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求助双光子共聚焦显微观察时切片制作和染色问题

平泉女士 2015-02-16 21:07:24 501  浏览
  • 求助各位友,观察有机污染物在蕨类植物中的分布,切片的制作用什么方法Z好呢,徒手切片每次都切得质量不好,有什么技巧可以参考么?染色的话一般选哪个染色剂比价好呢,染色剂会不会对有机污染物的存在位置造成影响呢?谢谢大家啦~~~

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全部评论(1条)

  • cyh0018163 2015-02-17 00:00:00
    石蜡包埋前处理会用到无水乙醇有机物会不会把植物体内有机物给吸收了,影响结果哇 查看更多答案>>

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求助双光子共聚焦显微观察时切片制作和染色问题
求助各位友,观察有机污染物在蕨类植物中的分布,切片的制作用什么方法Z好呢,徒手切片每次都切得质量不好,有什么技巧可以参考么?染色的话一般选哪个染色剂比价好呢,染色剂会不会对有机污染物的存在位置造成影响呢?谢谢大家啦~~~
2015-02-16 21:07:24 501 1
荧光显微系统的新高度——Luminosa单光子计数共聚焦显微

过去的几十年中,德国PicoQuant的研发人员一直致力于制造最具定量性和重复性的时间分辨荧光显微镜系统。现在他们终于迈出了这一步,完成了一套更易于使用、且不影响灵敏度的系统。该系统打破常规,无需培训物理学支持人员便可轻松使用。全新的Luminosa可以让每个分子生物物理学或结构生物学研究人员轻松地将单分子和时间分辨荧光显微镜的方法添加到他们的“工具箱”中。


Luminosa系统的主要功能包括一键式自动对准程序和基于上下文的直观工作流程。例如,系统可以自动识别单个分子,或者它可以自动确定单个分子FRET (smFRET) 的校正因子。


对于经验丰富的专家,它仍具有先进的灵活性。所有光机组件均可访问,数据以开放格式存储,工作流程和图形用户界面均可定制。用户可以完全访问实验参数,例如可调节的观察量。


全新的Luminosa本身就是一套时间分辨荧光显微的多功能“工具箱”。它用于单分子水平的动态结构生物学研究。这些方法包括荧光寿命成像 (FLIM)、用于快速过程的rapidFLIMHiRes、FLIM-FRET、单分子FRET(突发和时间跟踪分析)、荧光相关光谱 (FCS)、各向异性成像和微分干涉对比 (DIC) 成像。


随着时间分辨荧光显微技术的用户群体不断扩大,对高重复性、高准确性和宝贵实践经验规则的需求变得尤为明显。Luminosa已经包含了科学家集体努力制定的经验指南,例如来自于单分子FRET群体在基准研究中的经验指南。

Luminosa 是一款将超高数据质量与超简日常操作相结合的单光子计数共聚焦显微镜。它可以轻松集成到任何研究人员的“工具箱”中,成为开始探索使用时间分辨荧光方法科学家以及想要突破极限专家的省时、可靠的“伙伴”。它是一个真正的显微镜系统,每个人都可以依赖。


产品特点:
◆ 全软件控制共聚焦系统,基于倒置显微镜
◆ 激光波长从375到1064 nm可选
◆ VarPSF:观察量高精度调节,用于FCS和单分子FRET实验
◆ 电动平移台,可在传动和FLIM模式下进行“图像拼接”
◆ 扫描选项:FLIMbee振镜扫描和压电物镜扫描
◆ 最多可集成SPAD, PMT或Hybrid-PMT组成相互独立的6通道探测单元
◆ <700 ps通道的死区时间和5 ps时间分辨率
◆ 一键式自动对齐,从而获得一致的最佳性能

◆ 借助GPU加速算法和基于上下文工作流程的FCS、FLIM和单分子检测,以最少的用户交互快速获得结果


产品领域:

◆ 单分子水平的动态结构生物学
◆ 相分离驱动的细胞机制
◆ 环境传感

◆ 细胞膜动力学和结构的映射


核心方法:
◆ 荧光寿命成像 (FLIM)
◆FLIM-FRET – 基于寿命的Förster共振能量转移
◆smFRET – 单分子Förster共振能量转移
◆荧光相关光谱(FCS)
◆荧光寿命相关光谱(FLCS)
◆荧光互相关光谱(FCCS)

◆各向异性成像


为此,德国PicoQuant公司特邀产品经理Evangelos Sisamakis博士在2022年10月6日-10月7日进行2场线上新品演示推广研讨会,重点介绍Luminosa是如何让每个分子生物物理学或结构生物学研究人员轻松地将单分子和时间分辨荧光显微镜的方法添加到他们的“工具箱”中,成为开始探索使用时间分辨荧光方法的科学家以及想要突破极限专家的省时、可靠的“伙伴”。欢迎各位有兴趣的研究人员报名注册https://www.picoquant.com/events/workshops-and-courses/category/webinar#luminosa 。

2022-09-26 14:33:37 193 0
共聚焦的共焦显微
 
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激光共聚焦扫描显微镜聚焦扫描问题?
激光共聚焦扫描显微镜在在焦平面(X-Y)聚焦时是一个点,可是它是移动什么使它能够进行线扫描的呢(即按照一条一条的线扫描,然后得到样品整个表面的结构信息)?还有进行三维重建时,Z轴的移动是通过什么完成的呢?有些资料里面显示聚光镜是装在音叉上面的,这... 激光共聚焦扫描显微镜在在焦平面(X-Y)聚焦时是一个点,可是它是移动什么使它能够进行线扫描的呢(即按照一条一条的线扫描,然后得到样品整个表面的结构信息)?还有进行三维重建时,Z轴的移动是通过什么完成的呢?有些资料里面显示聚光镜是装在音叉上面的,这里的音叉起到的作用又是什么?求解释,谢谢! 展开
2018-11-30 12:35:08 580 0
贴息贷款丨一体化全自动显微共聚焦拉曼光谱仪 RM5

英国爱丁堡仪器



一体化全自动显微共聚焦拉曼光谱仪 RM5


仪器介绍

RM5显微共聚焦拉曼光谱仪是一款紧凑型的全自动显微拉曼光谱仪,可以内置多达三个激光器。具有可调节的电动狭缝和多位可调节的共聚焦针孔,用于获取更高的图像清晰度,更好的荧光背景抑 制和更灵活的应用条件优化。


适用于新型材料、生物医药、物质鉴定等方面的测量,提供超高的光谱分辨率、空间分辨率和灵敏度,结合拉曼成像技术(2D/3D/Surface Mapping),实现全方位拉曼信息检测。


仪器特点

+ 紧凑型一体化分析级拉曼光谱仪

+ 多种配置一体化耦合

+  内置标准物质和自动校准功能

+  真共聚焦技术

+  功能强大的Ramacle®软件

+  高性能附件兼容(偏振组件、显微镜、样品台等)


应用范围

生物医药

   药品成分和分布状态分析;

   原料检定;

   生物相容性;

   药物/细胞相互作用;



铝箔上含有痕量扑热息痛颗粒的拉曼成像图


植物细胞木质素成像分布分析,A.白光图;B.成像图


能源光伏以及半导体材料表征

   薄膜太阳能电池结构分析;

   原位技术检测充放电;

   电极材料的缺陷分析;

   材料本征应力/应变的特征;



分散碳纳米管在晶圆上分布的拉曼成像(左)+硅基石墨烯单晶拉曼成像(右)



2022-12-07 11:47:14 179 0
贴息贷款丨科研级模块化显微共聚焦拉曼光谱仪RMS1000

英国爱丁堡仪器



科研级模块化显微共聚焦拉曼光谱仪RMS1000


仪器介绍

RMS1000拉曼光谱仪是一台“开放式”研究级别的共焦显微拉曼光谱仪。在仪器系统中可配置多达5个集成的窄带激光器,另,可以连接外部激光器,以及用于荧光寿命测量的脉冲激光器。RMS1000是一个真正的共焦系统,具有可调节的电动狭缝和多个位置可调节的针孔,能实现更高的图像清晰度,更好的荧光抑 制,应用优化。

适用于新型半导体材料、生物分子(如蛋白质、多肽)等方面的研究,提供超高的光谱分辨率、空间分辨率和灵敏度。模块化的设计,结合拉曼成像技术(2D/3D/Surface Mapping)和荧光成像技术(FLIM),实现全方位样品信息检测。


仪器特点

+ 模块化科研级拉曼光谱仪

+ 双焦长光谱仪可同时配置(800mm&250mm)

+ 最多耦合4个检测器(如CCD、EMCCD、InGaAs等)

+ 最多耦合5个内置激光器(配置外置激光器接口)

+ 内置标准物质和自动校准功能

+ 功能强大的Ramacle®软件

+ 真共聚焦技术

+ 强大的扩展功能(兼具拉曼+荧光测试)(正置/倒置显微镜)


应用范围

生物医药

   药品成分和分布状态分析;

   原料检定;

   生物相容性以及DNA/RNA分析;

   药物/细胞相互作用;

   微生物组织分析以及成像;



药片样品的拉曼表面成像以及成分分析(扑热息痛、阿司匹林、咖 啡因)


铃兰草根茎的双光子成像(左图)+荧光寿命成像(右图)


能源光伏

   薄膜太阳能电池结构分析;

   原位技术检测充放电;

   硅光电池的晶化率分析;

   电极材料的缺陷分析;



光伏器件碳纳米管空穴提取层(白光成像图(左)+荧光光谱成像图(右))


新型材料

   材料本征应力/应变的特征;

   物相晶型鉴别及结晶度测量;

   环境传感以及地质学探究。



不同材料样品的成像(暗场成像、二次谐波成像、拉曼成像、PL成像)(从左到右)

2022-12-07 11:35:06 108 0
共聚焦显微内镜分辨率怎么测出来的
 
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求助:细胞膜蛋白免疫荧光染色问题
 
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基于共聚焦显微技术的显微镜和荧光显微镜的区别

荧光显微镜主要应用在生物领域及医学研究中,能得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸如Ca2+ 、PH值,膜电位等生理信号及细胞形态的变化,是形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。


以共聚焦技术为原理的共聚焦显微镜,是用于对各种精密器件及材料表面进行微纳米级测量的检测仪器。


材料科学的目标是研究材料表面结构对于其表面特性的影响。因此,高分辨率分析表面形貌对确定表面粗糙度、反光特性、摩擦学性能及表面质量等相关参数具有重要意义。共焦技术能够测量各种表面反射特性的材料并获得有效的测量数据。


VT6000共聚焦显微镜基于共聚焦显微技术,结合精密Z向扫描模块、3D 建模算法等,可以对器件表面进行非接触式扫描并建立表面3D图像,实现器件表面形貌3D测量。在材料生产检测领域中能对各种产品、部件和材料表面的面形轮廓、表面缺陷、磨损情况、腐蚀情况、平面度、粗糙度、波纹度、孔隙间隙、台阶高度、弯曲变形情况、加工情况等表面形貌特征进行测量和分析。


应用

1.MEMS

微米和亚微米级部件的尺寸测量,各种工艺(显影,刻蚀,金属化,CVD, PVD,CMP等)后表面形貌观察,缺陷分析。

2.精密机械部件,电子器件

微米和亚微米级部件的尺寸测量,各种表面处理工艺,焊接工艺后的表面形 貌观察,缺陷分析,颗粒分析。

3.半导体/ LCD

各种工艺(显影,刻蚀,金属化,CVD,PVD,CMP等)后表面形貌观察, 缺陷分析 非接触型的线宽,台阶深度等测量。

4.摩擦学,腐蚀等表面工程

磨痕的体积测量,粗糙度测量,表面形貌,腐蚀以及亚微米表面工程后的表面形貌。

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