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过离子交换柱时,pH梯度洗脱缓冲液一般用什么缓冲液

ainiys4 2017-02-20 03:09:03 335  浏览
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全部评论(1条)

  • 0086小鱼 2017-02-21 00:00:00
    如果不限定纯化方法,可以考虑亲和层析或离子交换,但根据你问题的意思,是选定离子交换。 此时就要考虑你蛋白的等电点了,如果等电点在你稳定pH之上,就用阳离子交换柱: 设计阳离子交换层析:将你的样品置换到你所指的稳定pH的running buffer。同时装柱,平衡,然后上样,平衡,洗脱(因为你的pH不稳定,建议盐洗脱),收峰。得你的蛋白; 如果你的等电点在稳定pH之下,就用阴离子交换柱,其步骤如上,只是改变柱子类型。

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