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- 可爱的好事 2016-06-03 00:00:00
- CTAB快速提DNA法： 取植物材料少量，可用液氮冷冻，没有的话不冻也可以，材料粉碎后快速加入CTAB 100微升，65度3-5min，加入相同体积的酚氯仿，混匀，12000转10分钟，取上清至另一管中(注意，一定不要带入酚氯仿，否则残留的酚会使TAQ酶失活而导致PCR结果假阴性)，加入十分之一体积的醋酸钠，再加入两倍体积的无水乙醇，冰上沉淀10分钟，离心，去上清，晾干或DNA干燥仪干燥，加入水10-20微升，取1-3微升做PCR.
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- 我用的是CTAB法提取植物基因组DNA，方法如下：1.称取材料0.2g，加入适量PVP，500µl冰冷CTAB，20µl冰冷RNA酶研磨；2.研磨后加入500µl加热的CTAB，装入1.5ml离心管中... 我用的是CTAB法提取植物基因组DNA，方法如下： 1.称取材料0.2g，加入适量PVP，500µl冰冷CTAB，20µl冰冷RNA酶研磨； 2.研磨后加入500µl加热的CTAB，装入1.5ml离心管中； 3.充分混匀后，65℃水浴1h，期间不时轻缓震荡； 4.12000rpm离心10min，取750µl上清液至另一离心管中； 5.加入等体积的Tris饱和酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），摇匀后12000rpm、离心10min； 6.取上层清液650μl，加入等体积氯仿·异戊醇（24:1），摇匀后12000rpm离心10min； 7.取550µl上清液至另一离心管中，加入等体积异丙醇； 10.-20℃放置1h或室温下过夜； 11.12000rpm离心10min，倒弃上清液；70%冰冷乙醇洗涤沉淀2次； 12.倒弃上清液，风干沉淀； 14.加100µlTE溶解DNA，-20℃保存备用。 可是不知道为什么Z后异丙醇沉淀出来的DNA居然是深绿色的，已经接近黑色了。有的时候同样的步骤做出来的又是白色或者黄色的，这到底是怎么回事啊！希望知道的人给我个提示！ 会不会是因为和氯仿-异戊醇反应的时间过长？因为我发现我剩下的那些材料过一段时间后都变得很绿。 展开
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