仪器网(yiqi.com)欢迎您!

| 注册 登录
网站首页-资讯-专题- 微头条-话题-产品- 品牌库-搜索-供应商- 展会-招标-采购- 社区-知识-技术-资料库-方案-直播- 视频

问答社区

转染 后用荧光显微镜观察细胞是否有荧光出现 在

妒写饶tdd913 2018-01-11 21:50:05 937  浏览
  •  

参与评论

全部评论(1条)

  • 鹊下乒北佳F 2018-01-12 00:00:00
    我Z近常做这个实验,GFP也在N端,与目的蛋白融合表达,我对COS-1转染该融合片段的感想总结如下: 1)转染细胞状态一定要好,这是成败的关键。我选择的是早晨消化COS,分瓶密度高,下午即在60%满时,就转染1-2ugDNA,6hr换液用低血清(1%FBS)DMEM维持 2)GFP-目的蛋白由于CMV启动子问题,表达效率太高,对细胞的正常状态不利,尤其是细胞状态不好的细胞。所以常有细胞漂浮起来、凋亡的现象,看荧光时,可以将细胞上清洗涤后观察。 3)根据不同蛋白的性质决定的,有的蛋白具有NES、NLS或跨膜区、信号肽等功能性序列,可能将GFP带到胞外 4)细胞的性质决定GFP位置:如COS细胞,常形成液泡,占据大量胞浆,GFP有时会沿着这种胞液分布,要选择高倍镜观察 5)观察要仔细,选择可见光和高倍数荧光看 祝您成功!

    赞(9)

    回复(0)

    评论

获取验证码
我已经阅读并接受《仪器网服务协议》

热门问答

转染 后用荧光显微镜观察细胞是否有荧光出现 在
 
2018-01-11 21:50:05 937 1
明美倒置荧光显微镜应用于GFP转染细胞观察

近日,有一家生物制药公司找明美,需要一套荧光显微镜+显微镜相机,主要是用来观察GFP转染细胞,通过观察转染情况并计算转染效率。

绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,简称GFP),GFP的荧光性质比较特殊,GFP荧光反应不需要外加底物和辅助因子,只需紫外光或蓝光激发,即可发出绿色荧光,用荧光显微镜甚至肉眼就可以观察到。

根据客户样品的特殊性,明美工程师推荐了一款倒置荧光显微镜MF52-N,MF52-N是明美19年下半年推出的产品,是应用于细胞组织,透明液态组织的显微观察,也可用于生物制药,医学检测、疾病预防等领域内的荧光显微观察。

如果您对明美倒置荧光显微镜MF52-N感兴趣,欢迎咨询!



(来源:http://www.mshot.com/kehuanli/20200107.html广州市明美光电技术有限公司)

2020-01-09 10:37:37 429 0
倒置荧光显微镜应用于活细胞生长状况以及蛋白质荧光转染效率观察

活细胞通常用倒置荧光显微镜看起来方便,细胞在下面,离物镜近,还可以用油镜,成像质量要比正置好,分辨率高。老师需要对活细胞的生长状况以及荧光需要观察清楚,同时使用上希望比较方便。

解决方案:

明美工程师给客户推荐高性价比的倒置荧光显微镜MF52-N,可更方便的通过多种方法观察样品,同时操作简单、方便,减少工作中的疲劳,也无需担心调焦过度而损坏物镜,另外根据客户要求搭配进口带通滤色片,荧光效果好。同时推荐了高像素相机MSX2,这款显微镜相机像素达到了1250万,能够使显微成像效果更加清晰,细节展示更加丰富,满足客户的要求。




(来源:http://www.mshot.com/kehuanli/20200410.html)


2020-04-25 17:07:03 584 0
为什么康宁24孔细胞培养板观察黄色荧光蛋白在荧光显微镜下会发荧光
 
2017-06-04 09:27:47 488 1
关于HeLa细胞在荧光显微镜下的观察
没开荧光的时候这些圆圆的东西是什么?... 没开荧光的时候这些圆圆的东西是什么? 展开
2015-04-27 06:19:51 358 5
倒置荧光显微镜应用于山东农大食品学院荧光活细胞观察

明美倒置荧光显微镜助力山东农大食品学院荧光活细胞观察

细胞培养已经在越来越多领域的研究中成为基础技术,而为了进行进一步的研究,往往需要使用荧光标记技术,如近期,山东农大食品学院需要一套倒置荧光显微镜供研究生研究使用,用于荧光活细胞观察。

活细胞成像有较多注意事项,如将活细胞暴露于光线下会导致光毒性和样本生理机能变化,因此获得的结果可能与健康生物体的实际情况不符。 如果需要观察荧光转染细胞,宽场荧光显微镜通常是活细胞成像的好选择。明美倒置荧光显微镜MF53-N选用触屏控制LED冷光源,UV紫外波段单独控制,光毒性更低。

倒置荧光显微镜MF53-N可扩展性强,标配转盘式六孔荧光模块,可自主选择需要的荧光波段,还能扩展三轴高精度电动平台和TIRF全内反射观察,实现更高的Z轴分辨率和更清晰锐利的荧光成像。

您若对倒置荧光显微镜MF53-N感兴趣或存在疑问,欢迎与我们联系

免责声明

本站无法鉴别所上传图片、字体或文字内容的版权,如无意中侵犯了哪个权利人的知识产权,请来信或来电告之,本站将立即予以删除,谢谢。 

来源:https://www.mshot.com/article/1777.html

2023-07-17 16:02:59 145 0
观察细胞时为什么使用荧光显微镜
 
2016-03-21 00:11:24 430 1
奥林巴斯倒置荧光显微镜ix73怎么观察绿色荧光
 
2017-08-12 14:53:54 536 1
倒置荧光显微镜MF53-N应用于细胞荧光蛋白表达观察

倒置荧光显微镜MF53-N应用于细胞荧光蛋白表达观察|应用百科

倒置荧光显微镜 MF53-N是一款研究级倒置荧光显微镜,可以用于细胞荧光蛋白表达的观察和研究。在细胞生物学和分子生物学等领域中,荧光蛋白是一个非常重要的工具,它可以特异性标记特定亚细胞结构或抗原等成分,帮助研究者们观察细胞结构、细胞周期、细胞凋亡等关键过程,而为了观察荧光蛋白信号,就需要用到荧光显微镜。倒置荧光显微镜 MF53-N 的应用,极大地促进了这些领域的研究进展。

倒置荧光显微镜 MF53-N采用研究级倒置显微镜机身,标配六孔转盘式荧光模块和大功率宽光谱LED荧光光源,使用体验接近传统汞灯荧光显微镜,不同的是,LED荧光光源不仅能做到即开即用,还能单独控制UV波段的开关,大大避免光毒性。

倒置荧光显微镜 MF53-N可以选择明美大功率宽光谱LED荧光光源MG-100和四通道光源MG-120等荧光光源,适用于多种细胞生物学和分子生物学的研究场景,例如,细胞凋亡的过程,研究药物对细胞的影响,探究细胞周期的变化等等。此外,倒置荧光显微镜 MF53-N 还可以用于观察多种荧光蛋白的表达情况,例如,绿色荧光蛋白 (GFP)、红色荧光蛋白 (RFP)等。这些荧光蛋白的观察,可以帮助研究者们更好地理解细胞结构和过程,并且可以指导研究者们进行更深入的研究。

倒置荧光显微镜 MF53-N还可以用于医学领域中,比如研究者可以使用倒置荧光显微镜 MF53-N 相衬观察癌细胞培养的形态和过程,从而更好地理解疾病的本质,并为临床诊断提供有用的信息。

总之,倒置荧光显微镜 MF53-N 是一种非常重要的实验工具,它可以帮助研究者们更好地理解细胞结构和过程,并且可以为临床诊断提供有用的信息。

免责声明

本站无法鉴别所上传图片、字体或文字内容的版权,如无意中侵犯了哪个权利人的知识产权,请来信或来电告之,本站将立即予以删除,谢谢。 

来源:https://www.mshot.com/article/1779.html


2023-07-04 17:16:17 189 0
明美倒置荧光显微镜应用于活细胞观察

       近期,有客户找到明美,需要倒置荧光显微镜+显微镜相机来看活细胞,应用于生殖领域。

       活细胞是能进行新陈代谢、繁殖、复制的细胞。例如:筛管细胞,酵母菌,花粉,精子,血小板等。活细胞也称作活化细胞。

       由于客户要求较特殊,明美工程师提供个性化解决方案,推荐明美倒置荧光显微镜MF53(选配20X/40X相差物镜),另外搭配明美科研级显微镜相机MS23,Z终呈现的效果客户很满意。

       如果您对明美显微镜相机感兴趣,欢迎来电咨询!

(来源:http://www.mshot.com/kehuanli/20200117.html广州市明美光电技术有限公司)


2020-01-20 15:22:51 325 0
荧光显微镜下观察细胞,用什么染色方法
 
2016-12-26 23:43:37 477 1
没有荧光显微镜 如何观察细胞有没有表达egfp
 
2017-09-14 02:58:31 416 1
荧光显微镜下正常细胞怎么会有微弱荧光
 
2010-11-22 19:33:59 314 1
荧光显微镜下正常细胞怎么会有微弱荧光
 
2016-12-10 09:24:11 441 1
荧光显微镜观察细胞染色,为什么要先用乙醇固定
 
2018-07-03 09:35:45 504 1
如何在 荧光显微镜下观察切片的gfp细胞
 
2015-01-22 10:35:04 482 2
荧光显微镜的如何进行灯泡的调中和荧光观察

     荧光显微镜是由生物显微镜和落射荧光装置组成,有消杂散光系统,可以将强烈的杂光导入至物镜光路之外,并加以吸收,提高了显微镜的图像信噪比。

     下面是荧光显微镜的灯泡的调中和荧光观察的方法:

     一、灯泡调中的方法:

    (1)任选一块标本放在载物台上;

    (2)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路,转动滤色片组转换手轮,将紫光(V)或蓝光(B)或绿光(G)激发滤色片组转入光路,并将10X荧光物镜转入光路;

    (3)调节粗微调手轮,将标本像调焦清晰;

    (4)前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆,使视场光栏成像清晰,转动视场光栏拨杆将视场光栏收小,调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中,然后再将视场光栏开至较大;

    (5)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路,前后调节灯箱上的聚光镜拨杆,使汞灯的弧光在视场内成像清晰;

    (6)调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使汞灯的弧光居中;

    (7)调整反光镜水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使光源的反射像与汞灯的弧光分开;

    (8)转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路,此时视场照明均匀。

    二、如何进行荧光观察:

    (1)将荧光染色标本放到载物台上。

    (2)将10X平场物镜或40X荧光物镜转入光路,调节载物台纵横移动手轮,将标本移入光路。

    (3)转动滤光片转换拨轮,将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路。激发滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上。滤光片选择正确与否,是荧光显微镜能否得到正确应用的关键。选用滤光片时,必须遵守斯托克斯定律:激发滤光片的透射波长<双色束分离器的透射波长<阻断滤光片的透射波长。由于激发滤光片、双色束分离器和阻断滤光片,出厂时已按其用途和本身的光学特性进行了严格的组合匹配,在观察和摄影时,只需选择滤光片组即可。

    (4)调节粗调手轮,当看清荧光图像轮廓后,再用微调手轮调焦,直至看到清晰的荧光图像。

    (5)当需要得到较强的荧光图像时,可转动聚光镜旋钮把聚光镜移入光路,可获得较明亮的荧光图像。

    (6)当需要使用40X或100X荧光物镜观察时,应在标本和物镜间加上甘油,油中不能有影响观察的小泡或杂质。使用时可使甘油慢慢浸润一会儿,然后轻轻左右来回转动物镜转换器以排除气泡。

    荧光显微镜对于物质的检出能力是非常高的,具有放大的作用;而且对于被检测物质的细胞的刺激也是非常小的,可以检测活体的染色体;还有就是可以进行多个步骤的染色。对于荧光素的构造观察是非常好的,一般的显微镜是看不出来的。而且对于一些物质是否有荧光,荧光是什么色调的进行判断,还能看出是不是抗体的荧光。此款显微镜对于物体的定性、定量分析都是可以测定的。


2021-09-03 17:25:48 418 0
荧光显微镜下可看到非荧光标记细胞么
 
2012-03-01 13:03:35 444 2
活细胞能不能在荧光显微镜下观察到自体荧光
 
2016-12-11 02:16:35 719 1
荧光显微镜怎么计算红色荧光细胞所占的百分数
 
2016-09-28 04:19:35 485 1

9月突出贡献榜

推荐主页

最新话题