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- 一只小鸟5711 2016-11-05 00:00:00
- 是标签的意思。 一般在蛋白表达的时候,为了便于蛋白的纯化,会在蛋白多肽的一段连接一些可以和其他物质结合的片段,通过这些片段纯化后再将这些片段切除。 金属螯合亲合层析,又称固定化金属离子亲合层析(Immobilized metal ion affinity chromatography, IMAC),是近30年发展起来的一种新型分离技术。Z早由Paroth等人提出。该方法利用蛋白质表面的一些氨基酸,如组氨酸、色氨酸、半胱氨酸等能和金属离子发生特殊的相互作用的原理,从而对蛋白质加以分离。这些作用包括配价键结合、静电吸附、共价键结合,其中以配价键结合为主,而且这其中又以6组氨酸标签(His-Tag)应用Z为广泛。 以His-Tag纯化标签结合金属螯合亲合层析,为重组蛋白质的分离纯化提供了一个有力的工具。由于金属螯合亲合层析具有配体简单、吸附量大、分离条件温和、通用性强等特点,上样条件可选择范围广,在高盐、一定浓度的变性剂以及去垢剂的条件下,带6His纯化标签的蛋白质都可以和亲合填料特异性结合,逐渐成为分离纯化蛋白质等生物工程产品Z有效的技术之一。 此外还有 myc, flag, gfp, HA等等许多种标签(tag)。
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