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GUV:囊泡的多种应用

囊泡是由脂双层卷成的球型泡封闭少量水并将其与囊泡外的水分开。 由于与细胞膜基本相似，囊泡已广泛用于研究脂质双分子层的性质。 如此频繁使用囊泡的另一个原因是它们相对容易制造。 脱水脂质样品暴露于水中会自发形成囊泡。 这些初始囊泡通常是多层的（多壁的）并且尺寸范围从几十纳米到几微米。

需要进一步的方法将这些初始囊泡破碎成均匀直径的较小的单壁囊泡，成为直径为50nm至200nm的小单层囊泡（SUVs）。 由于人造SUV可以大量生产，因此它们适用于散状材料研究，例如X射线衍射，以确定晶格间距，差分扫描量热法以及相变。 双极化干涉测量法可以以无标记测定形式测量单层和多层结构以及囊泡的插入和破坏。 还可以用荧光染料标记囊泡，以允许基于FRET的灵敏融合测定。

尽管有这种荧光标记，但由于它们非常小，因此通常很难对SUV进行详细的成像。 为了解决这个问题，研究人员开发出了巨大的单层囊泡（GUV）。 GUV足够大（几十微米），可以用传统的荧光显微镜研究。 由于这个原因，研究人工脂质体中的脂筏常用GUV进行。 与有支撑的的双层结构相比，GUV呈现更“自然”的环境，因为周围没有固体表面导致的缺陷或使蛋白质变性。

Nanion的巨型单层囊泡制备设备

   The Vesicle Prep Pro 是一款通过电膨化制备GUV的设备。

GUV可以在以下设备中应用:

   Port-a-Patch: 脂双层记录

   SURFE²R: 基于SSM的电生理

   SURFE²R: 基于SSM的电生理

背景：埃博拉病毒（EBOV）主要攻击骨 髓细胞，其致命感染会引起大量的T细胞死亡。研究已证明，受感染细胞所产生的外泌体中包含的埃博拉病毒蛋白VP40导致了受体免疫细胞的死亡。

方法：通过克隆技术表达VP40，研究者分析了供体细胞循环、细胞外囊泡的生物发生过程和受体免疫细胞的死亡。通过激酶和染色质免疫沉淀实验，研究者研究了细胞周期蛋白D1的转录和VP40的核定位。通过质谱、细胞因子和蛋白质免疫印迹实验，研究者检测了细胞外囊泡的内含物。野生型埃博拉病毒感染实验在生物安全等级为4级的实验室平台进行。

EVs size and concentration by Zetaview

结果：含有VP40的细胞外囊泡诱导了受体T细胞和单核细胞的凋亡。细胞周期蛋白D1的表达水平上调，导致了表达VP40的克隆加速生长，而核内的VP40蛋白会结合到细胞周期蛋白D1的启动子上。细胞循环被加快，会影响细胞外囊泡的生物发生过程，Z终产生了数量较少、但粒径更大的细胞外囊泡。含有VP40的细胞外囊泡的内含物富含能结合核糖核酸的蛋白和细胞因子（白细胞介素-15、转化生长因子-β1和干扰素-γ）。Z终，受埃博拉病毒感染的细胞及其细胞外囊泡中包含了VP40、核蛋白质和糖蛋白。

结论：细胞核内的VP40上调了细胞周期蛋白D1的表达水平，导致异常的细胞周期和异常的细胞外囊泡生物发生过程。被埃博拉病毒感染的细胞所产生的细胞外囊泡中包含的细胞因子和埃博拉病毒蛋白引起了免疫细胞的大量死亡。

Michelle L. Pleet, et al. Ebola Virus VP40 Modulates Cell Cycle and Biogenesis of Extracellular Vesicles, The Journal of Infectious Disease, 2018:218 (Suppl 5) • S365

来自德国Particle Metrix ZetaView所具备的单一颗粒跟踪技术，结合经典微电泳技术和布朗运动成为现代的分析手段。

主要应用于外泌体，细胞囊泡，脂质体，蛋白质聚集，病毒样品，纳米气泡等研究领域。

样品浓度范围：105-109粒子/ml（粒度）

大昌华嘉科学仪器部一直关注新型冠状病毒疫情，积极探索相关研究报告，diyi时间发给大家参考。