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- 真真切切ii 2017-06-06 00:00:00
- 市售酚中含有醌等氧化物,这些产物可引起磷酸二酯键的断裂及导致RNA和DNA的交联,应在160℃用冷凝管进行重蒸。重蒸酚加入0.1%的8-羟基喹啉(作为抗氧化剂),并用等体积的0.5mol/L Tris·Cl (pH8.0)和0.1mol/L Tris·Cl(pH8.0)缓冲液反复抽提使之饱和并使其pH值达到7.6以上,为Tris饱和酚(pH7.8左右)。 饱和酚在核酸纯化中有2种,一种为Tris饱和酚(pH7.8左右),故也称为碱性酚。另一种就是酸性酚,也就是水饱和酚。用于RNA提取时,则要制备酸性酚,也就是水饱和酚,因为在酸性条件下,RNA被分配于水相,而DNA在有机相,从而达到分离获得RNA的目的。水饱和酚同时能使蛋白质变性、沉淀,从核酸提取液中将蛋白质分离除去。因此,pH值不同,应用不同,切不可弄混,以免造成实验失败。
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