全部评论(6条)
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- 崛起king 2008-10-23 00:00:00
- 没有
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- 啰哈朋友们 2008-10-22 00:00:00
- 没有,在荆州还有20~30头!!
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- 54321jjjjj 2008-10-25 00:00:00
- 没有,在荆州还有20~30头!! xi
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- sjdifickcc 2008-10-24 00:00:00
- 不是的,白鳍豚没有灭绝,只是只剩下几十头了,世界都在呼吁拯救白鳍豚,让他不要灭绝
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- lalamin886 2008-10-23 00:00:00
- 还没有,因为要正式宣布灭绝要观察十年,并且现在还有人再很多地方都见过,所以不能确定已灭绝,但新问却这样说; 白鳍豚“淇淇”于2002年7月去世后,ZG科学家再也找不到可以研究的对象了。白鳍豚于2500万年前由太平洋迁徙至长江;1996年,世界自然保护联盟将它列为极危动物。8月8日,英国《独立报》等报道,生存于长江的白鳍豚已经灭绝。近日有人声称在长江铜陵段拍摄到白鳍豚,专家认为这又是一起“疑似事件”。ZG水生动物研究专家王丁表示,白鳍豚确实已处于灭绝边缘,属“功能性灭绝”。 2006年12月13日,武汉长江边,小雨。“科考1号”和“ZG渔政42003”两艘科考船缓缓靠岸,岸上是大批等消息的记者。 38天前,这两艘480马力的机船从武汉百威啤酒码头出发,开始了搜寻白鳍豚之旅。船上是来自ZG、瑞士、英国、美国、德国和日本等6国的鲸豚类专家,他们曾见识过几十种鲸豚类动物,在这一领域颇有建树。出行前他们互相加油鼓气,信心满满。 记者们终于没有等到好消息。38天来,在近3400公里的航程中,除了两次疑似白鳍豚的事件外,没有发现白鳍豚的踪迹。下船的时候,有人给因故提前返回武汉的科考队队员王克雄发了条消息:“结束了。”大学毕业后直接进了ZG科学院水生生物研究所(下简称水生所)的王克雄和白鳍豚打了二十多年交道。看到短信,他几近泪下,“我意识到,我们可能真的要和白鳍豚说再见了。” 几个月后,这个坏消息以一种更为确定的方式从英国传来。8月8日,《独立报》、《卫报》和BBC等媒体同时报道:ZG长江白鳍豚已经灭绝,认为这是diyi个由人类行为导致灭绝的鲸类动物。这一结论引自英国学会的同行评议期刊《Biology Letters》发表的“2006长江豚类考察”报告。之后,这次国际科考队的负责人、报告的责任作者、水生所副所长王丁纠正说:报告并未认定白鳍豚已经灭绝,但白鳍豚确实已处于灭绝边缘,属“功能性灭绝”。王丁在接受《外滩画报》采访时强调:“这也是中方科学家的观点。” 11天后,“好消息”传来,一个安徽市民在历史上白鳍豚经常出没的长江铜陵段拍摄到白鳍豚。因为录像非常模糊,水生所在仔细研究后并没有得出肯定的答案。王克雄说,“这只能说是继2002年5月在该水域发现白鳍豚以后的又一起疑似事件。”9月中旬,中科院水生生物研究所专家将前往铜陵,和铜陵淡水豚自然保护区联合搜寻白鳍豚。 淇淇之死 一切还得从淇淇说起。淇淇是一头雄性的白鳍豚。1980年1月12日,在洞庭湖口被渔民误捕时只有两岁。它的脖子上至死都有被大铁钩子钩上岸时留下的两个深深的大洞。离开长江后,淇淇住进了水生所为它建的一个大水池子里——后来这里被戏称为“白公馆”,成为世界上diyi头人工饲养的白鳍豚。美国动物保护学家亨利说:“我有幸成为看过淇淇的几个外国人之一。它为我们联系起一个正在消失的世界。” 淇淇来得恰逢其时。1978年秋,水生所决定成立世界上diyi个白鳍豚的专门研究机构。“这算是一个政治任务。”王丁回忆。当时世界上有5种淡水豚类,只有ZG的白鳍豚没有人研究,国外专家向ZG政府写信,提出到ZG来开展研究。邓小平当即表示:既然外国人这么积极,我们自己为什么不研究呢?王丁当时在中科院物理研究所工作,水生所需要人做白鳍豚声学研究,被调了过来。“当时只有零星的资料,白鳍豚研究算得上是一片空白。” 王克雄说,有了淇淇,ZG在白鳍豚的饲养学、行为学、血液学和生物声学等诸多领域,产生了大批成果。1984年,大学毕业的王克雄进入水生所工作,负责训练淇淇。“早期我们非常亲密,几乎大部分的时候都在一起,直到后来新的同事加入进来。”白鳍豚怕人,初到白公馆时非常不安。后来工作人员给它带来了娱乐项目。它Z喜欢游泳圈和皮球,经常趴在救生圈上,或者钻过去,还用嘴巴将它们顶出水面。王克雄到的时候,淇淇已和工作人员熟悉,“我们一进馆里,它就会摇头摆尾地游近池壁,在你的脚下不动。” 淇淇已经长大,成了一个“帅小伙子”,每年的3月到6月发情期,它将身体直立于水中,一边摇晃脑袋,一边发出吱吱叫声,生殖器也伸出体外,贴着墙壁运动,样子非常兴奋。水生所开始为它寻找配偶。1986年,水生所成功地捕捉到两头白鳍豚“珍珍”、“联联”。几个月后,联联因不适应人工环境死去,与淇淇配对的珍珍也在两年半后突然死亡,这一段姻缘Z终无果。之后水生所又开展了几次捕捞,但均以失败告终。直至2002年7月14日去世,淇淇一直孤零零的。人工繁殖白鳍豚的梦想也因此破灭。 关于淇淇的身后事也有不同意见。一种认为淇淇已经是大家的朋友,按照ZG的传统习惯,应该把它完整地保存下来。另一种意见认为应该把它的内脏取出来研究。王克雄回忆说,淇淇的影响力太大,大家都想知道它的死因,Z后决定把淇淇的内脏取出来,根据研究工作的需要用超低温方式保存,大的器官放在里保存,身体做成了骨骼标本和皮革标本。 曾有人建议将恢复健康的淇淇放归长江,有人甚至将白公馆斥之为“监狱”。“如果了解ZG白鳍豚的研究历史,就不会如此评价了。”王克雄解释。当年好不容易可以做白鳍豚研究,却没有研究对象。研究人员找到了淇淇,理所当然地将它留了下来;又为它寻找配偶,想在人工条件下繁殖白鳍豚,但这一想法Z终未能如愿。水生所一直很矛盾,一方面想将淇淇放归自然,另一方面也希望能够捕到野生白鳍豚,再尝试一次,但一次次捕捞工作都以失败告终。此时的淇淇已经年老体衰,早已失去了野外生存的能力。 王丁说,淇淇的存活是一个奇迹。它曾屡次病重,但Z终都起死回生。1996年,淇淇得了严重的肝坏死,有一个月它什么都不吃,工作人员买来大鱼,挑出鱼刺,把肉打成浆丸给它吃;去世前几年,它消化系统虚弱,工作人员每天抽干水,把它弄上来,替它注射生理盐水。相比之下,它的同伴就没那么幸运。除了珍珍和联联,1981年水生所就曾在湖南省华阳县捕获一只雄性白鳍豚,取名“容容”。当时水生所没有取暖设备,这只瘦弱的白鳍豚在几个月后的一次寒流来袭时活活冻死。1995年,在湖北石首天鹅洲白鳍豚自然保护区,唯yi一头放养的白鳍豚仅仅存活了半年,它一心想回到长江,后来撞到保护区和长江之间的分离网上,无法逃脱,呛水而死。 Z后的搜寻 从1978年起,水生所前前后后进行过130多次大大小小的考察。diyi次野外考察,王丁就看到了白鳍豚,“当时看到白鳍豚并不困难,在白鳍豚经常出没的地方,几乎每次都能看到白鳍豚。”王丁给出的统计数据是,上世纪80年代初期,长江中下游尚有400多头白鳍豚,1986年约为300头,1990年不足200头,1995年不足100头。1997年11月,ZG农业部和水生所联合组织了一次大规模白鳍豚考察,动用渔政及其他考察船52艘,考察员300余人,分成22个考察组,每组负责50到100公里长的江段或湖区,基本保证每组对所负责水域一天能完成一次来回或单向考察。考察范围覆盖了长江口至宜昌约1700公里的长江干流江段、鄱阳湖和洞庭湖及其主要支流,共发现白鳍豚13头。随后两年,在采用同样方法但只考察部分主要江段的情况下,分别发现白鳍豚4头和5头。 时隔10年后,考察得到了Z为周全的设计。来了不少大名鼎鼎的国际鲸豚类专家,美国的罗伯特?皮特曼博士曾在野外观测过70多种鲸豚类动物,日本动物学家赤松友成带来了两套价格不菲的“水听器”,可以保证方圆300米内白鳍豚的声音毫无遗漏。“眼睛看,声音听,双管齐下。参与国家Z多、参与人员素质Z高、考察方法Z先进。”王克雄如此评价。 但失望来得更大。考察前,科学家们悲观预计白鳍豚的数量不超过50头。事后看来,这显然还是一个太过乐观的预测。王克雄说,出发前,国外科学家斗志昂扬,信心十足,而中方科学家则出言谨慎,各自心事重重,“我们对这片水域太了解了,心里都没底。我们从湖北一路往东走,一直没见到白鳍豚的身影,就鼓劲说还有好几个保护区;到铜陵已是倒数第二个保护区,仍没看到白鳍豚的踪影,大家还能互相鼓劲;等过了镇江,更失望了,大家都不说话了,我们只好鼓励说回去还有机会;可是直到汉江登陆,还是无缘一见白鳍豚。”王丁自称已经做好心理准备,但这一结果还是给他重重一击。“这么大规模的考察居然找不到白鳍豚。”另一个意外是:“江豚的数量也很少,有时候一天时间也看不到一头江豚。”江豚学名叫NeophocaenaPhocae-noides,属“鼠海豚”类。科考队Z后统计,长江江豚的数量仅有1200-1400头,和10年前相比,数量下降了一半。 长江环境严重恶化,已经不再适合白鳍豚生存了。经过鄱阳湖时,王克雄和同事数采沙船,数到1200时数不下去了。数据显示,在鄱阳湖口,Z繁忙时每半分钟就有一艘大型运输船进出。鉴于长江环境恶化,白鳍豚的“迁地保护”被ZG学者认为是拯救的Z后希望。此次考察的目的之一,就是希望找到白鳍豚之后,将它们送进保护区,希望以此增加它们的数量。“很多国外专家都曾反对‘迁地保护’,这次考察之后,他们同意了这一观点。”王克雄说,“但遗憾的是,已经找不到可以迁地保护的白鳍豚了。” “白鳍豚可能是历史上diyi个被人类消灭的鲸种。”考察结束后国外专家当场宣称。英国期刊《Biology Letters》发表“2006长江豚类考察”报告,原标题就是这句话,只是加了一个问号。王丁始终坚持“白鳍豚灭绝”的结论缺乏科学依据。“此次考察采用的双程截线抽样法虽然严密,但方法终归属于抽样,有遗漏的可能,仅凭一次考察不能简单定论白鳍豚已经灭绝??”王丁的另外一个依据是,根据国际自然保护联盟的定义,50年内没有在野外观测到任何个体才标志着一个物种灭绝。王丁工作的ZD将发生一些改变。他在发表于《自然杂志》的《拯救Z后的白鳍豚》一文中写道:建议将目前国家和地方的白鳍豚保护区全部更名为长江豚类保护区,以同时体现长江江豚保护的重要地位。“一定要立刻开始对江豚的保护,否则江豚也是下一个白鳍豚。”王丁说。
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- hou8444023 2008-10-23 00:00:00
- 白鳍豚“淇淇”于2002 年7 月去世后,ZG科学家再也找不到可以研究的对象了。白鳍豚于2500 万年前由太平洋迁徙至长江;1996 年,世界自然保护联盟将它列为极危动物。8 月8 日,英国《独立报》等报道,生存于长江的白鳍豚已经灭绝。近日有人声称在长江铜陵段拍摄到白鳍豚,专家认为这又是一起“疑似事件”。ZG水生动物研究专家王丁表示,白鳍豚确实已处于灭绝边缘,属“功能性灭绝”。 文/ 李琴 2006 年12 月13 日, 武汉长江边,小雨。“科考1 号”和“ZG渔政42003”两艘科考船缓缓靠岸,岸上是大批等消息的记者。 38 天前,这两艘480 马力的机船从武汉百威啤酒码头出发,开始了搜寻白鳍豚之旅。船上是来自ZG、瑞士、英国、美国、德国和日本等6 国的鲸豚类专家,他们曾见识过几十种鲸豚类动物,在这一领域颇有建树。出行前他们互相加油鼓气,信心满满。 记者们终于没有等到好消息。38天来,在近3400 公里的航程中,除了两次疑似白鳍豚的事件外,没有发现白鳍豚的踪迹。下船的时候,有人给因故提前返回武汉的科考队队员王克雄发了条消息:“结束了。” 大学毕业后直接进了ZG科学院水生生物研究所(下简称水生所)的王克雄和白鳍豚打了二十多年交道。看到短信,他几近泪下, “我意识到,我们可能真的要和白鳍豚说再见了。” 几个月后,这个坏消息以一种更为确定的方式从英国传来。8 月8 日,《独立报》、《卫报》和BBC 等媒体同时报道:ZG长江白鳍豚已经灭绝,认为这是diyi个由人类行为导致灭绝的鲸类动物。这一结论引自英国学会的同行评议期刊《Biology Letters》发表的“2006长江豚类考察”报告。之后,这次国际科考队的负责人、报告的责任作者、水生所副所长王丁纠正说:报告并未认定白鳍豚已经灭绝,但白鳍豚确实已处于灭绝边缘,属“功能性灭绝”。王丁在接受《外滩画报》采访时强调:“这也是中方科学家的观点。” 11 天后,“好消息”传来,一个安徽市民在历史上白鳍豚经常出没的长江铜陵段拍摄到白鳍豚。因为录像非常模糊,水生所在仔细研究后并没有得出肯定的答案。王克雄说,“这只能说是继2002 年5 月在该水域发现白鳍豚以后的又一起疑似事件。”9 月中旬,中科院水生生物研究所专家将前往铜陵,和铜陵淡水豚自然保护区联合搜寻白鳍豚。 淇淇之死 一切还得从淇淇说起。淇淇是一头雄性的白鳍豚。1980 年1月12 日,在洞庭湖口被渔民误捕时只有两岁。它的脖子上至死都有被大铁钩子钩上岸时留下的两个深深的大洞。离开长江后,淇淇住进了水生所为它建的一个大水池子里——后来这里被戏称为“白公馆”,成为世界上diyi头人工饲养的白鳍豚。美国动物保护学家亨利说:“我有幸成为看过淇淇的几个外国人之一。它为我们联系起一个正在消失的世界。” 淇淇来得恰逢其时。1978 年秋,水生所决定成立世界上diyi个白鳍豚的专门研究机构。“这算是一个政治任务。”王丁回忆。当时世界上有5 种淡水豚类,只有ZG的白鳍豚没有人研究,国外专家向ZG政府写信,提出到ZG来开展研究。邓小平当即表示:既然外国人这么积极,我们自己为什么不研究呢? 王丁当时在中科院物理研究所工作,水生所需要人做白鳍豚声学研究,被调了过来。“当时只有零星的资料,白鳍豚研究算得上是一片空白。” 王克雄说,有了淇淇,ZG在白鳍豚的饲养学、行为学、血液学和生物声学等诸多领域,产生了大批成果。1984 年,大学毕业的王克雄进入水生所工作,负责训练淇淇。“早期我们非常亲密,几乎大部分的时候都在一起,直到后来新的同事加入进来。” 白鳍豚怕人,初到白公馆时非常不安。后来工作人员给它带来了娱乐项目。它Z喜欢游泳圈和皮球,经常趴在救生圈上,或者钻过去,还用嘴巴将它们顶出水面。王克雄到的时候,淇淇已和工作人员熟悉,“我们一进馆里,它就会摇头摆尾地游近池壁,在你的脚下不动。” 淇淇已经长大,成了一个“帅小伙子”,每年的3 月到6 月发情期,它将身体直立于水中,一边摇晃脑袋,一边发出吱吱叫声,生殖器也伸出体外,贴着墙壁运动,样子非常兴奋。水生所开始为它寻找配偶。1986 年,水生所成功地捕捉到两头白鳍豚“珍珍”、“联联”。几个月后,联联因不适应人工环境死去,与淇淇配对的珍珍也在两年半后突然死亡,这一段姻缘Z终无果。之后水生所又开展了几次捕捞,但均以失败告终。直至2002 年7 月14 日去世,淇淇一直孤零零的。人工繁殖白鳍豚的梦想也因此破灭。 关于淇淇的身后事也有不同意见。一种认为淇淇已经是大家的朋友,按照ZG的传统习惯,应该把它完整地保存下来。另一种意见认为应该把它的内脏取出来研究。王克雄回忆说,淇淇的影响力太大,大家都想知道它的死因,Z后决定把淇淇的内脏取出来,根据研究工作的需要用超低温方式保存,大的器官放在里保存,身体做成了骨骼标本和皮革标本。 曾有人建议将恢复健康的淇淇放归长江,有人甚至将白公馆斥之为“监狱”。“如果了解ZG白鳍豚的研究历史,就不会如此评价了。”王克雄解释。当年好不容易可以做白鳍豚研究,却没有研究对象。研究人员找到了淇淇,理所当然地将它留了下来;又为它寻找配偶,想在人工条件下繁殖白鳍豚,但这一想法Z终未能如愿。水生所一直很矛盾,一方面想将淇淇放归自然,另一方面也希望能够捕到野生白鳍豚,再尝试一次,但一次次捕捞工作都以失败告终。此时的淇淇已经年老体衰,早已失去了野外生存的能力。 王丁说,淇淇的存活是一个奇迹。它曾屡次病重,但Z终都起死回生。1996 年,淇淇得了严重的肝坏死,有一个月它什么都不吃,工作人员买来大鱼,挑出鱼刺,把肉打成浆丸给它吃;去世前几年,它消化系统虚弱,工作人员每天抽干水,把它弄上来,替它注射生理盐水。相比之下,它的同伴就没那么幸运。除了珍珍和联联,1981 年水生所就曾在湖南省华阳县捕获一只雄性白鳍豚,取名“容容”。当时水生所没有取暖设备,这只瘦弱的白鳍豚在几个月后的一次寒流来袭时活活冻死。1995 年,在湖北石首天鹅洲白鳍豚自然保护区,唯yi一头放养的白鳍豚仅仅存活了半年,它一心想回到长江,后来撞到保护区和长江之间的分离网上,无法逃脱,呛水而死。 Z后的搜寻 从1978 年起,水生所前前后后进行过130 多次大大小小的考察。diyi次野外考察,王丁就看到了白鳍豚,“当时看到白鳍豚并不困难,在白鳍豚经常出没的地方,几乎每次都能看到白鳍豚。”王丁给出的统计数据是,上世纪80 年代初期,长江中下游尚有400 多头白鳍豚,1986 年约为300 头,1990年不足200 头,1995 年不足100 头。1997 年11月,ZG农业部和水生所联合组织了一次大规模白鳍豚考察,动用渔政及其他考察船52 艘,考察员300 余人,分成22 个考察组,每组负责50 到100 公里长的江段或湖区,基本保证每组对所负责水域一天能完成一次来回或单向考察。考察范围覆盖了长江口至宜昌约1700 公里的长江干流江段、鄱阳湖和洞庭湖及其主要支流,共发现白鳍豚13 头。随后两年,在采用同样方法但只考察部分主要江段的情况下,分别发现白鳍豚4 头和5 头。 时隔10 年后,考察得到了Z为周全的设计。来了不少大名鼎鼎的国际鲸豚类专家,美国的罗伯特?皮特曼博士曾在野外观测过70 多种鲸豚类动物,日本动物学家赤松友成带来了两套价格不菲的“水听器”,可以保证方圆300米内白鳍豚的声音毫无遗漏。“眼睛看,声音听,双管齐下。参与国家Z多、参与人员素质Z高、考察方法Z先进。”王克雄如此评价。 但失望来得更大。考察前,科学家们悲观预计白鳍豚的数量不超过50 头。事后看来,这显然还是一个太过乐观的预测。王克雄说,出发前,国外科学家斗志昂扬,信心十足,而中方科学家则出言谨慎,各自心事重重,“我们对这片水域太了解了,心里都没底。我们从湖北一路往东走,一直没见到白鳍豚的身影,就鼓劲说还有好几个保护区;到铜陵已是倒数第二个保护区,仍没看到白鳍豚的踪影,大家还能互相鼓劲;等过了镇江,更失望了,大家都不说话了,我们只好鼓励说回去还有机会;可是直到汉江登陆,还是无缘一见白鳍豚。”王丁自称已经做好心理准备,但这一结果还是给他重重一击。“这么大规模的考察居然找不到白鳍豚。”另一个意外是:“江豚的数量也很少,有时候一天时间也看不到一头江豚。” 江豚学名叫NeophocaenaPhocae-noides,属“鼠海豚”类。科考队Z后统计,长江江豚的数量仅有1200-1400 头,和10 年前相比,数量下降了一半。 长江环境严重恶化,已经不再适合白鳍豚生存了。经过鄱阳湖时,王克雄和同事数采沙船,数到1200 时数不下去了。数据显示,在鄱阳湖口,Z繁忙时每半分钟就有一艘大型运输船进出。鉴于长江环境恶化,白鳍豚的“迁地保护”被ZG学者认为是拯救的Z后希望。此次考察的目的之一,就是希望找到白鳍豚之后,将它们送进保护区,希望以此增加它们的数量。“很多国外专家都曾反对‘迁地保护’,这次考察之后,他们同意了这一观点。”王克雄说,“但遗憾的是,已经找不到可以迁地保护的白鳍豚了。” “白鳍豚可能是历史上diyi个被人类消灭的鲸种。”考察结束后国外专家当场宣称。英国期刊《Biology Letters》发表“2006 长江豚类考察”报告,原标题就是这句话,只是加了一个问号。王丁始终坚持“白鳍豚灭绝”的结论缺乏科学依据。“此次考察采用的双程截线抽样法虽然严密,但方法终归属于抽样,有遗漏的可能,仅凭一次考察不能简单定论白鳍豚已经灭绝??”王丁的另外一个依据是,根据国际自然保护联盟的定义,50 年内没有在野外观测到任何个体才标志着一个物种灭绝。王丁工作的ZD将发生一些改变。他在发表于《自然杂志》的《拯救Z后的白鳍豚》一文中写道:建议将目前国家和地方的白鳍豚保护区全部更名为长江豚类保护区,以同时体现长江江豚保护的重要地位。“一定要立刻开始对江豚的保护,否则江豚也是下一个白鳍豚。”王丁说。
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- 关于白鳍豚
- 到目前为止,白鳍豚已经灭绝了吗?... 到目前为止,白鳍豚已经灭绝了吗? 展开
- ELISA免疫测定,您真的掌握透彻了吗?
ELISA免疫测定,您真的掌握透彻了吗?
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。ELISA免疫测定,您真的掌握透彻了吗?不要着急,接着往下看!
ELISA免疫测定目的是?
1.测定体液中的各种蛋白质,包括含量极少的蛋白质如甲胎蛋白等;
2.测定激素,包括小分子量的甾体激素等;
3.测定抗生素和药物;
4.测定病原体抗原,HBsAg、HBeAg等;
5.利用纯化的抗原检测标本中的抗体,例如抗-HBs等;
ELISA免疫测定原理:
①使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标 抗原(或抗体),而且此酶标抗原(或抗体)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③测定时将受检标本(抗体或抗原)和酶标抗原(或 抗体)按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应,再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,zui后结合 在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例;再加入酶反应底物后,底物被酶催化后变为有色产物,根据其颜色反应的 深浅进行定性或定量分析,以了解被测标本中抗体或抗原含量。
ELISA免疫测定步骤:
1.包被;
2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔);
3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟;
5.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml;
6.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm处,以空白对照孔调零后测各孔OD值。
注意:引起ELISA测定错误结果的原因有标本因素、试剂因素、操作因素。如果您在操作中遇到任何不明白的,不妨来电详询本公司业务员,我们将为您免费安排技术指导服务(代测、培训、委托加工、定制等)。上海恒远生物将与广大科研工作者一起交流科研问题,共同提高,让您成为真正的科研能手。
ELISA免疫测定,您真的掌握透彻了吗?先和大家介绍到这,如果想要了解更多胎牛血清信息,可以关注天津本生生物,专业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材,欢迎广大客户来询。
- 旷场实验经常做,你真的了解透了吗?
实验背景
旷场实验(open field test,OFT)又称敞箱实验,是评价实验动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。Hall于1934年首先提出用旷场实验研究大鼠的情绪变化,经过不断的发展和完善,目前旷场实验主要用来观察实验动物的自主运动能力、对新异环境的探索行为、紧张度、躁狂、焦虑以及抑郁行为,由于其操作简单、可行性高、数据记录准确等特点,已成为研究动物精神领域较为流行的行为学测试方法。
实验装置
整套旷场实验系统由旷场箱体、摄像系统和视频记录分析软件共同构成。旷场箱体的围栏形状可以是正方形、长方形或圆形,市面上正方形的箱体居多。以正方形旷场为例,旷场箱体分为大鼠(100×100×50 cm3)和小鼠(40×40×40 cm3)两种规格,灰色有机玻璃的材质(灰色不反光,且可用于黑鼠和白鼠的实验)。实验时将动物放入旷场中的特定位置,用摄像系统来监测动物在旷场中的活动情况,通过视频记录分析软件来进行动物的轨迹追踪和数据采集分析。
实验流程
一、前期准备
1. 摆置好干净的旷场箱体(为了提高实验效率,可对称放置4个旷场,同时进行实验);
2. 在箱体正上方放置好摄像支架,连接相机至电脑,在电脑上调整相机的拍摄角度和焦距等参数,再固定相机位置(后续实验建议不要动旷场和支架的位置,否则需要重新调整焦距等参数);
3.打开电脑中的行为学视频记录分析软件,编辑好实验信息和动物信息等,调整好软件记录的相关参数(也可先用摄像系统将实验视频录制好,后续再导入到视频记录分析软件中分析)。
二、放置动物并记录
1. 将动物从饲养笼里取出,背向实验者放置到旷场的中央区域,实验者迅速离开;
2. 迅速开启软件的视频采集或摄像系统的视频录制,记录动物在旷场中5-10min的活动情况;(也可提前开启软件采集,再放置动物,软件分析过程中可设置扣除前期的准备时间)
3. 实验监测时间结束后将小鼠取出并且放回饲养笼内,用75%酒精或实验用消毒水清理整个旷场箱体,等待晾干后更换小鼠继续重复以上实验。
三、记录参数和指标分析
旷场实验既可用于观察实验动物的自主运动能力,也可评估动物的焦虑等情绪行为。
当旷场实验用于评估动物的自主运动能力时,主要观察动物静止(低于100 cm/s)、缓慢运动(100~300 cm/s)和快速运动(300~500 cm/s)三种运动状态所占据的绝对时间和时间比,通过比较这三种状态的时间,得出动物运动能力的差异。此外也可通过比较动物的平均速度、轨迹线和总运动距离等反应动物的活动能力。
当旷场实验用于评估动物焦虑行为时,主要记录动物在旷场中不同区域所待的时间及尿便次数、直立次数等行为。通常来说,小鼠因为趋触性(thigmotaxis)喜欢紧贴墙壁,即更多的在外围活动,这在有焦虑样行为的小鼠中更为明显:焦虑程度较低的小鼠倾向于在旷场的中央即开放区域停留更多的时间。此外还有如下几种结果参数:
直立次数:又称垂直得分、站立次数,指鼠一对前足均腾空或攀附箱壁,站立后双爪放下为直立一次。直立次数反映鼠的探索行为及对新环境的好奇程度。
排便次数:又称粪便粒数,反映动物对陌生环境的紧张和恐惧程度。人们普遍认为排便次数反映啮齿类动物的焦虑程度。
修饰次数:又称理毛次数,指鼠对面部、四肢、躯干和生殖器的清洗行为。鼠的修饰次数是对新异环境产生的应激行为,说明此时鼠兴奋度较高。
注意事项
1. 小鼠相关因素:实验前动物饲养环境、动物性别、背景、是否伴随应激(饮水及食物剥夺)及昼夜节律等。实验中小鼠的周龄和性别需要保持一致,比如雌鼠有动情周期,激素水平可能会影响行为。
2. 实验装置相关因素:旷场的形状、体积、实验持续时长、数据采集方式(摄像系统的类别)等,均可能影响实验和软件的检测效果,因此需尽量保持统一。
3. 实验者相关因素:注意实验者与动物之间的适应,同一批实验由同一实验者操作,使用同样的方式抓取小鼠,手势轻柔。
温馨提示
在行为学测试中通常是多种实验方法综合分析评估动物的某一个行为变化,因此在安排不同行为学实验时,要注意实验之间的相互影响。由于旷场实验对小鼠各方面影响较小,可优先安排动物进行旷场实验。
瑞沃德行为学整体解决方案
目前瑞沃德提供完整的行为学解决方案,涵盖学习记忆、饮水摄食、疼痛、社交、情绪、奖赏成瘾等多个研究方向,可帮助研究人员更快开展整体水平探究疾病发病机制的研究,为基金申请提供坚实硬件平台;标准化体系化行为学实验室布局方案,助力实验室建设,可为工作人员创造安全、舒适、高效的实验室环境。
【参考文献】
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[5]董瑞, 毕燕琳, 王明山. 旷场实验在鼠行为学研究中的应用[J]. 国际麻醉学与复苏杂志, 2020, 41(5):6.
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关于针式过滤膜
针式过滤器由刻度针管,滤头组成,其中滤头包含不同特性的滤膜,可根据实验需求,选择不同性能的滤膜。
(2)、选择针式过滤器考虑因素
1、考虑有效过滤面积(EFA)
流体中的微粒会影响过滤器的使用寿命,当颗粒被过滤器移除时,他们也阻塞了空隙,减少了过滤器中的可用部分。相比“干净”的流体,负载微粒的流体更加容易堵塞过滤器,增加EFA(有效过滤面积)可以延长过滤器使用寿命。
2、考虑孔径大小
根据分析仪器选择合适的孔隙大小。UV/V分光光度计可能只需要1um的过滤;HPLC分析可能需要0.45um的过滤,UHPLC将需要0.2um的过滤,由于体积,填料和间隙的大小,过滤材料的孔隙大小取决于最小粒子直径。这些粒子将被额定孔径的过滤器有效的拦截。(3)几种常见的过滤膜特性及应用
1.水系膜(混合纤维素酯CN-CA)
特性:孔径均勻,孔隙率高,无介质脱落,质地薄,阻力小,滤速快,成本低,但不耐有机溶液及强酸强碱。
应用:饮用水、地表水、井水等,除菌过滤,溶液中微粒及油类不溶物的分析,水质污染指数测定,气体、油类、饮料、酒等微粒和细菌过滤。为样品前处理过滤中最为广泛使用的滤膜之一。
2.尼龙膜(聚酰胺 NYLON)
特性:耐温性能好,可耐121°C,饱和蒸汽高压消毒30分钟,最GAO工作温度60°C,化学稳定性好,能耐稀酸稀碱等多种有机无机化合物、溶剂。
应用:适用于电子、微电子、半导体工业水过滤,组织培养基、药液、饮料、高纯化学品、水及有机溶液流动相的过滤。
3.PVDF膜(聚偏氟乙烯)
特性:膜机械强度高,抗张强度好,具有良好的耐热性及化学稳定性,蛋白吸附极低,具较强的疏水性。
应用:气体及蒸汽过滤,高温液体过滤,组织培养基,添加剂等除JUN过滤,溶剂和化学原料净化过滤。
4.PTFE(聚四氟乙烯)
特性:具有广泛的化学兼容性,耐温性好,抗强酸强碱,化学腐蚀性较强的溶剂及氧化剂。
应用:化工、医药、环保、电子、食品、能源等领域,几乎能过滤所有的有机溶液。
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