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  liansuying9 2016-09-05 00:00:00

  厌氧菌的培养方法 厌氧菌在有氧的情况下不能生长.要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境.通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势.如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等.常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用. 1．厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来. 2．厌氧袋（Bio-bag）即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌.塑料袋透明而不透气，内装气体发生管（有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿）、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂.放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口.先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境.如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育. 3．厌氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌Z佳仪器之一.它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名.箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着.欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气（H2，CO2，N2）达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门.箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理.该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验.金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节. 4．厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售. 5．生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物（多是植物），消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用.我没见过. 6．焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间.焦性末食子酸与碱反应后耗氧.该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养，简单.如有梭状芽孢杆菌. 7．疱肉培养基：本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法.疱肉和肉汤装入大试管，液面封凡士林，造成无氧环境.

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