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- Smt丶泪小轩 2017-09-03 00:00:00
- 常见的全自动生化分析仪检测方法有:终点法、动力学法、免疫比浊法、固定时间法、双试剂法等,具体是什么意思呢?下面我们来做简单介绍,不求深入研究,只求有所了解和区别。 终点法:在反应到达终点,即在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时,选择一个终点吸光度值,用于计算结果。结果计算公式:待测物浓度CU=(待测吸光度AU-试剂空白吸光度AB)×K。 K为校准系数。 动力学法(即连续监测法,速率法) :又称速率法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期(各两点间吸光度差值相等)的吸光度值,并以此线性期的单位吸光度变化值计算结果。 免疫比浊法:当光线通过一个浑浊介质溶液时,由于溶液中存在混浊颗粒,光线被吸收一部分,吸收的多少与混浊颗粒的量成正比,这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。 固定时间法(两点法):指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点,此两点既非反应初始吸光度亦非终点吸光度,这两点的吸光度差值用于结果计算,有时也称此法为两点法。 计算公式为:CU=(A2-A1)×K。 双试剂法: 液体单试剂:将某种生化检验项目所用到的试剂科学地混合在一起,组合成一种试剂。应用时只需将检测标本和试剂按照一定比例混合,即可进行相应的生化反应,然后再采用适当方法检测结果。 液体双试剂:将某些生化检测项目所用到的试剂,按照用途科学地分成两类,分别配成两种试剂。通常diyi种试剂加入后,可起到全部或部分消除某些内源干扰的作用。第二试剂为启动被检测物质反应的试剂。两种试剂混合后才共同完成被检测项目的生化反应,然后用适当方法检测结果。 单试剂存在抗干扰能力差的特点,会带来分析误差。而双试剂准确性较高,消除了样品的内源性干扰,在终点法测试中,能消除样品空白(脂浊、溶血、黄疸等干扰物质)、比色杯等因素的影响,提高了测定的准确性,并且试剂稳定:试剂1(R1)、试剂2(R2)分开保存,提高了试剂的稳定性。
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中压制备色谱仪是一种在化学、生物制药等领域中广泛应用的分离设备,主要用于从混合物中高效分离和纯化目标物质。为了确保分离过程的准确性与效率,检测仪器在色谱系统中起到了关键作用。本文将深入分析在中压制备色谱仪中常用的检测仪器类型及其适用场景,帮助用户选择合适的检测方案,从而优化实验结果。
一、紫外-可见光检测器(UV-Vis)
紫外-可见光检测器是中压制备色谱系统中常见的检测器之一,特别适用于检测具有紫外吸收特性的化合物,如芳香族化合物或含共轭双键的分子。UV-Vis检测器不仅灵敏度高,而且结构简单,易于操作。它通常支持多波长检测,能够在制备过程中实时监控不同化合物的分离情况。用户可以通过选择特定波长,针对目标物质实现高效分离。
二、示差折光检测器(RID)
对于没有明显紫外吸收特性的化合物,如糖类、多糖及某些脂质,示差折光检测器(RID)是理想选择。RID通过检测样品和流动相的折光指数差异实现检测。这种检测器虽然灵敏度相对UV-Vis较低,但在非吸光性化合物的分析中表现出色。其应用领域包括食品分析及多糖纯化过程。由于RID对流动相成分的变化较为敏感。
三、蒸发光散射检测器(ELSD)
蒸发光散射检测器(ELSD)适用于检测难以用UV-Vis和RID监测的化合物,如脂类、聚合物和部分碳水化合物。其工作原理是将样品中的流动相蒸发,然后通过光散射检测样品残留的非挥发性物质。ELSD具备较宽的检测范围,且对大多数化合物表现出良好的通用性,因此在天然产物的分离和药物分析领域中应用广泛。不过,ELSD的操作要求较高,需优化气流、温度等参数才能获得理想的检测效果。
四、质谱检测器(MS)
质谱检测器(MS)是一种灵敏度极高的检测工具,能够提供目标分子的分子量及结构信息。在复杂样品的分离过程中,MS可结合色谱仪用于追踪目标化合物并进行定性和定量分析。虽然MS的操作较为复杂,且需要专业人员维护,但其强大的检测能力使其在高端制药和科学研究领域中得到了广泛使用。质谱检测器还可用于鉴定未知物质,在分离纯化中的应用前景十分广阔。
五、荧光检测器(FLD)
荧光检测器(FLD)利用荧光分子在特定波长下发射荧光信号的特性进行检测。这类检测器的灵敏度极高,适用于检测微量且具有荧光特性的化合物,如多环芳烃或蛋白质标记物。FLD检测范围的限制较大,但在环境监测、食品分析及生物制药领域中,对于某些特殊化合物的检测不可或缺。
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