全部评论(1条)
-
- 醉爱鱼62 2017-02-21 00:00:00
- 1.wash buffer中加入无水乙醇后,终浓度差不多就是70%的乙醇溶液了,在沉淀的DNA中,由于过多的盐杂质存在,影响DNA的酶切等反应,wash buffer就是洗去这些盐杂质的. 2.用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中Z常用的沉淀DNA的方法.乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂.DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合.一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的Z终含量占67%左右.因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵).但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率.折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵,Z后的沉淀步骤要使用无水乙醇.也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA.一般在室温下放置15-30分钟即可.如果你没有加无水乙醇,核酸不能沉淀,都随洗液弃掉了. 3.十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulfate)遇到钾离子后变成了十二烷基硫酸钾(potassium dodecylsulfate, PDS),钾离子置换了SDS中的钠离子形成了不溶性的PDS,而高浓度 的盐,使得沉淀更完全.大家知道SDS专门喜欢和蛋白质结合,平均两个氨基酸上结合一个SDS分子,钾钠离子置换所产生的大量沉淀自然就将绝大部分蛋白质 沉淀了,让人高兴的是大肠杆菌的基因组DNA也一起被共沉淀了.这个过程不难想象,因为基因组DNA太长了,长长的DNA自然容易被PDS给共沉淀了,尽管SDS并不与DNA分子结合. 需要特别说明的是:醋酸的加入是为了中和NaOH,因为长时间的碱性条件会打断DNA,所以要中和之.基因组DNA一旦发生断裂,只要是50-100 kb大小的片断,就没有办法再被PDS共沉淀了.所以碱处理的时间要短,而且不得激烈振荡,不然Z后得到的质粒上总会有大量的基因组DNA混入.
-
赞(5)
回复(0)
热门问答
- 质粒提取试剂盒和核酸提取试剂盒一样吗
2017-02-20 09:07:07
603
1
- 质粒提取怎么选择提取试剂盒
2017-07-03 06:28:28
396
1
- pcr回收试剂盒的吸附柱和质粒提取试剂盒的吸附柱一样吗?
2011-11-29 22:36:55
466
1
- 核酸提取试剂属于体外诊断试剂盒吗
2016-09-04 13:44:09
506
1
- 核酸提取试剂盒wa一般是什么意思
2018-11-29 15:59:16
473
0
- 哪个质粒提取试剂盒比较好
2017-07-19 00:37:42
282
1
- 转染用质粒提取试剂盒
2017-01-26 06:10:26
431
1
- 核酸纯化跟核酸提取一样吗?
2016-10-20 04:19:26
516
1
- 质粒提取试剂盒是一类YL器械吗
2016-06-21 06:38:43
404
1
- 【新品速递】全新升级不含蛋白酶K核酸提取试剂盒
新冠肺炎疫情爆发以来,最高频的词汇莫过于“核酸检测”了。从采样到出结果,整个流程要经历不少环节,每一环节都不容忽视。
而在影响核酸检测结果的众多因素当中,“核酸提取”以其重要性被视为关键一环,其成败与否,直接关系到下游的检测数据,影响检测人员对结果的判断。
逗点生物结合多年样本前处理经验,不断优化试剂配方,推出全新升级不含蛋白酶K的病毒 DNA/RNA提取试剂盒(预分装磁珠法)。
该试剂盒可用于从拭子保存液中提取新型冠状病毒RNA,相关试剂按最优比例预分装在96孔深孔板中,极大简化步骤,配合逗点生物的自动化核酸提取仪使用,可进一步实现高通量、全自动的核酸提取。
一、产品参数
二、核心优势
1)优化适配性
相关试剂配合仪器特性专门优化,保证提取效果
2)高效便捷
满足高通量核酸提取同时兼顾产品性能
3)安全性佳
试剂中不含酚、氯仿等有害物质
4)多元化
兼容自动化设备,满足不同通量提取需求
5)核酸质量高
提取核酸的浓度和纯度CV值小于5%,质量稳定
三、性能测试
利用病毒DNA/RNA提取试剂盒(预分装磁珠法,MB32)从假病毒血清中提取RNA并进行荧光定量PCR实验,结果如上图所示。
2021-11-18 13:58:51
297
0
- 核酸提取试剂盒归哪一类YL器戒
2018-12-14 18:15:45
193
0
- 哪些公司的miRNA提取试剂盒和逆转录试剂盒比较好
2016-11-23 20:42:44
342
1
- 请教关于胶回收试剂盒和质粒提取试剂盒的问题
2018-11-14 12:02:16
417
0
- 全式金hipure质粒提取试剂盒好用吗
2017-07-19 04:17:02
405
1
- 【求助/交流】omega质粒提取试剂盒好用吗
2013-10-20 07:43:17
284
1
- 去内毒素质粒提取试剂盒哪家好用
2017-07-25 00:01:45
275
1
- 北京三博远志质粒提取试剂盒
- 北京三博远志质粒提取试剂盒特点... 北京三博远志质粒提取试剂盒特点 展开
2010-12-01 10:52:32
542
1
- 质粒提取试剂盒和pcr产物纯化试剂盒中的洗脱液成分一样么
2018-11-13 06:16:51
406
0
- omega质粒提取试剂盒3m naoh 怎么配
2017-10-27 21:34:37
250
1
参与评论
登录后参与评论