质粒提取实验中，RNA酶一般处理多久啊？？

伍佰你第一 2010-12-17 01:52:48 635 浏览

我想请教一下我现在要提取高浓度高纯度的质粒，用的是酚氯仿抽提的方法，为了出去蛋白质和RNA的影响我加完溶液1、2、3以后离心取上清，直接加了RNA酶，再用酚氯仿抽提，而且去了两次蛋... 我想请教一下我现在要提取高浓度高纯度的质粒，用的是酚氯仿抽提的方法，为了出去蛋白质和RNA的影响我加完溶液1、2、3以后离心取上清，直接加了RNA酶，再用酚氯仿抽提，而且去了两次蛋白，Z后SDS凝胶电泳还是很淡- - 而且下面的RNA带很亮很亮希望有好心人帮帮我~~~谢谢各位~~~~~ PS：有什么好一点的生物论坛可以推荐一下么？？？展开

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ouyangting8829 2010-12-18 00:00:00

RNase A？加进去后室温放10分钟差不多了，溶液1里面有EDTA，不用太担心DNA酶切断gDNA。我用的质粒提取试剂盒是把RNase A加在溶液1里面的，正常耗时做下来RNA条带几乎看不到。你为什么用SDS凝胶跑质粒？

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lqqqianqi 2010-12-18 00:00:00

我们是沉淀溶于 TER（TE含RNase A 20 μg/ml），37℃水浴30min。

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jmbmbmbmbm 2010-12-27 00:00:00

我们也是用TE，效果很好。不过加RNA酶也应该没有问题你的条带极有可能是污染了，你跑电泳是否把电泳槽清洗过

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