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- 261926978 2017-04-10 00:00:00
- 为什么土壤微生物的分离与纯化菌落培养不明显 营养不足或微生物太少
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- zqwczc 2017-04-11 00:00:00
- 1、土样采集:取10cm左右深层土壤10g备用. 2、制备土壤稀释液:称取土壤1g,放入有99mL无菌水的三角瓶中,振荡均匀,即为稀释10-2的土壤悬液.然后进行十倍梯度稀释,依次制备 10-3、10-4、10-5 、10-6 、10-7 稀释度的土壤稀释液. 3、培养基平板制备:按培养基配方各配置牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马丁氏培养基、高氏Ⅰ号培养基各100ml.灭菌后分别倒3个平板.(高氏Ⅰ号培养基灭菌前加入10滴10%苯酚;马丁氏培养基倒平板前加入2ml去氧胆酸钠(2%)和0.4ml 1万单位/ml链霉素) 4、接种:用无菌吸管吸取0.1ml相应浓度土壤稀释液,以无菌操作技术接种在平板上,涂布均匀.细菌选用10-4、10-5、10-6 三个稀释度接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,放线菌与霉菌选用10-2 、10-3、10-4 三个稀释度,分别接种于高氏Ⅰ号培养基、马丁氏培养基.(一个稀释度一个平板) 5、培养:细菌平板于37℃恒温培养1~2d,放线菌于30℃培养2~3d,霉菌于30℃培养3~5d ,观察. 6、计数:用稀释水样检测平板的菌落计数方法进行计数,报告细菌总数/(CFU·ml-1) 7、纯化:挑取典型菌落接种于相应平板,培养条件同上,培养 纯化.
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