提取人外周血白细胞基因组dna时注意哪些步骤才能得到高质量基因组dna

1516003 2018-11-16 19:06:23 329 浏览

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提取植物基因组DNA，DNA是绿色的: 我用的是CTAB法提取植物基因组DNA，方法如下：1.称取材料0.2g，加入适量PVP，500µl冰冷CTAB，20µl冰冷RNA酶研磨；2.研磨后加入500µl加热的CTAB，装入1.5ml离心管中... 我用的是CTAB法提取植物基因组DNA，方法如下： 1.称取材料0.2g，加入适量PVP，500µl冰冷CTAB，20µl冰冷RNA酶研磨； 2.研磨后加入500µl加热的CTAB，装入1.5ml离心管中； 3.充分混匀后，65℃水浴1h，期间不时轻缓震荡； 4.12000rpm离心10min，取750µl上清液至另一离心管中； 5.加入等体积的Tris饱和酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），摇匀后12000rpm、离心10min； 6.取上层清液650μl，加入等体积氯仿·异戊醇（24:1），摇匀后12000rpm离心10min； 7.取550µl上清液至另一离心管中，加入等体积异丙醇； 10.-20℃放置1h或室温下过夜； 11.12000rpm离心10min，倒弃上清液；70%冰冷乙醇洗涤沉淀2次； 12.倒弃上清液，风干沉淀； 14.加100µlTE溶解DNA，-20℃保存备用。可是不知道为什么Z后异丙醇沉淀出来的DNA居然是深绿色的，已经接近黑色了。有的时候同样的步骤做出来的又是白色或者黄色的，这到底是怎么回事啊！希望知道的人给我个提示！会不会是因为和氯仿-异戊醇反应的时间过长？因为我发现我剩下的那些材料过一段时间后都变得很绿。展开

人基因组DNA模板，PCR时条件怎么设置？: 我需要做重叠PCCR模板是基因组DNA，但没有这方面的经验，需要同道人士帮忙，多谢！... 我需要做重叠PCCR模板是基因组DNA，但没有这方面的经验，需要同道人士帮忙，多谢！展开

生物化学实验：人外周血白细胞DNA的提取中的问题。: 问题在于就是在加完平衡酚和氯仿/异戊醇之后进行5000转/分离心之后，理论上本来是上层是上清液，下层是有机溶剂，但是我的实验结果却反过来了，变成上层是有机溶剂，下层是清液。问题... 问题在于就是在加完平衡酚和氯仿/异戊醇之后进行5000转/分离心之后，理论上本来是上层是上清液，下层是有机溶剂，但是我的实验结果却反过来了，变成上层是有机溶剂，下层是清液。问题出在哪？求助大家，尤其是了解生物化学实验的朋友。展开

提取的基因组DNA为何很粘稠: 我用invitrogen的DNAzol reagent 提取的genomic DNA，产率很高，OD260/280也在正常范围，可是OD260/230却只有1，而且很粘稠，导致跑胶的时候都不能均匀地分布在孔里。请问以上是什么原因?

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