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　　ELISA实验之洗涤要点!

　　洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中，洗涤是最主要的关键技术，应引起操作者的高度重视。

　　洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种，过程如下：

　　1.浸泡式

　　①吸干或甩干孔内反应液;

　　②用洗涤液过洗一遍;

　　③浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1～2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短;

　　④吸干孔内液体，吸干应彻底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾上拍干;

　　⑤重复操作③和④，洗涤3～4次。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间。

　　2.流水冲洗式

　　流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为彻底，且也简便、快速。已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳。

　　本生生物公司供应：ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。

天津本生详述PCR技术原理、实验步骤和应用

　　实验目的

　　1.掌握聚合酶链式反应的原理。

　　2.掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。

　　二、实验原理

　　PCR技术，即聚合酶链反应(polymerasechainreaction，PCR)是由美PECetus公司的KaryMullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍，这种迅速获取大量单核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义，大地推动了生命科学的研究进展。它不仅是DNA分析zui常用的技术，而且在DNA重组与表达、基因结构分析和功能检测中具有重要的应用价值。

　　PCR可以被认为是与发生在细胞内的DNA复制过程相似的技术，其结果都是以原来的DNA为模板产生新的互补DNA片段。细胞中DNA的复制是个非常复杂的过程。参与复制的有多种因素。PCR是在试管中进行的DNA复制反应，基本原理与细胞内DNA复制相似，但反应体系相对较简单。

　　PCR由变性－－退火－－延伸三个基本反应步骤构成：

　　①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应做准备;

　　②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;

　　③引物的延伸：DNA模板－－引物结合物在Taq酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。

　　重复循环变性－－退火－－延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

　　三、实验试剂与器材

　　模板DNA、2.5mmol/LdNTP

　　TaqDNA聚合酶(5U/μL)、SSR引物

　　10×buffer、15mmol/LMg2+、ddH2O

　　PCR仪、移液枪、PCR板

　　四、实验步骤

　　1、配制20μL反应体系，在PCR板中依次加入下列溶液：

　　模板DNA2μL

　　引物11μL

　　引物21μL

　　dNTP1.5μL

　　MgCl22μL

　　10×buffer2μL

　　ddH2O10μL

　　Taq酶0.5μL

　　2、设置PCR反应程序。

　　3、上样，启动反应程序。

　　4、扩增产物的电泳检测。

　　PCR技术原理、实验步骤和应用!先和大介绍到这，如果想要了解更多PCR的信息，可以关注天津本生生物，专业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材，欢迎广大客户来询。

　　天津本生详述：如何正确使用移液器?

　　DY步：移液器枪头的安装

　　移液器枪头的安装比较简单，常用的方法是旋转安装，把移液器顶端插入枪头，在轻轻用力下压的同时，左右微微转动，旋转上紧即可。

　　第二步：设定移液器的移液容积

　　为了实验结果的严谨性，一般移液容积设定要结合粗调和细调，首先通过旋转按钮将体积值迅速调整至接近自己的预想值;然后当体积值接近自己的预想值之后，应将移液器横置，水平放至自己的眼前，通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值，从而避免视觉误差所造成的影响。

　　第三步：预洗移液器枪头

　　为了确保实验的精度和准度，我们在安装了新的枪头或增加了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次，这样做的目的是为了让枪头内壁形成一道同质液膜，使整个移液过程具有更高的重现性。

　　第四步：移液

　　先将移液器排放按钮按至DY停点，再将枪头垂直浸入液面，浸入的深度为：

　　P2、P10 ≦ 1 mm;

　　P20、P100、P200 ≦ 2 mm;

　　P1000 ≦ 3 mm;

　　P5mL、P10mL ≦ 4 mm;

　　浸入过深的话，液压会对吸液的精确度产生一定的影响，当然，具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握。

　　第五步：放液

　　放液时，枪头紧贴容器壁，先将排放按钮按至DY停点，略停顿后，再按至第二停点，这样做可以保证枪头内无残留液体。如果这样操作后还有残留液体存在的话，就应该更换枪头了。

　　第六步：卸掉移液器枪头枪头

　　卸掉的枪头一定不能和新吸头混放，以免产生交叉污染。移液器用完后调回更大量程。

　　梅特勒-托利多有Pipet-Lite XLS+手动单道移液器、Pipet-Lite XLS+手动多通道移液器、Pipet-Lite XLS间距可调手动多道移液器、Pipet-Lite PL+ 移液器、Pipet-One 移液器，还有E4 XLS+ 单道电动移液器、E4 XLS+ 多道电动移液器、E4 XLS间距可调多道电动移液器，移液器设置、协议和服务警报可以通过密码进行保护，以符合GLP/ GMP认证的规定。 而且，GLP数据，如服务记录、循环和状态数据等，可完全防篡改。

　　如何正确使用移液器!先和大家介绍到这，如果想要了解更多移液器的信息，可以关注天津本生，本生生物给医药客户提供生物实验室检测试剂及耗材，欢迎广大客户来询。

　　天津本生详述冻存管的使用方法和注意事项!

　　冻存管又称菌种保存管、磁珠保存管、磁珠冻存管。微生物实验室常用的菌种保存方法有牛奶法、甘油法、斜面法等。复杂程度各异，效果也差别很大。目前国内的大多数实验室都是实验人员自行制作菌种保存管，这不仅增大了工作强度，并且由于各种条件的限制，菌种保存效果不能总是令人满意。所以，这就需要掌握好冻存管的使用方法和一些注意事项，这样才能起到很大的作用。

　　一、使用方法

　　1、使用冻存管储存样本时，严格要求应把冻存管放入液氮的气相层或冰箱中保存。如果冻存管储存于液氮液体中，液氮有一定几率会渗入冻存管内部，复苏时液氮气化导致管内外压力不平衡，这样极易造成冻存管的炸裂，并具有生物危害性。

　　2、操作冻存管复苏，全程使用安全防护设备，建议穿实验服、戴棉质手套且在安全的实验台上进行操作。条件允许情况下，请佩戴护目镜或防护面罩。由于夏季室内温度会高于冬季，请格外小心。

　　3、冻存细胞储存过程中，冻存管的冷冻温度须均匀。不均匀的受冻将会导致冰塞的产生，冰塞会yizhi两侧的液体温度传递进而产生危险的高压力并导致冻存管受损。

　　4、冻存的样本量不要超过冻存管要求的工作体积。

　　二、注意事项

　　1、冻存管保存环境

　　未经使用的冻存管可在室温或2-8℃保存12个月;已经接种的冻存管在-20℃保存，12个月内可有良好的菌株保存效果;已经接种的冻存管在-80℃保存，24个月内可有良好的菌株保存效果。

　　2、冻存管保存时间

　　未经使用的冻存管可在室温或2-8℃保存;已经接种的冻存管在-20℃或-80℃保存。

　　3、冻存管的使用步骤

　　从细菌纯培养物中挑取新鲜培养物配成大约为3-4麦氏比浊度的菌悬液接种与菌种保存管中;拧紧保存管，来回颠倒4-5次使细菌乳化，不能旋摇;把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃

　　三、重要提醒

　　1、需在生物安全柜中操作，确保操作的无菌，确保菌株不被污染。

　　2、冻存管中小瓷珠的颜色可能有所不同，这不代表任何产品功能的不同，只是方便用户进行细菌编码、标记。

　　3、在接种之前有如下情况产生，该冻存管不得使用：

　　a. 瓶子有漏液情况发生。

　　b. 冻存管内的冻存保护液混浊(说明已经被污染)。

　　c. 超过有效保存期。

　　4、小瓷珠一旦从冻存管中取出，不得以任何原因再放回冻存管中。

　　5、当丢弃使用过的或部分使用过的冻存管时，应注意生物危害的预防。

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　　天津本生-ELISA试剂盒实验操作技巧!

　　ELISA试剂盒在国内有许多种叫法，例如：ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等，比较常见的叫法是 ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等;ELISA试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测，自从60-70年代问世以来，得到*科研工作者的认可及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化领域的长足发展。Elisa生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。为了保证ELISA试剂盒实验质量，我们需要掌握一些小技巧以助于实验的成功，那么ELISA试剂盒的操作

　　技巧您知道吗?如若您掌握了这些实验技巧之后，在做ELISA实验中，试验起来会更熟练，大大的降低了实验过程中的风险，ELISA试剂盒实验的入门新手掌握了这些知识后，操作起来都会快的多。

　　ELISA试剂盒17个相关操作技巧如下：

　　1.切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

　　2.合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

　　3.在吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

　　4.务必做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。

　　5.样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。

　　6.为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

　　7.未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。

　　8.ELISA试剂盒实验中，加样后及时放人孵箱，标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。

　　9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。

　　10.人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。

　　11.每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

　　12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中，防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。

　　13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。

　　14.没有去离子水或双蒸水时，可以使用娃哈哈纯净水配制溶液，切勿使用自来水。

　　15.在使用微量加样器时，吸取不同瓶子中液体后要更换枪头，即使吸取标准品溶液。

　　16.吸取液体时速度不易太快，以免产生气泡，人ELISA试剂盒吸取的量不够准确。

　　17.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸，减少误差。

　　天津本生-ELISA试剂盒实验操作技巧!我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　天津本生详述PCR管产品特征及用途

　　本生生物公司供应：elisa试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。

　　产品描述：

　　天津本生提供的PCR管是由特殊配方的聚丙烯材质制造，超薄管壁设计更便于热量的传递以及温度的控制。突盖和平盖两种管盖设计，满足不同实验需求。标准管型设计可以更好的匹配主流PCR仪进行实验。

　　PCR产品介绍：次性PCR管采用聚丙烯(PP)材料制成,体化设计,整套产品配合平稳,透明性强,柔软性能好,耐腐蚀性强,产品防静电,气密性良好.

　　>产品特点:

　　>无DNA酶和RNA酶，无DNA和RNA;

　　>超薄均匀型管壁与产品均性依靠的精密模具实现;

　　>超薄壁技术提供的热传导效应, 促使样品地实现扩增;

　　>孔板带有裁剪线槽，可裁剪成24孔、48孔板使用;

　　>纵向字母(A-H)，横向数字(1-12)标记，标记清晰;

　　>锥形管的凸边设计有效地保证密封性，预防交叉污染;

　　>适用于大多数自动化实验仪器;

　　>使用100%原包装进口塑胶材料，无热解析出物，无内毒素;

　　产品用途：

　　实验室PCR分析

　　食品安全检测

　　疾病控制检测

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　　低吸附离心管的一些关键点!

　　低吸附离心管常用于对蛋白质进行浓缩和除盐操作，对色谱洗液和生理梯度片断进行缓冲液交换或者除盐操作，从细胞的细菌培养上清液或者溶菌液中回收生物分子。清洗和浓缩乳胶悬浮液，离心管通常不需要预处理即可使用，不过对于蛋白质样本处理，特别是较稀的蛋白溶液来说，用膜浓缩，回收率常常是不定量的，虽然PES材料使非特异性吸附最小化，但是，某些蛋白，特别是稀的时候会有问题，非特异性结合的程度随着个别蛋白结构的不同而不同，含有带电的或者疏水结构的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。

　　低吸附离心管离心时注意事项：避免过长时间或者高速离心，虽然我们产品有防死端设计，可避免过度离心造成膜表面干燥而造成不可逆吸附，避免过度浓缩，终体积越小，越容易因表面吸附而损失得率，离心后采用轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液，必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面，有助于减少膜表面吸附，能提高回收率，尽量避免TIPS接触膜表面。

　　对于低吸附离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失，大多数情况下，在浓缩稀释蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率，因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点，钝化的方法是预先用高容积的钝化溶液预浸泡柱子一小时以上，蒸馏水冲洗柱子，再用蒸馏水离心一次以除去可能残留在膜上的钝化溶液，注意钝化处理后别让膜干了，如果要留待以后使用，需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。

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　　天津本生将您怎样选购ELISA试剂盒?

　　今天天津本生小编给大家科普一下怎样选购适合ELISA试剂盒。目前市场上的ELISA试剂盒质量参差不齐，如何去挑选适合自己的试剂盒就显得特别重要，具体有以下几点可供参考：

　　一、特异性

　　ELISA试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分，抗体对有关，若抗体对中之一为多抗，另一个必须为单抗，建议使用双单抗。

　　二、灵敏度

　　灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的能力，用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒，如果待检指标量很低，一般的试剂盒不能满足要求，可选择高敏的ELISA试剂盒。

　　三、重复性

　　科学实验讲求重复性，一般ELISA试剂盒，其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。

　　四、简便性

　　试剂盒在保证高质量数据的情况下，实验时间越短，操作越便利，越容易受到用户欢迎!这也不妨作为选择试剂盒的一个指标。

　　五、经济性

　　进口分装试剂盒因为省去不少物流和报关费用，与国外进口试剂相比价格上有比较大的优惠，而且能提供比较灵活的包装规格，特别是48T等小包装，目前很多客户因为对品牌的信任度问题，主要还是选择国外进口，但是国内进口分装比较成熟的公司仍然是一个非常好的选择。

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　　本生详述详述：冻存管的分类和注意事项

　　冻存管别名冷冻管，一般用在实验室生物材料的低温保藏。

　　冻存管一般都是根据实验需要按容量划分的，如0.5ml,1.0ml,1.5ml,1.8ml,   2.0ml,4ml,5ml,7ml,10ml等，也可以按特殊用途分，一般的冻存管不能进入液氮里，只有特殊材料处理的才可以放入。同时冻存管还有双层的和无双层的带硅胶垫和没有硅胶垫的等种种，还有无色和杂色及各种纯色等不同，这些都是根据实验需要或实验方便各厂家自己设计的，没有严格意义上的划分。

　　购买时应根据自己的需要看购买的冻存管是否合适，一般冻存管不能进入液氮里边，如果需要进入液氮保藏的就要选择密封的耐低温的用冻存管，还有要认清所购买的冻存管是否是无菌的，如果实验要求较高就要购买无菌和无DNA,RNA的冻存管。另外如果是新买的,没有在外面打开,可直接使用,如果在外面打开过,就高压一下。

　　目市场上冻存管种类繁多，各个厂家生产的冻存管规格和材料不一样其价格差距也较大，但一般来说进口的比国产的要贵点有时候相差数倍，这是因为国外的冻存管所用材料很好，一般可用于超低温保藏，另外国外的产品种类很多，一般能成一系列并且有各种颜色可供不同用户选择，一般品质很有，这些方面国产的就要差那么一些，一般生产的是普通用冻存管，品种也不是很多，颜色比较单一但价格也相对低廉一些，如1.5ml冻存管国产的单价大概在0.2-0.3元之间，国外的一般都超过1块钱了。一般情况下，国产的各型冷冻管价格都在1块以下，进口的各型一般都超过1块了，有些特殊用途的达到4~5块了。

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　　英文名称：Human HO ELISA Kit

　　实验类型：夹心法

　　检测范围：31.25 ng/ml - 1000 ng/ml

　　测限：1 ng/ml

　　应用范围：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途)

　　人血红素加氧酶(HO)ELISA试剂盒仅供研究使用

　　人血红素加氧酶(HO)ELISA试剂盒实验目的

　　本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人血红素加氧酶(HO)的含量。

　　有效期：6个月

　　保存条件：2-8℃

　　实验原理

　　试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人血红素加氧酶(HO)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成ZZ的黄色。颜色的深浅和样品中的人血红素加氧酶(HO)呈正相关。用酶标仪在450nm  波长下测定吸光度(OD 值)，计算样品浓度。

　　人血红素加氧酶(HO)ELISA试剂盒组成

　　试剂盒组成96孔配置48孔配置备注

　　微孔酶标板8孔×12条8孔×6条 无

　　标准品0.3mL×6管0.3mL×6管无

　　样本稀释液6mL3mL无

　　检测抗体-HRP10mL5mL无

　　20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释

　　底物A6mL3mL无

　　底物B6mL3mL无

　　终止液6mL3mL无

　　封板膜2张2张无

　　说明书1份1份无

　　自封袋1个1个无

　　备注：

　　1. 标准品浓度依次为：1000、500、250、125、62.5、0 ng/ml

　　2.  经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

　　样本处理及要求

　　1.  血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C  1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

　　需要而未提供的试剂和器材

　　1. 酶标仪(450nm)

　　2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

　　3. 37℃恒温箱

　　4. 蒸馏水或去离子水

　　试剂准备

　　试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

　　20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

　　操作步骤

　　1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

　　3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

　　4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

　　6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

　　人血红素加氧酶(HO)ELISA试剂盒注意事项

　　1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

　　2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

　　3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

　　4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

　　5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

　　6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

　　7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

　　8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

　　9. 不能使用过期产品。

　　10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

　　洗板方法

　　手工洗板方法：吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次;将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。根据需要，重复此过程数次。

　　自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

　　实验结果计算

　　以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。

　　(此图仅供参考)

　　人血红素加氧酶(HO)ELISA试剂盒性能

　　1. 检测范围：31.25 ng/ml - 1000 ng/ml

　　2. 灵敏度：检测浓度小于1 ng/ml

　　3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

　　4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

　　天津本生生物共享:ELISA试剂盒质保的七要素

　　ELISA试剂盒对化学试剂的纯度、净度以及精密度要求愈加严厉和专门化。对试剂的加强管理。ELISA试剂盒质量确保是一个杂乱的进程，许多重要的环节都影响到检测的质量。今日天津本生生物与您共享影响ELISA试剂盒质保的七要素。

　　一、办法学的影响

　　ELISA测定模式包含以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞赛抑制法，其中竞赛抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作时差所引起的平竞赛等要素的影响，成果重复性较差，质量较难控制。

　　二、试剂要素

　　不同批次的ELISA试剂在制造进程中很难确保质量完全一致，即使是经过批批检的项目其检测成果也存在差异，因而必须选择和订货长批号的试剂，并确保保存条件。严厉执行这一规范可以防止因试剂批号改动而从头树立质控系统及从头评估试剂的杂乱进程，并且可以确保成果的稳定性;对于效期短、使用率低的试剂，应当小量分装，每次使用则取分装部分即可，防止重复冻融造成试剂的失效。

　　三、样本要素

　　标本搅扰要素包含内源性搅扰要素和外源性搅扰要素，ELISA试剂盒前者包含类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等，后者包含标本溶血、标本被细菌污染、标本储存时间过长、标本凝结不全、冷冻标本的重复冻融等。

　　四、操作要素

　　ELISA操作步骤杂乱，操作不当将引起较大的误差。加样、温育、洗涤、显色、比色。

　　五、灰区的设置

　　通常情况下，ELISA定性实验以“阳性”和“阴性”来陈述成果，两者间有一条分界线被称为

　　“阳性判断值”(cut-off value，CO值)，这是定性免疫测定成果陈述的依据。

　　六、标本复查

　　ELISA手工检测进程杂乱，影响要素较多，即使室内质控在控，也可能因孔间差异而造成成果的差异，因而加大复查力度是确保成果准确性的牢靠办法，比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及罕见模式的检测成果进行复查。

　　七、常表明成果的常用办法

　　1.定性测定

　　2.半定量测定 成果一般以滴度表明。

　　3.定量测定 即用已知量的规范品作一系列稀释后进行ELISA测定，制作规范曲线，成果以jue对量或单位表明。在ELISA试剂盒定量检测中每一块反应板都必须制作相应的规范曲线。

　　本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒仅供研究使用

　　大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒实验目的

　　本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠髓过氧化物酶(MPO)的含量。

　　有效期：6个月

　　保存条件：2-8℃

　　实验原理

　　试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠髓过氧化物酶(MPO)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠髓过氧化物酶(MPO)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值)，计算样品浓度。

　　大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒组成

　　试剂盒组成96孔配置48孔配置备注

　　微孔酶标板8孔×12条8孔×6条 无

　　标准品0.3mL×6管0.3mL×6管无

　　样本稀释液6mL3mL无

　　检测抗体-HRP10mL5mL无

　　20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释

　　底物A6mL3mL无

　　底物B6mL3mL无

　　终止液6mL3mL无

　　封板膜2张2张无

　　说明书1份1份无

　　自封袋1个1个无

　　备注：

　　1. 标准品浓度依次为：480、240、120、60、30、0 U/L

　　2. 经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

　　样本处理及要求

　　1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　注：标本溶血会影响ZH检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

　　需要而未提供的试剂和器材

　　1. 酶标仪(450nm)

　　2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

　　3. 37℃恒温箱

　　4. 蒸馏水或去离子水

　　试剂准备

　　试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

　　20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

　　操作步骤

　　1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

　　3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

　　4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

　　6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

　　注意事项

　　1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

　　2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

　　3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

　　4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

　　5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

　　6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

　　7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

　　8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

　　9. 不能使用过期产品。

　　10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

　　洗板方法

　　手工洗板方法：吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次;将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。根据需要，重复此过程数次。

　　自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

　　实验结果计算

　　以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。

　　大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒性能

　　1. 检测范围：15 U/L – 480 U/L。

　　2. 灵敏度：ZD检测浓度小于1.0 U/L。

　　3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

　　4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

　　产品关键字：大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 大鼠髓过氧化物酶 ELISA试剂盒 大鼠(MPO)ELISA试剂盒

　　天津本生|一次性酶标板

　　在酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immuno-sorbent Assay, ELISA)中，抗原、抗体和其它生物分子通过多种机制吸附至载体表面，这包括通过疏水键、亲水/离子键的被动吸附，通过引入其它活性基团如氨基和碳基的共价结合，以及通过表面改性后的亲水键结合。参与免疫学反应的抗原、抗体、标记抗体或抗原的纯度、浓度和比例;缓冲液种类、浓度和溶液离子强度、PH值和反应温度、时间等条件起着关键作用。此外，作为载体的固相材料聚苯乙烯(Polystyrene)表面对抗原、抗体或抗原抗体复合物的吸附也起着重要作用。

　　一次性酶标板100%选用通过USP测试，Class Ⅵ等级灭菌的聚苯乙烯作为原料，采用了目前国际上的低温高分子材料表面处理技术和制造生产工艺。适用于ELISA试验中的安全、可靠和有效的载体，可用于酶联免疫吸附试验：如：免疫、转基因产物鉴定，以及医学临床诊断中等。

　　1)厚度均匀、孔径大小均一、底部无畸变

　　2)板体透明，测量更具有灵敏性

　　3)分为96孔不可拆板和48孔、96孔可拆板，选择更多样

　　4)另外，还配有8孔、12孔孔条，与酶标板配合更经济实惠

　　5)CV发射率低于5%

　　6)可防止交叉污染的孔边设计，字母数字标号，方便实验 .无菌

　　一次性酶标板的介绍!先和大家介绍到这，如果想要了解更多酶标板的信息，可以关注天津本生生物，业给生物行业客户提供生物实验室检测耗材，欢迎广大客户来询。

　　本生生物详述：实验室离心机离心管分类!

　　实验室离心机离心管种类有多种。

　　1、按材质可分：

　　塑料离心管、玻璃离心管和不锈钢离心管等。

　　2、按速度可分：

　　低速离心管和高速离心管。

　　3、按容量可分：

　　微量离心管、小容量离心管和大容量离心管。一般称容量大于100mL的离心管为离心瓶。

　　4、按离心管口部形状可分：

　　缩口离心管和直口离心管。

　　5、按离心管底部形状可分：

　　圆底离心管、尖底离心管和平底离心管。

　　6、按离心管与盖接合形式可分：

　　摁盖离心管和螺口离心管。

　　7、按用途可分：

　　制备型离心管和分析型离心管。

　　本生生物供应：光度计，检测仪，免疫仪，全系荧光定量PCR耗材，PCR八联管，进口PCR板，移液器，钻石吸嘴，离心管，冻存管，培养皿，培养板，培养瓶，吸头，仪器及手套，色谱耗材，针头过滤器。

　　血清的主要成分和功能

　　牛血清在细胞培养中对细胞的生长增殖具有重要甚至是难以替代的作用，它含有丰富的细胞生长必须的营养成分。主要有以下成分和功能：

　　A、 血清中的主要物质—蛋白质如白蛋白等具有缓冲细胞培养液酸碱度、维持渗透压的作用。

　　B、 转铁蛋白、甲状腺素结合蛋白等结合蛋白，有识别维生素、脂类、金属和其它激素等，并能与有毒金属和热原质结合，从而起到jiedu作用。

　　C、 纤维粘连素、胎牛血清中的胎球蛋白、贴壁因子等能促进细胞贴壁、铺展。

　　D、  多肽类如血小板促生长因子、成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子、胰岛素、类胰岛素生长因子、促生长激素、等能支持细胞分裂增殖并维持细胞对数生长。

　　E、巨球蛋白等蛋白酶抑制剂能抑制蛋白酶，保护细胞不受损害。

　　F、 血清中还含有丰富的氨基酸、葡萄糖、酮酸及与蛋白相结合状态的微量元素等，对细胞培养均有意义。

　　正因为血清具有如此复杂的成分和重要的功能，所以血清的保存和使用显得非常重要。过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

　　血清的主要成分和功能?我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。   既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　核酸提取耗材深孔板，磁套的组成及特点?

　　深孔板规格：

　　96孔方孔尖底深孔板

　　96孔方孔尖底深孔板(灭菌)

　　96孔尖底磁套

　　96孔尖底磁套(灭菌)

　　96孔方孔圆底深孔板

　　96孔浅孔板

　　96孔工形圆底深孔板

　　48孔方孔深孔板

　　孔深孔板及磁套头

　　深孔板，采用高纯度聚丙烯PP制造，化学稳定性高，可以高温灭菌，适合多道移液器及自动化设备，产品主要有方孔圆底、方孔尖底、工字型、浅孔板等型号，符合SBS规定，可稳定叠高，密封性可靠，孔板上部平整均一，保证密封有效性，可选Y辐照灭菌。

　　【产品特点】

　　由聚丙烯PP制成，安全性更高

　　使用三种材料密封：不干胶密封、硅胶密封、热封膜密封

　　按照12×8编排，用于提取游离DNA，适配KingFisher Flex

　　应用广泛，例如：高通量筛选(HTS)、细胞、组织培养、连续稀释、试剂转移及低至-80℃的样品保存(PP材质ZD耐受温度-80℃)

　　深孔板参照SBS标准生产，可堆叠、便于存放

　　无DNA酶、无RNA酶，无热源

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　　BUNSEN本生Elisa试剂盒实验的技巧及注意事项

　　在操作elisa试剂盒实验前，不少老师会找寻很多的相关实验资料，网上的资料一大堆，然而真正所能够需要用到的技巧和注意也就那几条，熟练的了解并掌握之后再应用到实验中就会简单的多。

　　一、加样的经验总结

　　加样或加试剂时，请注意在吸取标本/标准品，酶结合物或底物时，个孔与一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间控制 在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。

　　二、孵育的三条必知

　　1.为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标 板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发;

　　2.洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;

　　3.同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

　　三、ELISA洗涤小技巧

　　洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直 接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响*后的酶标仪读数。

　　四、反应时间的控制

　　加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔 10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。

　　五、操作说明

　　1.封板膜只做一次性使用。

　　2.标本中待测物质含量过高时先将样本稀释一定倍数后再测定，计算时请乘以稀释倍数。

　　3.各步加样均使用加样器，并经常校对其正确性，一次加样时间控制在5分钟内(标本数目多的时候，上海研域推荐使用排枪加样)。

　　4.液体标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

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