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细胞超声破碎293细胞 怎么判断破碎完全

Light灯光 2018-12-09 07:17:23 290  浏览
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细胞超声破碎293细胞 怎么判断破碎完全
 
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超声波细胞破碎机破碎氧化体粉末解决团聚可行性报告

 1.目的:拟测试超声波细胞破碎机破碎的效果。
  
  2.测试对象:小美超声波细胞破碎机,型号为XM-1000T。
  
  3.测试方法:测试功率为40%,超声时间为15min。溶液配比:5wt.%的六偏磷酸钠溶液20ml+40ml纯水或纯水60ml。测试粉末质量为0.5g。为减少液体温度过高,超声过程烧杯浸在大约200ml的水中,烧杯外的水面与烧杯内水面接近。粒度测试所用激光粒度仪为马尔文3000,测试方法为湿法,采用溶剂为水。
  
  4.测试内容:铁氧体粉末通过该仪器分散后进行粒度检测,如果多次测量平均粒度结果稳定在50nm则表示效果正常。
  
  5.测试结果。
  
  5.1未用破碎仪的测试结果
  
  根据图1和表1,未用破碎仪的平均粒径的平均值为1.55μm。并且8次测试结果很稳定,具有检测稳定。未加入表面活性剂的粉末具有很强的团聚倾向,存在超声后粉末立即重新团聚。
  


  图1. 未用破碎的粒径分布图

  表1. 未用破碎的粒径统计结果
  
  5.2加用破碎仪破碎测试结果
  
  根据图2和表2。加用超声破碎仪破碎的粉末的平均粒径的平均值为62.3nm,远远小于第一次没用破碎的粒径。统计结果较稳定,但是图2中的粒径分布出现双峰。粉末实际分布就是如此,但是统一值为二分之一峰面积对应的粒径。
  


  图2. 破碎后的粒径分布图
  


  表2. 破碎后的粒径统计结果
  
  5.3结果分析
  
  未超声得到的平均粒径为1.5μm,而加入超声得到的粉末平均粒径为63nm。首先结果值已经达到目的要求。此外,两个相差巨大的结果值也说明超声具有非常显著的超声效果。
  
  6. 结论。
  
  该超声细胞破碎机测试结果达标,可以投入使用
  
  7.超声波细胞破碎机实物图:


2022-04-29 17:33:55 181 0
净信冷冻研磨仪|破碎胃癌细胞提蛋白做WB

WB,蛋白质印迹(Western blotting)又称免疫印迹(immunoblotting),是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。通过抗原抗体反应对目标蛋白的表达进行半定量检测,还可用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后续分析。WB作为一种方便可靠的研究工具,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面,将与质谱和蛋白质芯片等技术一起在蛋白质组时代发挥重要作用。

目前科研人的 WB 现状就是干货都懂,实验状况却频出。辛辛苦苦花时间制备的细胞却遇到提取液检测不到目的蛋白、目的蛋白信号弱 、转膜效率低 、显色或曝光后无条带 、Western blot背景高且不均匀、非特异性条带、条带拖尾或变形等常见的问题。众所周知,有效的样品制备是影响 WB 实验可重复性的重要因素。贵州医科大学分子ZD实验室就使用上海净信冷冻研磨仪制备了人体胃癌细胞样品提取蛋白做WB实验。

实验样品:人体胃癌细胞;

实验器材:冷冻研磨仪JXFSTPRP-CLN、研磨管、氧化锆珠若干;

实验步骤:

1.细胞沉淀,加缓冲液,提取液,离心重悬;

2.加入氧化锆珠,与细胞沉淀物的比例1:1;

3.设置研磨参数,启动。

实验效果图:

研磨前(未加研磨珠-加研磨珠-研磨后)

附:实验仪器图片净信冷冻研磨仪JXFSTPRP-CLN

上海净信JXFSTPRP-CLN冷冻研磨仪是一种快速、GX、制冷的研磨系

统。它能在非常短的时间内将土壤、植物和动物的组织/器官、细菌、酵母、真

菌、孢子、古生物标本等样品完成研磨、粉碎、混合机细胞破壁。广泛应用于生命科学、医药、生化、环境、地质、农业、林业、质检、材料等领域。

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