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  沾化人lv 2017-11-04 00:00:00

  电泳离蛋白质根据蛋白质原理：般通化吧蛋白提取蛋白质带电荷混合品蛋白质其原理第向基于蛋白质PI同用等电聚焦电泳极与负极都发电解反应向着与其电性相反电极移现象称电泳根据蛋白质电荷同即酸碱性质同离蛋白质混合物1、电泳：外电场作用带点颗粒向着与其电性相反电极移种现象称电泳电泳技术用于氨基酸、肽、蛋白质核苷酸等物析离制备区带电泳由于支持物电泳蛋白质混合物离若干区带电泳前用缓冲液浸润薄膜或滤纸等支持物或用缓冲液直接配置凝胶待离蛋白质品加端或央支持物两端与电极连接通电电泳电泳完毕各组布同区域用显色剂（蛋白质用考马斯亮蓝或氨基黑等染色）显色显示各组氨基酸混合物特别寡聚核苷酸混合物电泳往往能完全种情况第电泳斑点通支持介质间接触印迹转移第二支持介质旋转90°进行第二电泳种称双向电泳2、聚丙烯酰胺凝胶电泳：聚丙烯酰胺凝胶支持物般制凝胶柱或凝胶板凝胶由相连两部组（部浓缩胶部离胶）两部凝胶浓度、缓冲液组离强度、pH及电场强度都同即连续性电泳品首先连续两相间积聚浓缩薄起始区带再进行电泳离电泳三种物理效应：1、品浓度效应；2、凝胶离筛选效应；3、般电泳离电荷效应3、毛细管电泳：GX毛细管电泳、毛细管区带电泳、自由溶液毛细管电泳、毛细管电泳离氨基酸、肽、蛋白质、DNA片段核酸及种用于手性化合物离毛细管减少由于热效应产许问题提高热散失助于消除由于热引起扩散增加造流区带变宽管需要加入稳定介质即进行自由流电泳电泳迁移引起溶液荷电向相反电荷电极移虽析品电泳迁移离电渗作用使溶液向负极流且电渗电流强其速度般比品电泳速率答所、负离性都推向负极荷电说电泳迁移电渗流效致且移快先达负极随着离接近负极都通紫外检测器并信号传递给记录仪所结离组紫外吸收间峰谱4、等点聚焦（IEF）离蛋白质混合物具pH梯度介质（浓蔗糖溶液）进行外电场作用各种蛋白质移向并聚焦等于其等电点梯度处并形窄区带pH梯度制作般利用两性电解质脂肪族胺羧类同系物具相近相同解离数等电点外电场作用自形pH梯度5、层析聚焦：根据蛋白质等电点差异离蛋白质混合物柱层析原理：用特种缓冲液滴洗填充柱特种缓冲交换剂层析柱自自建立起连续pH梯度；同加柱端蛋白质品随缓冲液按各自等电点聚焦相应pH区段并程随pH梯度移蛋白质混合物各组先柱流达离纯化目

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