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elisa操作中有哪些注意事项

大痣龙__ 2018-11-28 11:57:13 305  浏览
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热门问答

elisa操作中有哪些注意事项
 
2018-11-28 11:57:13 305 0
您知道ELISA试剂盒操作注意事项有哪些吗
 
2018-07-15 05:58:23 408 1
ELISA试剂盒操作注意事项您知道吗?

  ELISA试剂盒操作注意事项您知道吗?

  ELISA试剂盒的操作注意事项:

  1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物请避光保存。

  7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

  8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

  9.本试剂不同批号组分不得混用。

  10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

  ELISA试剂盒--注意事项:

  ◆标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。

  ◆冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要在混匀器上强烈震荡。

  ◆浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。

  ◆反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。

  ELISA实验标准曲线平直,一般有以下原因:标准曲线制备是否不当,洗孔不净,吸孔不充分,读数不准确或是吸量误差。查找原因,即可找到相应解决方案。

  ELISA试剂盒操作注意事项您知道吗?本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。


2022-08-04 10:00:40 269 0
滴定分析中有哪些注意事项
 
2017-02-11 03:46:02 1127 1
大鼠Elisa试剂盒操作注意事项与步骤

  大鼠Elisa试剂盒操作注意事项与步骤

  大鼠Elisa试剂盒注意事项:

  1. 大鼠Elisa试剂盒冻结与寄存:-20℃取出后主张放入2~8℃冰箱中冻结约,每隔一段时间悄悄摇晃均匀,不可直接放入温度较高处冻结,防止因温度改变太大,形成蛋白质凝聚而出现沉积,血清的质量下降。若短期无法用完一瓶,主张无菌分装,再放回冷冻,防止反复冻融。4℃长时间保存后血清中的变性脂蛋白及纤维蛋白,形成絮状物质变差。

  2. 大鼠Elisa试剂盒是否灭活:加热可灭huoxue清中补体系统,在极少数情况下(培育ES细胞,滑润肌细胞时)主张灭活,在培育其余细胞时不主张灭huoxue清。血清灭活十分简单产生沉积,如必须灭活请按56℃,30 min,轻微摇晃准则操作,灭活温度高、时间长、摇晃不均都简单产生沉积。

  3. 大鼠Elisa试剂盒培育基:无血清培育基在结果重复性、细胞体外分化方面有优势,可是,血清仍然是培育液中最根本的添加物,尤其是在原代培育或细胞成长状况不良时,常常会先使用有血清的培育液进行培育,待细胞成长旺盛后再换成无血清培育液。

  大鼠Elisa试剂盒操作过程 :

  1.用盖片镊人Elisa试剂盒将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭洁净,不要用纱布;

  2.将盖玻片悄悄放入6孔培育板(每孔一片)或培育皿中(每个平皿可放置2-3片);

  3.在间隔紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

  4.将通过计数的细胞悬浮液移入培育板中,使盖玻片彻底浸在培育液中;

  5.将人Elisa试剂盒培育板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞成长至覆盖培育板底部2/3面积时,将培育板取出,用盖片镊悄悄取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

  大鼠Elisa试剂盒操作注意事项与步骤先和大家介绍到这,如果想要了解更多Elisa试剂盒的信息,可以关注天津本生,本生给生物医药客户提供生物实验室检测试剂及耗材,欢迎广大客户来询。

2021-07-22 14:57:29 422 0
本生阐述:elisa操作步骤说明及注意事项

  本生阐述:elisa操作步骤说明及注意事项


  酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay(简写ELISA),指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。要知道elisa操作步骤首先我们先了解一下elisa的原理是什么。

  elisa的原理:

  ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。

  ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性, 又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体 上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物, 产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据焰色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到 很高的敏感度。

  elisa操作步骤:

  方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。

  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。

  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

  6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越 强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则 410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

  方法二 用于检测未知抗体的间接法:

  用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日 洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔 中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体

  以上是elisa操作步骤,那么在elisa操作步骤的操作步骤中需要注意什么呢?下面是elisa实验的注意事项:

  1.正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。

  2.在elisa操作步骤中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:固相载体的选择、包被抗体(或抗原)的选择、酶标记抗体工作浓度的选择、酶的底物及供氢体的选择

  elisa试剂盒 本生(天津)健康科技有限公司是一家从事健康科技技术开发销售的公司,本生生物公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准。本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。


2023-06-05 11:14:21 132 0
大鼠ELISA试剂盒实验中有哪些标准

  大鼠ELISA试剂盒实验中有哪些标准

  大鼠ELISA试剂盒实验中有哪些标准,操作所要求的条件是比较严格的,无论是对实验的硬件条件仍是对实验的操作人员的技术要求,都是如此。用洗刷的办法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再参与酶符号的抗原或抗体,也经过反响而结合在固相载体上。

  此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。参与酶反响的底物后,底物被酶催化成为有色产品,产品的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化功率很高,间接地扩大了免疫反响的结果,使测定办法到达很高的敏感度。

  下面便是天津本生小编的一些在进行ELISA实验时所要注意的一些问题。

  实验大鼠ELISA试剂盒10条通用规则

  1、要移液枪的准确性,过失不能超过2%。可用水和电子天平进行确认。但有业人员进行纠正。

  2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。罗致不同的液体后,要更换枪头。即使是罗致标准品时。

  3、要在实验1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都康复到室温,以使成果更安稳。

  4、实验时,要使底物避光保存。

  5、用枪罗致液体时速度不能太快,避免产生气泡而使罗致量不准确。

  6、罗致液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少过失。

  7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体触摸,可使枪头上的液滴和孔壁触摸,液滴会天然流下去。

  8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行悄悄晃动30,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功用。

  9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,避免水分的蒸腾。

  10、洗板时,每次洗液参与后,应静置1分钟,使清洗愈加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

  大鼠ELISA试剂盒实验中有哪些标准?我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。   既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

2021-10-08 14:29:51 154 0
金相显微镜在选购中有哪些注意事项?
 
2012-03-11 05:57:37 387 3
热重分析仪操作注意事项有哪些?

      每一种物质都有重量和温度,有些实验或产品的生产过程中,需要了解物质的质量和温度之间的关系,此时就需要使用热重分析仪来进行检测和分析。在使用热重分析仪的时候,为了确保分析数据的准确性,操作人员应该注意下列这些使用事项。

1.高温下使用合适的坩埚

      国内专业的热重分析仪在使用的过程中会有一些配套的工具,例如坩埚。当做温度测试之时,如果需要的测试温度非常高,例如超过500℃,那么就要注意将铝质的坩埚更换成陶瓷坩埚,因为陶瓷坩埚更加耐受高温,能够保证物质在测试时不会受容器的影响。

2.强酸碱样品要提前稀释

      在用热重分析仪对物质进行分析检测时,如果提供分析的样品是强酸强碱物质,那么要注意讲样品按照规定的比例进行稀释以后方可进行接来下的测试工作。

3.样品的数量要符合要求

      如果需要用热重分析仪测试的样品为液体时,那么要注意液面不能超过坩埚的一半,如果是固体粉末状样品,那么不能超过三分之一。此外,还需要注意的是,在测试之前,要保证样品不与坩埚发生反应。

4.高温测试要做空白实验

      当测试温度较高时,应该对热重分析仪配套使用的坩埚先做一下空白实验,并且要将空白实验曲线作为基线调入,然后再放入样品进行测试。在测试的时候,还应该注意热重分析仪操作板上的室内温度,不要有较大波动,此外,测试环境中不能有明显的空气流动、噪声或震荡。

      为了确保热重分析仪能够得到准确的检测分析数据,大家需要多了解热重分析仪哪家产品好,只有采买到优质可靠的热重分析仪,并且在操作的过程中充分注意上述这些事情,才能得到Z准确的数据,从而为产品的生产或实验提供可靠的依据。


2019-07-12 11:20:20 903 0
磁翻板液位计操作注意事项有哪些?
 
2015-04-12 15:16:35 379 1
液氮操作需要注意事项哪些
 
2018-03-31 04:42:37 394 1
匀浆机操作时有哪些注意事项?
 
2013-01-04 01:38:04 273 1
双螺杆挤出机操作有哪些注意事项
 
2015-07-21 15:35:40 232 3
ELISA 实验注意事项知多少
 
2018-11-18 10:33:46 255 0
操作老化试验箱的注意事项有哪些

   别看老化试验箱简单,若实际操作起来,我们必须了解它有哪些该注意的事项,才能更好更安全地操作。老化试验箱操作注意事项具体有哪些,下面由东莞勤卓科技的小编具体分析:

老化试验箱的使用注意事项

1、电源设备:应在供电线路中装有超负荷的保险丝装置,供此箱特种,并具有良好接地装置。

2、试料准备:将试品逐一编号后,将试品放置于试品转盘上,彼此以不相互接触和碰撞为宜。

3、待一切准备就绪,即关上箱门。

关闭控制系统各个开关,将电源插扑插上打开电源开关转盘即自动转动,同时控制系统的电源指示灯即亮,若须升温必须打开开关(即高温开关和低温开关),然后调节全自动控制系统

5、仪器外壳必须有效接地,以保证使用安全。

6、仪器应放在通风良好的室内水平位置,在其周围不可放置易燃易爆物品。

7、应在供电线路中安装铁壳的闸刀开关一只,供此箱特种,在外壳接地通电前请检查本箱的电器性能,并应注意是否有断路或漏电现象,本仪器无防爆装置,不得放入易燃易爆物品干燥。

8、箱内物品放置切勿过挤,必须留出空间,以利热空气循环。

9、非工作人员请匆操作。




2019-12-20 14:48:52 398 0
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2012-12-10 09:39:42 581 2
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2017-10-24 09:53:23 488 1
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我要写论文,论文的题目是《机械表面加工在工艺中的注意事项及重要性》,可以的话,请多给一点意见
2017-09-07 09:20:21 478 1
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2015-09-23 15:14:30 375 1
老化实验箱的操作注意事项有哪些

注意事项

 本箱必须有效接地,以确保安全。

试验室内照明灯不要随便开启,用开的时间不宜过长,以免烧毁。

使用本设备应有专人负责看管,试验完毕应切断外接电源。

箱内放置试品时不能太密,以 免影响工作室内气流的正常流动,造成试验失效。

工作室底部不可放置试品进行试验。

请勿随意拆装电器元件及设备的零部件,以免损坏电气控制线路及设备的人为事故而影响其性能与正常工作。

严禁利用本箱干燥处理易爆、易燃、易挥发的物品。


2022-02-22 14:02:47 162 0

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