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- 杀意绵绵 2015-04-20 00:00:00
- 主要是一次发酵不彻底,虽然分离了,还在继续发酵而产生白沫。而刺鼻味就是发酵产生的CO2了。这样,只要掌握好分离时机,就可以解决这个问题。 1、 知识的配备,准备花时间好好啃啃论坛里的贴子,另外买了《葡萄酒工艺学》。知识非常重要,也是需要慢慢积累并与实践相结合提升的。 2、 洗葡萄的问题:现在准备整串淋洗晾干,再摘粒破碎入瓶。这样可避免一些葡萄汁的损失以及尽量保存皮面的野生酵母。 3、 加糖:所以接下来想不再加糖或者加极少量的糖,1%左右,在一次发酵开始后再加。 4、 以前从没注意温度问题,现在开始也要关心了。接下来的酿制准备待气温下降一些,在20度左右再开始。 挑选葡萄:熟、黑 清选葡萄:整串淋泡,晾干水分 摘粒入瓶: 装满瓶的70%,预留空间给一次发酵时产生的大量气体(CO2),纱布包好瓶口,透气。 diyi次发酵: 发酵的温度Z好在20~25℃,Z高不应超出30℃,温度过高,发酵后产生的就不是酒而是醋。 酵母能够生存的临界温度是-2度~43度,Z理想的的温度是15度~27度。加入酵母后的24小时是酵母的“生长期”,在此期间温度要求捎高些,一般在21度左右,当酵母达到一定数量级后进入“发酵期”,此时温度可以稍低一些,其基本规律是温度高,发酵快,发酵期短;反之发酵慢,发酵期长。但当温度超过33度时,酵母即使不马上死,其繁殖活动也会停止。 24小时即可开始发酵。 发酵时每天应将上浮的葡萄皮用消毒筷子压到汁内两次,这样做一方面防止葡萄皮发霉,同 时可将皮上的色素浸入汁中,且发酵更旺盛。 加糖的时机 入坛后24小时,待发酵开始后再加糖,分两次加完。共加葡萄的1%(十斤葡萄1斤糖或者0.7%的量)白糖。 增加酒的度数:一般家酿葡萄酒的酒度约9度左右(指专用葡萄,一般葡萄只能达到7-8度),为了增加酒的度数,便于保存,可以在发酵高峰时(在开始发酵的第3天或第4天)每10斤浆汁加入7两糖,也可以在密封保存前调入一定量的优级酒精,可以将酒度提高4度多一点、达到14度的酒可以保存很多年。比如做好的酒为9度,想调高到14度,100斤葡萄酒加6斤酒精。 确定一次发酵结束: 不要着急分离,你的皮还在瓶上飘着呢,等到有一部皮沉底了,才是发酵结束的征兆。苦味与皮渣分离早晚几天关系不大,跟你发酵时的温度、葡萄的质量,操作是否合乎规程有关。 目的是让糖转化为酒精,当发酵趋于停止,皮渣下沉时即可认为一次发酵完成。 也可从酒液温度及密度变化上判断是否一次发酵结束:温度逐渐降低;密度逐渐低至0.992-0.996。 发酵过程中密度变化(1.083-0.994。小于1即可认为发酵结束。):不知国内都用什么终止发酵,还是让发酵自然停止. 0.994的比重有点过了.0.996-0.997 比较平衡. 加的是单糖吗?0.994应该属于正常,我看书上说0.992-0.996都属正常,比重越小酒的度数越高。我的酒基本上在12度左右。比如14,5度的酒就有可能到0.992。也是不错了. 只要个人喜欢的话. 与葡萄的品种也有关系. 比重小了, 有较多的酸味.但我也喝过 0.990的, 也不错。 如果酒渣分离太晚了,将会出现什么结果? diyi:酒酸败,第二,会带上一股烂葡萄味,第三颜色会出现变化。 分离晚了发酵充分,酒渣少,能多出酒。出酒率略高,苦涩味渐重。 一次发酵时间过长,除口感有过重的苦涩味外,酒体也是Z容易受杂菌感染的时候,此时占支配地位的酵母菌体大量死亡,PH值开始升高,乳酸菌等细菌开始繁殖,看下面一段:“在发酵(指一次发酵)终止时,必须尽快将葡萄汁封闭分离到干净的发酵罐。对于红葡萄酒,即使浸渍不够,也要分离。”(摘自《葡萄酒工艺学》P90)由此可见其危险性。 酒渣分离 用虹吸法吸出中间清澈的酒水瓶装好,另剩下的酒泥和皮渣压榨另瓶存好。这阶段瓶装至90%,余少数空间预留给二次发酵时产生的气体。 集中到较大容器中自然沉淀15天后,将清酒倒出,沉淀物扔掉(也可做美容面膜)。 二次发酵(萍乳发酵) 二次发酵应该主要是降酸(苹果酸)没有气泡了就完成了。苹果酸发酵(细菌发酵)降低酒液里面苹果酸的尖酸。我个人理解就像苹果催熟那样。没熟的苹果酸涩。熟了酸度就降低了 后期发酵(苹果酸-乳酸),对红葡萄酒来说,后期的苹乳发酵(不是必须)会降低酒的尖酸而使得酒质更柔润可口。温度合适(20度以上),酒精发酵后的葡萄酒会自然启动苹乳酸发酵(很多情况下苹乳酸发酵不能正常启动),此时的起泡细腻干净,也没有酒精发酵那么激烈,容器上方留有10%空间即可。且尽量避免氧化,减少与空气接触的面积和容量,有条件的可用简易单向阀控制气体只出不进。此阶段的时间约需半个月左右。如果当年没有启动苹乳发酵,可满瓶密封存放,酒液在过冬低温会析出酒酸石(米粒大小,晶体状),降低酒液的酸度,来年温度合适时,用虹吸法除去沉淀,期待苹乳发酵会自然启动。 澄清 将鸡蛋清用力搅匀(5分钟)倒入葡萄酒中并搅拌均匀,密封存放20天,葡萄酒就会变得清澈、透明。将澄清后的葡萄酒再次倒出,根据自己的口味加入适量的糖或蜂蜜,这样的酒就可以喝了或装坛、装瓶并密封、避光、低温长期进行保存了。 如果不加糖,这时的葡萄酒基本就是干红葡萄酒,只涩不甜,糖尿病患者可直接饮用。 澄清是必要的,酒液中的混浊物、悬浮物里面大部分是蛋白质小颗粒,加上酒中不可能达到无菌,时间长了,特别是存放几年的,难免其中的蛋白质腐败。比较轻的是口味不好,严重的要有害健康。我自酿葡萄酒已经五年了,头三年就是不做澄清的,后来搞了澄清之后,当时就看出来了,那酒不一样。去年我还把前几年的陈酒补作了澄清,当时那酒就上来档次了。 其实,做一下澄清也费不了什么大事,和其他工序比起来简单的多,而且蛋清属于无毒、无害。无非是打蛋清,实在不想太累,可以按照老曹的办法:用注射器抽、挤就行了。 一般情况下,初次学习自酿的都满足于做出来葡萄酒就行。做了两年之后就想精益求精了。当然,起步高一点不是更好么。 别忘了,澄清之后,要把沉淀物倒掉,否则,长时间放在里面一样会腐败。自然澄清效果非常有限,而且沉淀物也不密实、不稳定,倒酒时很容易再次浑浊。 澄清时机 第二次发酵完成后(第二次发酵需要15天)可以进行澄清,下入蛋清一周后(或2周)可以装瓶保存。 一个蛋清可以澄清40斤,把一个蛋清打开以后(太少了不好打开)取其五分之一就足够了。 蛋清若用筷子打,至少10分钟,用注射器抽吸几次就可以了(别忘了交给我ZL费),加入后当然需要摇晃瓶子了 自然陈酿 Z后完工的葡萄酒要装瓶(缸)密封、避光,置于15~20度的条件下,可以保存几个月甚至几年。年头越多酒越好喝,而且不上头,但不合格的酒、度数过低的酒、酸酒是保存不住的。
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- 我们不再是我们,我们依然是我们——当Alpha®遇上CETSA®
小分子药物研发中,筛选能有效结合目标蛋白的分子是非常耗时耗(财)力的一个环节,但又是必须进行的工作。高失败率源于结合情况的错综复杂,体外生化实验的结合效果,往往不能很好的在细胞水平进行重现。这其中可能是因为分子在穿越细胞膜时,出现了被修饰;也可能是因为纯化蛋白和真实细胞环境的蛋白构象不同。例如,在生化水平显示很好结合效果的分子,在细胞水平可能结合的是另一个蛋白。是不是很崩溃……
试想,如果有一个高通量解决方案让你可以直接在细胞水平进行小分子结合相应靶向蛋白的验证,开不开心,意不意外?
这个方案就是Alpha®-CETSA®!
什么是CETSA®?
CETSA®是细胞热迁移实验(Cellular Thermal Shift Assay)的简称,是PELAGO公司2012年在欧洲注册的ZL技术。该技术基于的原理是:每种蛋白质都有自身的热熔曲线(如下图)。随着温度的升高,蛋白质会发生降解(蓝色曲线);当蛋白质结合小分子以后,该复合蛋白的热熔曲线会右移(红色虚线),即相同温度下,未降解蛋白的量会提高。CETSA®实验的样品来源十分灵活,可以是细胞,也可以是活体给药以后的组织样本。
传统的CETSA®对于天然构象蛋白的检测模式主要有Western-Blot和MS方法,这两种方法都无法实现高通量的筛选。2019年7月,PELAGO公司正式和PerkinElmer公司达成战略合作协议,推出高通量,高灵敏度的CETSA®HT检测方案,即Alpha®-CETSA®
Alpha®-CETSA®的操作
1.样品和化合物进行孵育。
2.进行热休克操作(建议在PCR仪上进行该操作)。
3.加入合适的裂解液。
4.加入Alpha® CETSA®检测试剂。
5.在具有Alpha®功能的酶标仪上检测。
Z新酶标仪加载Alpha®功能
PerkinElmer公司的Victor NIVOZ新款酶标仪加载了Alpha®功能,这是目前可以开展Alpha®CETSA®检测细胞水平蛋白-分子相互作用的Z小的仪器。
目前,PerkinElmer和PELAGO一起推出的蛋白靶点试剂盒有Akt1,BCL-2,EGFR,MEK1和p38 MAKP,工具微珠2套,方便客户灵活使用这项技术。更多的商品化试剂盒也会陆续推出。
复制链接,了解更多https://www.perkinelmer.com.cn/category/alpha-CETSA-kits
关于珀金埃尔默:
珀金埃尔默致力于为创建更健康的世界而持续创新。我们为诊断、生命科学、食品及应用市场推出独特的解决方案,助力科学家、研究人员和临床医生解决Z棘手的科学和YL难题。凭借深厚的市场了解和技术专长,我们助力客户更早地获得更准确的洞见。在,我们拥有12500名专业技术人员,服务于150多个国家,时刻专注于帮助客户打造更健康的家庭,改善人类生活质量。2018年,珀金埃尔默年营收达到约28亿美元,为标准普尔500指数中的一员,纽交所上市代号1-877-PKI-NYSE。
了解更多有关珀金埃尔默的信息,请访问www.perkinelmer.com.cn
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