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- qdfine 2017-11-25 00:00:00
- 实验原理： 纸层析法（paper chromatography）是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术，可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。 纸层析法又称纸色谱法，是用滤纸为支持物，所用展层溶剂大多由水和有机溶剂组成，滤纸纤维与水的亲和力强，与有机溶剂的亲和力弱，因此在展层时，纸纤维上吸附的水分是固定相，有机溶剂是流动相。溶剂由下向上移动的，称上行法；由上向下移动的，称下行法。将样品点在滤纸上(此点称为原点)，进行展层，样品中的各种氨基酸在两相溶剂中不断进行分配。 由于它们的分配系数不同，不同氨基酸随流动相移动的速率就不同，于是就将这些氨基酸分离开来，形成距原点距离不等的层析点。 引申： 氨基酸的定性鉴别：紫外吸收光谱法 精密称取酪氨酸、色氨酸、苯内氨酸各适量，分别用水制成1ml含20μg（色氨酸）、40μg（酪氨酸）、200μg（苯丙氨酸），在波长230~300nm测定各氨基酸的吸收光谱。 在20种天然氨基酸中，只有酪氨酸、色氨酸和苯内氨酸，在紫外区Z大吸收，酪氨酸的Z大吸收峰的波长275nm处，色氨酸的Z大吸收峰在波长280nm处，同时在波长288nm处有一个肩峰，苯丙氨酸Z大的吸收峰在波长258nm处，同时在257nm和264nm处有两个较小的吸收峰。由此可见，这三种氨基酸可以通过紫外吸收光谱加以鉴别。
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