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- Liuguixiunl 2015-07-01 00:00:00
- 由光栅方程d(sinα±sinβ)=mλ可知,波长为λ的一级(m=1)光谱线,波长λ/2的二级(m=2)光谱线、波长为λ/3的三级(m=3)光谱线……都具有同样的衍射角。即βλ,1=βλ/2,2=βλ/3,3=……=βλ/m,m,这就是衍射光栅光谱的级次重叠。即衍射光栅在同一位置有不同级次的不同波长的光谱线。在宽波段范围内进行高分辨率光谱研究或光谱分析工作时,光栅光谱的级次重叠是非常明显的,必须采取有力的措施,把不需要的波段隔离掉或滤掉;例如,采用前置单色器、采用相应波段的滤光片等。才能避免不需要级次光谱的干扰,才能保证紫外可见分光光度计的分辨率和分析测试数据的准确性和可靠性。
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1.4.如果峰形解析不正确(未完全分离的重叠峰),可能会被误认为柱(色谱柱)或缓冲液的问题。
如果仅部分解析两个峰形(两个峰仅有部分分开),则可能会认为其是裂峰或双峰。如图4显示的情形。
在图4a中,可观察到与图3极为类似的峰值变形(峰变形),其表明玻璃料被堵塞(筛板堵塞)。
改变柱并未纠正这个问题(更换色谱柱不能解决此问题),所以玻璃料(筛板)堵塞并非导致这一现象的原因。如果柱上样品的质量减少(减少上样量)(图4b),峰形看起来更像是两个峰,而不是一个肩形峰。
这便需要进一步研究,以确定是否存在第二个峰。可以通过修改方法条件来完全分离两个峰(由此进行了进一步的研究,证实了存在第二个峰。
调整方法的条件后,两个峰完全分离)。
图4. 由于存在第二个组分而产生分裂峰。
(a)25ng / mL,和(b)等离子体中10ng/ mL的药物(第二个峰)(10 ng/mL血浆中的药物(第二个峰))。来源[1]。
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