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- sunrain2003 2017-01-01 00:00:00
- 核酸和蛋白质序列分析的内容和方法有哪些 蛋白质结构分析方法:X射线晶体衍射分析和核磁共振 x 射线衍射法的分辨率可达到原子的水平,使它可以测定亚基的空间结构、各亚基间的相对拓扑布局,还可清楚的描述配体存在与否对蛋白质的影响。多维核磁共振波谱技术已成为确定蛋白质和核酸等生物分子溶液三维结构的唯yi有效手段。NM R技术Z大的优点不在于它的分辨率,而在于它能对溶液中和非晶态的蛋白质进行测量。 蛋白质的序列结构测定: 1.到目前为止,Z经典的蛋白质的氨基酸序列分析方法是,sarI等人基于Edman降解原理研制的液相蛋白质序列仪,及后来发展的固相和气相的蛋白质序列分析仪。 2.质谱:早期的质谱电离的方式主要是电子轰击电离(EI),它要求样品的挥发性好,一般与 气相色谱联用。但使用G C/M S分析,肽的长度受到限制,只能分析小的肽段。近年来, 在离子化的技术及仪器方面取得了突破性进展,使得质谱所能测定的分子量的范围大大超 出了10k u。因此,软离子化技术、基质辅助的激光解吸/离子化(MALDI)和电喷雾离子化(E SI)显得尤为有前途。通过串联质谱技术(MS/MS)和源后衰减基质辅助的激光解吸/离子化(PSD—MAIDI—MS),人们就可以从质谱分析中获得肽及蛋白质的结构信息。
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介绍
DNA、RNA和PNA等核酸可以采用与蛋白质活性位点结合的活性结构。与蛋白质-抗体结合类似, 蛋白质-核酸 (NA) 结合表现出各种亲和力,这可以通过改变NA的序列来调节蛋白质-NA对的亲和力。这种设计NA序列以与靶蛋白达到特定亲和力范围的筛选策略被用于新兴的应用,例如个性化YL。SPR(Surface Plasmon Resonance)是一种功能强大的无标记技术,可以提供蛋白质-NA结合动力学数据,以便支持学术和临床研究,从而理解和调节核心细胞过程,如转录调控。
Affinité的P4SPR
Affinité的P4SPR具有独特的方法来识别DNA 上的结合配体、定量靶蛋白以及确定结合亲和力和结合动力学。NA固定的简单性和仪器的易用性使这种方法在培训后的几分钟内对任何人(从本科生到宇航员、高级化学家到科学家)都是直观的。
Affinité的技术已用于测定蛋白质-DNA相互作用。 在该测定中,双链DNA片段在SPR芯片上杂交,以无标记方法监测与可溶性蛋白质的相互作用。该方法适用于任何硫醇化核酸链的应用。
Lacl repressor protein / dsDNA
使用dsDNA对蛋白质进行分步检测
SPR分析仪P4SPR简要介绍
便携4通道表面等离子体共振仪(P4SPR)可以在任何需要的地方提供高质量的表面等离子体共振SPR数据。其专有的光学设计没有移动部件,使其更加紧凑和坚固。此外,P4SPR建立在Z先进设备中的基准SPR技术基础上:薄金属膜传感器。使用USB供电的P4SPR进行的每次实验分析都会同时进行三次测量样品并记录高精度数据的参考信号。您可以使用TraceDrawer或喜欢的数据处理软件快速处理文本文件中的输出数据,以提取定性和定量信息如浓度、结合、选择性、动力学和亲和力等。大多数SPR应用目前都是针对生物分子的相互作用。革新性SPR分析仪P4SPR使SPR解决方案更容易为现有和潜在用户所用,同时也正在开发新兴应用如测量和监测小分子和纳米粒子。
购买P4SPR分析仪时,包含的物品如下:
l P4SPR仪器(1)
l USB线缆(1个USB 2.0 mini-B,1个USB 2.0 micro-B)
l P4SPR操作软件
l 金(Au)芯片(10)
l PDMS流体通道(3)
l 硬质塑料外壳
l 导管和连接器
l 带有P4SPR控制软件的USB密钥
l TraceDrawer生物分子分析许可证(可选)
技术规格
规格参数
物理尺寸(L×W×H)
175 × 155 × 55 mm,
6.9 × 6.1 × 2.2 inch
重量
< 1.3千克(2.9磅)
光源
多色光源
微流体池
4通道PDMS
流动池体积
<20 μL
样品体积
大于50 μL
灵敏度
2750 nm/RIU
CV系数(3通道)
>0.6%
折射率分辨率
1μ RIU
折射率范围
1.30 – 1.39
亲和力范围(蛋白质)
10^-10 ~ 10^-5 M
浓度范围(生物分子和小分子)
10^-15 ~ 10^-3 M
电源要求
USB供电(<200 mA)
计算器和平台要求
Window XP/7/8/10,有2个USB端口
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