细胞的增殖、运动、代谢、死亡等活动展开了一系列研究。其实早在19世纪,就有人提出将活体细胞从组织中分离出来的概念,但是直至1950年才开始进行动物细胞的培养研究。由最开始简单的观察到从组织中分离原代细胞再到获得可持续传代的无限细胞系,细胞从一个虚无缥缈的概念到现在作为体外研究实验时必不可少的实验材料,贯穿了整个生物学发展史。

研究常用的细胞主要分为两种:直接从组织上分离的原代细胞和购买的细胞系,通常将从组织上分离获得的第一代到第十代内的细胞统称为原代细胞,而大部分原代细胞会在此之后逐渐生长停滞并衰老死亡,极少量能继续存活至第五十代以后的细胞遗传信息发生了改变,成为无限细胞系或连续细胞系,一般的无限细胞系只具有永生性的特点,还有一些细胞的接触抑制消失,可以多层生长,甚至在异体接种后还有致瘤性。


因此无限细胞系由于其永生和快速分裂的特点一直是细胞水平研究时的首 选,由于方便培养、种类繁多、生长速度快且成本较低,可以快速开展研究,使得各种无限细胞系被广泛应用。例如Hela细胞作为第一株可无限传代的人类细胞系,帮助科学家们更加高效地专注人体细胞疾病和活性药物作用机制的研究,广泛应用于肿瘤学、免疫学、病毒学等学科领域。

近年来研究发现,虽然无限细胞系“浑身是宝”,但在应用上还是有一些限制。


限制1

细胞的生物学特性改变

在研究过程中由于需要大量的样本,无限细胞系需要快速繁殖并扩大培养,而其在连续传代培养过程中会发生一定突变,无限制地连续传代可能导致细胞系的基因型和表型都发生改变,从而影响实验结果。


同时,永生化的无限细胞系与活体组织内细胞的生物特性本身就有较大差别,并不能完全代表动物体内的真实环境水平,而原代细胞被认为更能代表体内组织的情况,在某些国家/地区已经得到了法律认可(Human Tissue Act2004,UK),尤其是在药物早期的毒性评估试验时,相较于无限细胞系,使用直接从患者组织分离的原代细胞是更加合适的实验模型。


限制2

细胞系交叉污染

细胞污染?大家第一反应都是病原微生物导致了细胞实验的失败,但是我们这里说的并不是说培养体系内细菌大量繁殖影响了实验,而是细胞系之间的交叉污染。顾名思义,就是你做实验用的细胞系内可能混进了其他种类的细胞!


这个问题可能是由于建立细胞系时导致的,也有可能是一些不当操作如同期多种细胞共养、耗材重复使用等,或者是由于一些细胞培养相关产品导致的,可能很不经意的一个操作便导致了整个实验的失败。2011年美国专门颁布了细胞STR鉴定国家标准,而目前仍有很多研究者们并未意识到这个问题的严重性,但是相关机构已经开始敲响了警钟:


2014年12月和2015年2月的Science杂志分别发表文章专题阐述细胞交叉污染和错误辨识的严重性,并强调污染带来的后果。不仅浪费了时间和精力,研究结论和结果不能复现,其带来的影响是十分严重的。因此NIH、ATCC等权威机构多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。在 2015年4月,Nature宣布旗下所有杂志将要求作者鉴定论文中所用细胞系,同年6月即有报道称一科学家因细胞系问题,撤销了Nature论文;2017年10月发表在PLoS ONE期刊上的一篇文章发现30000多篇论文使用了HeLa细胞交叉污染的错误细胞系导致研究结果无效[1] ,2019年的研究表明,至少有24%的人源细胞系被HeLa污染了[2]。


限制3

细胞应用

很多细胞在体内体外培养中无法增殖,比如在使用神经元,骨骼肌细胞,心肌细胞,周细胞以及终末分化的肝细胞等进行实验时,每次都需要再次从新鲜的组织中分离原代细胞。


然而原代细胞最能模拟体内的生理环境,能保持一定的组织生物学特性,因此用于评估药效和毒力最为合适,同时被其他细胞系交叉污染的概率大大降低,另外肿瘤学和免疫学相关研究在制备活体动物模型时也必须要进行原代细胞的分离,但是原代细胞的培养难度远高于普通细胞系,同时,原代细胞的分离制备也一直是一个亟需解决的难题。在保证可重复性的前提下,如何高效率制备高活性的单细胞悬液样本呢?


瑞沃德单细胞悬液制备仪轻松化解这一难题,自主研发的组织处理管、酶解试剂盒和内置不同组织优化处理程序,可将组织制备成高活性单细胞悬液或组织匀浆。

使用该仪器可快速完成活性高、均一性好的单细胞悬液制备,大大增加实验可重复性。拥有独立运行的四通道,搭配加热套可提高组织处理效率。广泛应用免疫学、肿瘤学、神经生物学等研究领域。


紧接着,在原代细胞分离后要对单细胞悬液进行细胞计数和活力分析,并将细胞置于培养体系或相应的缓冲体系中。


活细胞计数的精 准度少不了外部的加持,自动细胞计数仪的使用可以对原代细胞进行精 准计数,瑞沃德C100自动细胞计数仪可配合多荧光通道,对悬液中的细胞进行定量分析,并同时显示明场及荧光图像,清晰呈现计数结果及细胞形态。适用于免疫学及疫苗开发、细胞治 疗、肿瘤研究、干细胞及代谢研究等研究领域的细胞分析。

C100自动细胞计数仪

细胞培养是原代细胞分离流程最后一步,瑞沃德二氧化碳培养箱,可精 准控制温度、二氧化碳浓度,并且是维持高湿度环境的高性能细胞培养箱。HEPA高效过滤器可有效去除空气中的微粒污染,140℃高温干热灭菌功能可实现培养箱的定期灭菌维护,为原代细胞样品提供稳定洁净的培养环境。

二氧化碳培养箱

【参考文献】

1. Serge P. J. M. Horbach, Willem Halffman. The ghosts of HeLa:How cell line misidentification contaminates the scientific literature. PLoS ONE, Published:October 12, 2017, doi:10.1371/journal.pone.0186281

2. Lin J, Chen L,Jiang W, Zhang H, Shi Y, Cai W. Rapid detection of low-level HeLa cell contamination in cell culture using nested PCR. J Cell Mol Med.2019;23(1):227–236. doi:10.1111/jcmm.13923


2021-11-30 11:07:58 384 0
【请教】超声波测距干扰问题解决方案及反射波特性。
我买了一个超声波测距模块,可以发射8个方波。但是,如果我发出去的波一部分碰到障碍物被反射了,然后单片机检测到了。但是如果另外一部分波没有反射而是发射到更远的地方,之后再被反射,那么有可能会和后面发射的波一起回到接收器中,产生干扰。我要如何编程... 我买了一个超声波测距模块,可以发射8个方波。但是,如果我发出去的波一部分碰到障碍物被反射了,然后单片机检测到了。但是如果另外一部分波没有反射而是发射到更远的地方,之后再被反射,那么有可能会和后面发射的波一起回到接收器中,产生干扰。我要如何编程,才能避免这种干扰呢?还有请问反射回来的是平面波还是球面波,如果障碍物是个小球或其他不规则平面,那么反射波是否会产生散射,那这种情况下反射波的形式又是怎样的呢?反射波是否是一条直线反射回来呢?如果被测物体时运动的,那么那个发射波的探头发射的波是否是一种球面波,即可以在一定的角度均匀向外扩散吗? 展开
2016-12-01 17:48:51 552 1
吃这几种食物可以疏通血管,中老年人一定要知道
 
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如何确认编码器信号有干扰,解决方案
 
2017-08-13 01:09:48 373 1
有机物监测为发电用水的处理提供解决方案

简介 

       对于核电厂、燃气轮机发电厂、燃煤发电厂、地热发电厂、生物质燃烧发电厂来说,超纯水是发电系统的重要组成部分。发电用水通常来自于回收水、地表水、地下水等天然水源,用完后会被现场再利用或排放到环境中去。在提高整体发电效率、满足排放要求、为现场回收水创造更多用 途方面,水处理发挥着关键作用。好的监测工具不仅能够帮助操作人员控制水处理、保护昂贵设备、避免意外停机,还能用来优化水处理过程以节省开支、提高生产效率、防止污染物腐蚀锅炉和气轮机。 

       总有机碳(Total Organic Carbon,TOC)是造成腐蚀的罪魁祸首,TOC 监测法能够有效监控有机物污1。人们发现的有机污染物的种类越来越多, TOC 是所有有机化合物的总称,TOC 监测法在分别量化有机化合物方面提供了快速、简单的解决方法。测量有机物浓度的变化,能够帮助识别系 统工艺的违规之处。监测控制点有助于查找和排除污染源。 

       源水中的有机化合物经过处理,在锅炉中氧化成 腐蚀性酸。在水的回流侧,蒸汽冷凝后被循环使 用。但冷却过程(在打开或关闭时)可能会将冷却剂或污染物从外部环境泄漏到工艺蒸汽中。表 1 是可能的有机污染源的列表。

表 1. 可能的有机污染源的列表

       例如,人们很难用传统处理方法去除源水中的多糖,而电导率或 UV 254 传感器也很难检测到多糖。 在锅炉或气轮机中,多糖会在高温高压下分解成 具有腐蚀性的甲酸和乙酸,进而酸化蒸汽,造成 腐蚀,并在锅炉中留下沉积物。维护和修理锅炉 时,工厂不得不停机减产。为了防止锅炉受到损 坏,有些锅炉保险公司和监管机构要求工厂满足 很低的 TOC 限值,低至 200 ppb(VGB)或 100  ppb(EPRI)。多糖也同超滤(Ultrafiltration, UF)和反渗透(Reverse Osmosis,RO)污染有 关。只有准确监测和去除有机化合物,才能有效 地保护设备。

       总有机物包括离子形式和非离子形式的化合物, 以及芳香族和非芳香族化合物。在监测总有机物 浓度方面,TOC 监测法具有可靠、精确等优点。 图 1 显示了关键监测点,以查找泄漏或潜在污染 处。表 2 是 TOC 分析法举例。

图 1. 需要监测的关键区域

表 2. TOC 分析法举例

现场再利用,推动零液体排放(Zero  Liquid Discharge,ZLD)

       随着排放标准越来越严格,以及污水处理成本不 断提高,工厂不得不减少用水量和排水量。这就 增加了零液体排放(ZLD)系统监测和自动化的市 场需求。在系统前端冷却和循环利用蒸汽,可以 节约用水、提高工作效率。 TOC 分析法能够尽早 检测到乙二醇等冷却液是否泄漏到工艺水流中, 从而帮助操作人员采取措施以防止系统停机或永 久性的设备损坏。 TOC 分析法能够提供准确数据, 来帮助操作人员决定是否重新使用或者舍弃回收的水流。 

结论 

      TOC 分析法可以测量和控制发电用水中的化学物 质,极大降低有机物污染。通过有效监测和处理 进水,工厂可以将腐蚀性离子浓度降到很低的水 平。源水中的有机物含量和种类总是变化,因此 只有监测水源,才能有效达到监测目的、保护昂 贵设备不被损坏。还有一些有机物会污染膜和树 脂床。尽可能地减少有机污染物,有助于节约成 本、提GX率。新型的高温高压锅炉通常要求 TOC 限值低至 100 ppb,内部控制限值低至 10  ppb。补给水或回收水必须经过适当处理,才能达 到上述要求和满足更严格的排放标准。有机物监 测法能够检测到泄漏、微生物生长、处理失效、 有机物污染。减少此类问题能够帮助工厂降低生 产成本、提高发电效率。


2019-09-04 16:00:32 262 0
实验室常用化学仪器及使用方法,你用对了吗
 
2018-06-22 11:25:48 767 1
银染实验用水指南

 【本文为乐枫RephiLe公司原创文章,转载请注明,违者必究。】

摘要:上海乐枫市场部在本文中为用户提供了SDS-PAGE银染实验的基本步骤以及相关纯水应用方案。通过阐述水中杂质对银染实验带来的影响,详细解释了为什么银染实验应该中应该使用EDI纯水。

 

SDS聚丙烯酰胺凝胶染色是蛋白质研究的一个基础方法。染色方法有很多,实际应用中,考马斯亮蓝染色(考染)和银染是运用的Z多的方法。

考马斯亮蓝G250在游离状态下呈红色,它与蛋白质结合后变为蓝色,结合物在595 nm波长下有Z大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。

银染实验中,在碱性条件下,银离子被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上显色。蛋白电泳后的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶在甲醇溶液中浸泡后,水洗后用硝酸银溶液银染,再水洗后用碳酸钠甲醇水溶液显色。

与考染相比,银染具有灵敏度高的优点,很多做环境、植物、育种等方面的客户,都会做银染方面的实验。银染对于试剂的要求比较高,尤其对其中使用纯水的水质要求比较高。上海乐枫(RephiLe)技术人员根据自身经验以及相关文献中的方法为用户提出以下银染实验方案:

一、仪器和试剂

乙酸(1%),显影液(2.5%碳酸钠和0.02%甲醛水溶液),乙醇(30%),固定液(乙醇:冰醋酸:水(30:10:60)),硝酸银溶液(0.1%),显影液(将溶液A850 mL去离子水中加入37 g NaCl37 g CuSO4,再加入浓氨水直到深蓝色沉淀形成然后溶解,定容至1 L)和溶液B(在900 mL去离子水中加入436 g 硫代硫酸钠,定容至1 L)混合,加三倍水稀释,立即使用

二、试验方法

1. 通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质;

2. 将凝胶浸泡在至少5倍体积的固定液中,室温下平缓摇动4 - 12 h,使蛋白固定;

3. 弃去固定液,加至少5倍体积的30%乙醇,室温下平缓摇动30 min

4. 重复步骤3

5. 弃去乙醇,加10倍体积的纯水(去离子水),室温下平缓摇动10 min

6. 重复步骤5两次;

7. 弃去清洗用水,加5倍体积的硝酸银溶液,室温下平缓摇动30 min

8. 弃去硝酸银溶液,用纯水(去离子水)漂洗凝胶两面,每面20 s

9. 5倍体积的新鲜显影液,室温下平缓摇动,数分钟内出现蛋白质的染色条带,继续至条带清晰;

10. 1%乙酸清洗凝胶终止反应,再用纯水(去离子水)水漂洗数次,每次10 min

银染后的凝胶可以通过凝胶成像系统或扫描仪转化为照片,或者可以直接用手机拍摄。

在银染实验中,纯水(去离子水)水质非常重要,对实验成功与否起着关键性的作用。有用户在实验中忽略了这一点,纯水水质不佳,导致氯离子含量超标,浸泡时出现硝酸银沉淀,沉淀在胶上,Z后显影的时候看到的是一片花花的乱象,影响了染色效果。

氯化银的溶解度通常是2 ppm,氯离子是水中常见的一种离子杂质,如果水中的氯离子超过2 ppm,即有可能出现杂质,也就是说,对于银染实验,对于纯水质量的要求还是比较苛刻的,一般的反渗透纯水(RO)设备,还难以达到要求。

另外,水中的颗粒物也会吸附银离子沉淀显色,污染背景,甚至让好好的凝胶成了“大花脸”。因此制备出来的纯水在使用前,还应该通过0.220.45μm的过滤器预先过滤,以去除水中的颗粒物。

专业来讲,银染用水应该尽量选用符合国标《分析实验室用水规格和试验方法》(GB/T 6682-2008)(参考链接 http://rephile.com.cn/web/news-1686465.html)二级纯水以上的水——电导率至少应当在 1 μS/cm以下。因此,银染用水应当使用EDI纯水或者DI纯水,而RO 纯水是不能满足银染用水需求。

国内做实验室EDI纯水设备的厂家很少。乐枫是国内Z早生产EDI实验室纯水设备的供应商。乐枫新一代 Genie G 智能型一体化超纯水系统可以同时制备EDI 纯水和超纯水。Genie G 生产的 EDI 纯水水质完全满足银染实验,还可以用来配制其他相关实验的试剂;超纯水可以应用于银染实验的上下游以及其他蛋白质研究实验,例如蛋白SDS-PAGE电泳、Western Blotting等。取水终端安装的RephiBio滤器,可以制备无热原(内毒素)、核酸酶、细菌的超纯水,用于生化分析和分子生物学。Genie G一机两水,高度集成,可以充分满足高端生命科学实验室整体用水的需求,质量不输进口设备,用户使用起来,完全可以“用水无忧”。

     


关于上海乐枫生物科技有限公司

       上海乐枫(Rephile Bioscience,ltd.) 是一家专业从事高端水纯化和实验室分离纯化产品研发、设计和制造的高新技术企业,为高科技生物技术和生命科学领域的用户服务。乐枫公司着眼于发展,在ZG、美国、法国、印度、南非等近20个国家建立了销售机构,同时也为国际大型公司提供OEM和ODM,产品销往包括欧美的近100个国家。成立十余年,乐枫持续投入研发,创立出了自己的产品品牌RephiLe(瑞枫),推出了多个全新概念产品- 无线连接的Genie系列纯水系统和智能型大流量纯水工作站Super-Genie等,拥有了三十多项ZL和多个软件著作权。目前乐枫纯化柱填料配方齐全,也提供多款密理博纯水系统的兼容耗材。


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关键词:纯水, 银染, 蛋白质, 凝胶, SDS-PAGE,上海乐枫, RephiLe, Genie 纯水机, Super-Genie 纯水机

 

2019-12-12 11:43:41 401 0
RNA用反转录试剂盒进行反转录时,一定要知道RNA的含量吗?
请高手赐教!!!谢谢!!!
2011-08-29 00:53:13 252 3
化学实验的收获
如上... 如上 展开
2018-11-22 01:51:48 300 0
化学实验的目录
 
2018-11-15 05:34:46 299 0
政府对城乡居民用水采取什么营理模式,如水质水价及按装设施及收弗
 
2016-05-02 10:41:32 280 1
实验室信息管理软件及解决方案

专注于实验室信息管理系统(LIMS)的软件开发服务商——青软青之,十五年专注LIMS,自主研发的青之实验室管理信息系统(LIMS),可以多元化整合检测环节,实现检测的标准化,同时可以优化客户官理和实验数据的归档,提高检测信息的传输效率。青之实验室信息管理系统LIMS真正解决实验室管理的核心问题,为实验室工作人员提供智能化,专业化应用服务。提供以检测业务管理、检测过程管理为核心,实验室原始记录ELN,仪器设备数据采集,移动LIMS,检测质量管理等为基础的智能化实验室信息管理系统LIMS,青之lims提供的实验室整体解决方案,简易便捷,功能灵活,易部署,可提高产能、确保合规性、简化流程并有效提高实验室工作效率及管理水平。目前已广泛应用于综合质检、食品药品、检验检疫、计量校准、环境及水质、纤检、电子电器,等20种细分行业。


2021-06-11 16:38:50 196 0
药品及试剂安全解决方案


方案内容阐述:

海信药品解决方案能够实现药品在生产、运输、存储过程中的安全,提供海信专用冷链监控,对药品温度、湿度、位置的全过程追踪。

核心产品: 

医用冷藏冰箱精控系列HC-5L260、HC-5L360、、HC-5L400、HC-5L760、HC-5L1000、HC-5L1000BP

医用冷藏冰箱控湿系列HC-5L221L、HC-5L321L

温湿度监控仪、短信报警平台、冷链监控平台

方案优势:

1.药品全过程无死角温度、湿度、位置追踪

2.温度超限设备声光报警、APP报警推送

3.过程中出现异常报警,问题追踪



2020-10-27 09:57:51 233 0
化学有机合成实验
减压蒸流实验装置是怎么的,要注意哪些问题,我用油泵做,有什么东西可以代替冷阱。希望详细解答。
2012-07-15 16:19:36 275 2

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