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- kkw喵 2018-05-28 00:00:00
- EI(电子轰击) CI(化学电离) FAB(快原子轰击) 解析电离 DI 喷雾电离 SI
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- Taq酶你选对了吗?
导读
目前国内市场上销售的热启动Taq酶的品牌很多,但真正高质量的热启动Taq酶并不多,面对这么多的热启动Taq酶产品,我们应如何选择?
首先,选择扩增效率高的热启动Taq酶
耐受性好的Taq酶反应体系经优化后,扩增效率在95%以上,即使是在目标基因含量较低时也能够获得满意的扩增,在模板量较高时,也不易中毒,指数扩增期较长。耐受性能较差的Taq酶,即使反应体系经多次优化,扩增效率仍达不到90%,扩增曲线“S”型不明显,斜率较小,曲线低平。模板量较低时扩增不出来,较高时扩增效果也不理想。所以PCR扩增效率与Taq酶的性能密切相关,选择高扩增效率的DNA聚合酶对PCR、qPCR能否成功至关重要。
其次,选择酶动力强的热启动Taq酶
Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强,PCR扩增的指数增长期越长,‘S型’曲线更加典型,荧光信号值更高,而且更适合做多重PCR检测。酶动力弱的品牌DNA聚合酶一般只能支持2重反应,在做3重反应时,扩增曲线低矮,荧光信号值较低,无典型扩增曲线,结果很难判定。
zuihou,选择灵敏度高的热启动Taq酶
一般说,DNA聚合酶的扩增效率高,灵敏度就高,但也有不一致的情况。如果要扩增的样本目标基因丰度较低,建议对Taq酶的扩增灵敏度进行检测。
Taq酶的扩增灵敏度进行检测,常见的检测方法是将目标基因质粒片段进行10倍或5倍梯度稀释,在较低的几个稀释度进行PCR检测,选择检测灵敏度较高的热启动Taq酶。
由此可见,研究者需根据自己的实验要求和经费情况进行选择,做一个梯度稀释扩增实验,以检测热启动Taq酶的扩增效率和灵敏度。
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- 隔膜真空泵你选对了吗?
作为实验室常用仪器,各种隔膜真空泵大同小异,要选一款符合实际所需的隔膜真空泵,购买前应多做功课。您需要了解这些情况:
1.隔膜真空泵的性能指标
隔膜真空泵的主要指标有两个:极限抽气速率和极限压力(也称Jue对真空度),极限抽气速率的大小可以判定,其所能应用的被抽气装置的容量大小,极限压力决定了隔膜真空泵所能达到的极限Jue对真空度. ( 注:Jue对真空度与表压真空度有对应关系,但Jue对真空度不会因为地理位置的改变,大气压力的改变而发生变化,而表压真空度则充满不确定性.建议使用Jue对真空度压力显示.)
2.耐腐蚀性能
优秀的隔膜真空泵可应用在大多数实验场景,拥有优秀的耐腐蚀性能.不管是隔膜/阀片/管路等与气体接触部分,都做了特殊处理。
3.连续运行性能稳定
多数的隔膜真空泵在连续运行后,发热严重,没有配置散热装置,同时真空度波动较大。
郑州博汇精密科技有限公司生产的DP系列隔膜真空泵可长时间运行,性能稳定,具有高度的耐腐蚀性能。
推出的隔膜真空泵DP-630G,压力显示采用数显表,显示隔膜真空泵的jue对真空度和当前大气压值,方便用户做数据记录。
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